Lignée cellulaire Neuro-2a
Neuro-2a est une lignée cellulaire neuronale dérivée de la souris largement utilisée dans la recherche en neurosciences. Ces cellules servent principalement à étudier le développement et la différenciation neuronaux, la neurotoxicité, les voies de signalisation cellulaire et la croissance axonale. Elles sont également utilisées à des fins de développement et de criblage de médicaments.
Cet article porte sur les aspects importants des cellules de neuroblastome Neuro-2a qui pourraient vous être utiles avant de commencer à travailler avec cette lignée. Il abordera principalement :
- Les caractéristiques générales et l’origine des cellules Neuro-2a
- Les renseignements relatifs à la culture de la lignée cellulaire Neuro-2a
- Les avantages et les inconvénients de la lignée cellulaire Neuro-2a
- Les applications de recherche de la lignée cellulaire Neuro-2a
- Publications de recherche portant sur les cellules Neuro-2a
- Ressources sur les cellules Neuro-2a : protocoles, vidéos et plus encore
Caractéristiques générales et origine des cellules Neuro-2a
Cette partie de l’article traitera du contexte et des caractéristiques fondamentales de la lignée cellulaire Neuro-2a qu’il est essentiel de connaître avant de l’utiliser. Vous y apprendrez : Qu’est-ce que la lignée cellulaire Neuro-2a? Quelle est l’origine de la lignée cellulaire Neuro-2a ? En quoi consiste la différenciation cellulaire des cellules Neuro-2a? Quelle est la taille d’une cellule Neuro-2a? Quelle est la morphologie des cellules Neuro-2a?
- Les cellules Neuro-2a proviennent d’une tumeur spontanée (neuroblastome) d’une souris albinos (souche A). La lignée cellulaire a été établie par R.J. Klebe et F.H. Ruddle.
- Les cellules de neuroblastome Neuro-2a présentent une morphologie de cellules souches à la fois neuronale et amiboïde.
- La taille des cellules Neuro-2a est de 12 micromètres de hauteur [1].
- Le nombre de chromosomes des cellules Neuro-2a peut varier de 59 à 193, avec un nombre modal de 95. Le caryotype de ces cellules de neuroblastome est instable, variant entre 94 et 98 chromosomes.
Informations sur la culture de la lignée cellulaire Neuro-2a
Les cellules Neuro-2a sont largement utilisées dans les laboratoires de recherche en neurosciences. Avant de travailler avec ces cellules, vous devez prendre connaissance des renseignements essentiels sur la culture cellulaire mentionnés ci-dessous. Cela vous aidera à mener à bien vos expériences. Vous apprendrez : Qu’est-ce qu’un milieu de culture pour les cellules Neuro-2a? Comment cultiver les cellules Neuro-2a? Quel est le temps de doublement des cellules Neuro-2a? Quelle est la densité d’ensemencement des Neuro-2a ? Quel est le protocole de culture des cellules Neuro-2a? Quel est le milieu de culture des cellules Neuro-2a?
Points clés pour la culture des cellules Neuro-2a
Temps de doublement :
Le temps de doublement des cellules Neuro-2a est d’environ 70 heures.
Adhérentes ou en suspension :
Neuro-2a est une lignée cellulaire adhérente.
Densité d’ensemencement :
La densité d’ensemencement optimisée pour la lignée cellulaire Neuro-2a est de 1 × 10⁴ cellules/cm². Pour l’ensemencement, les cellules sont lavées avec une solution saline tamponnée au phosphate exempte de magnésium et de calcium (1x). Par la suite, on ajoute une solution de repiquage (Accutase), puis on incube les cellules pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Après la dissociation cellulaire, on ajoute du milieu frais, puis on centrifuge les cellules. Le culot cellulaire récolté est soigneusement remis en suspension, puis les cellules sont transférées dans un récipient de culture pour la croissance.
Milieu de croissance :
On utilise l’EMEM pour la culture des cellules Neuro-2a. Il contient 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2 mM de L-glutamine, 1,5 g/L de NaHCO₃, de l’EBSS, 1 mM de pyruvate de sodium et des acides aminés non essentiels (NEAA) pour une croissance cellulaire optimale. Le milieu doit être remplacé 1 à 2 fois par semaine.
Conditions de croissance :
Les cultures de Neuro-2a sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37 °C relié à une source de CO₂ à 5 %.
Conservation :
Les cellules doivent être conservées à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique à très basse température ou en phase vapeur d’azote liquide pour une conservation à long terme.
Procédure de congélation et milieu :
Les milieux CM-1 ou CM-ACF sont utilisés pour congeler les cellules Neuro-2a. Les cellules sont congelées selon un processus de congélation lente qui ne permet qu’une baisse de 1 °C par minute. Cela protège les cellules contre le choc thermique et préserve leur viabilité.
Procédure de décongélation :
Pour décongeler les cultures congelées, on place le flacon dans un bain-marie à 37 °C pendant 40 à 60 secondes, jusqu’à ce qu’il ne reste plus qu’un petit morceau de glace. On ajoute ensuite du milieu de culture, puis les cellules sont centrifugées. Cette étape permet d’éliminer les composants du milieu de congélation. Le culot cellulaire est ensuite remis en suspension, et les cellules sont transférées dans un nouveau flacon rempli de milieu de culture. Les cellules sont ensuite placées dans un incubateur à 37 °C pendant au moins 24 heures.
Niveau de biosécurité :
La manipulation et l’entretien des cultures de Neuro-2a doivent obligatoirement se faire dans un laboratoire de niveau de biosécurité 1.
- Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire Neuro-2a
- Applications de la lignée cellulaire Neuro-2a en recherche
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire Neuro-2a
- Caractéristiques générales et origine des cellules Neuro-2a
- 5. Publications de recherche portant sur les cellules Neuro-2a
- Ressources sur les cellules Neuro-2a : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire Neuro-2a
Les cellules Neuro-2a présentent certains avantages et inconvénients qui les distinguent des autres lignées cellulaires neuronales. Voici une liste des principaux avantages et inconvénients de ces cellules.
Avantages
Les avantages de la lignée cellulaire murine de neuroblastome Neuro-2a sont les suivants :
-
Facilité d’entretien :
La lignée cellulaire Neuro-2a ne nécessite pas de procédures de culture cellulaire complexes ou délicates. Elle est facile à cultiver et à entretenir dans les laboratoires de recherche.
-
Modèle de cellule neuronale in vitro :
Neuro-2a est un modèle de cellule neuronale pratique, largement utilisé par les chercheurs dans le cadre d’études sur le développement et la différenciation des neurones.
Inconvénients
Les inconvénients des cellules Neuro-2a sont les suivants :
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Origine murine :
Les cellules Neuro-2a sont d’origine murine, et les chercheurs doivent faire preuve de prudence lorsqu’ils extrapolent les résultats d’études menées sur des modèles murins à la santé et aux maladies humaines, car la biologie de la souris et celle de l’humain peuvent présenter des différences significatives.
Applications de la lignée cellulaire Neuro-2a en recherche
Les cellules Neuro-2a offrent de nombreuses applications dans le domaine de la recherche en neurosciences. Voici quelques utilisations prometteuses de cette lignée cellulaire :
- Développement neuronal : Neuro-2a est un modèle de cellule neuronale in vitro largement utilisé pour étudier le développement neuronal et les processus connexes tels que la différenciation, la croissance axonale et la formation des synapses. Une étude menée en 2020 a utilisé des cellules Neuro-2a pour explorer le rôle du microARN-124 dans la différenciation des cellules neuronales induite par l’acide rétinoïque [2]. Une autre étude a porté sur l’expression du récepteur gamma de l’acide rétinoïque (RARG) et du miARN-124 dans la lignée cellulaire de neuroblastome (N2A). Cette étude a suggéré que le RARG est ciblé par le miR-124 et qu’il inhibe la croissance des neurites [3].
- Neurotoxicité : Les cellules Neuro-2a sont également utilisées pour évaluer les effets toxiques des médicaments, des produits chimiques ou des facteurs environnementaux sur les cellules neuronales. Par exemple, une étude menée par Zhihong Yin et ses collègues a porté sur la neurotoxicité du bisphénol A (BPA), un produit chimique présent dans l’environnement, à l’aide de cellules Neuro-2a. Ils ont observé que le BPA inhibe la différenciation et la prolifération des cellules neuronales en perturbant leur intégrité cellulaire et synaptique [4].
- Criblage de médicaments : Les cellules Neuro-2a sont également utilisées pour évaluer les activités thérapeutiques de divers médicaments, composés et produits naturels. Par exemple, une étude a utilisé des cellules Neuro-2a pour étudier le potentiel antioxydant de l’extrait de la plante Ginkgo biloba. De plus, cette recherche a suggéré que cet extrait entraîne une diminution de l’agrégation de la protéine Aβ et pourrait constituer un traitement potentiel de la maladie d’Alzheimer [5].
5. Publications de recherche portant sur les cellules Neuro-2a
Voici quelques articles de recherche intéressants portant sur la lignée cellulaire Neuro-2a.
Cette étude, publiée dans le Journal of Natural Medicines en 2018, a examiné les effets thérapeutiques des alkamides isolés du poivre blanc (P. nigrum) sur les cellules neuronales Neuro-2a.
Cette recherche, publiée dans *Acta Biochimica et Biophysica Sinica* en 2020, a suggéré que le gène Nkx2.1 joue un rôle important dans le développement du cerveau de la souris en régulant la cascade de signalisation Shh.
Cet article, publié dans la revue *Toxicology and Industrial Health* (2023), suggère qu’un produit chimique présent dans l’environnement, le bisphénol A, déclenche une neurotoxicité dans les cellules Neuro-2a et perturbe leur fonctionnement synaptique et cytosquelettique.
Cet article, paru dans Pharmaceuticals (2021), suggère qu’un médicament, l’hexaréline, module les cascades PI3K/AKT et MAPK dans les cellules de neuroblastome (Neuro-2a) et inhibe l’apoptose des cellules Neuro-2a induite par le peroxyde d’hydrogène.
Cet article de recherche publié dans Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) suggère que l’extrait de fruit d’Emblica officinalis inhibe la neuroinflammation dans les cellules Neuro-2a et peut donc être bénéfique dans le traitement des maladies neuroinflammatoires.
Ressources sur les cellules Neuro-2a : protocoles, vidéos et plus encore
Voici les ressources en ligne disponibles sur les cellules Neuro-2a. Elles comprennent le protocole de culture et de transfection des cellules Neuro-2a.
- Protocole de transfection des cellules Neuro-2a : Les cellules Neuro-2a constituent un hôte de transfection approprié. Ce lien vous guidera dans le protocole de transfection de cette lignée cellulaire. L’efficacité de la transfection des cellules Neuro-2a varie d’un réactif à l’autre.
Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules Neuro-2a.
- Protocole de culture des cellules Neuro-2a : Ce lien vous aidera à vous familiariser avec le protocole de repiquage des cellules Neuro-2a.
- Cellules Neuro-2a : Le site Web contient des informations complètes sur les milieux de culture des cellules Neuro-2a, la densité d’ensemencement, ainsi que les protocoles de repiquage et de manipulation des cultures cryoconservées et prolifératives.
Références
- Lulevich, V., et al., La mécanique unicellulaire offre un moyen sensible et quantitatif d’étudier les interactions entre le peptide bêta-amyloïde et les cellules neuronales. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31) : p. 13872-7.
- You, Q., et al., Rôle du miR-124 dans la régulation de la différenciation des cellules Neuro-2A induite par l’acide rétinoïque. Neural Regen Res, 2020. 15(6) : p. 1133-1139.
- Su, X., et al., Le récepteur gamma de l’acide rétinoïque est ciblé par le microARN-124 et inhibe la croissance des neurites. Neuropharmacology, 2020. 163 : p. 107657.
- Yin, Z., et al., L’exposition au bisphénol A induit une neurotoxicité associée aux synapses et au cytosquelette dans les cellules Neuro-2A. Toxicology in Vitro, 2020. 67 : p. 104911.
- Chen, L., et al., L’extrait de Ginkgo biloba (EGb) inhibe le stress oxydatif dans les cellules Neuro-2A surexprimant l’APPsw. BioMed Research International, 2019. 2019.