Lignée cellulaire MRC-5 : fibroblastes pulmonaires fœtaux humains utilisés dans la recherche virale

Les cellules MRC-5 constituent une lignée cellulaire diploïde humaine largement utilisée dans la production de vaccins viraux, notamment contre l’hépatite A, la polio et la rage, ainsi qu’à des fins de recherche dans le domaine biomédical. Elles constituent un outil indispensable à l’étude des infections et des maladies virales et trouvent des applications importantes dans le criblage de médicaments et les essais d’efficacité. Cet article complet vous fournira des renseignements essentiels sur la lignée cellulaire diploïde humaine MRC-5 afin de faciliter vos recherches.

Caractéristiques générales et origine des cellules MRC-5

Il est essentiel de comprendre l’origine et les caractéristiques générales d’une lignée cellulaire lorsqu’on évalue son applicabilité à la recherche. Cette section examine en détail les caractéristiques fibroblastiques et l’origine des cellules MRC-5. Vous y apprendrez :

• Origine : Ces cellules primaires ont été mises au point en 1966 par J.P. Jacobs à partir du tissu pulmonaire d’un fœtus de sexe masculin de type caucasien âgé de 14 semaines, et non en 1996 comme indiqué précédemment.
• Morphologie des cellules MRC-5 : Les cellules MRC-5 présentent une morphologie de type fibroblastique.
• Diamètre cellulaire : Le diamètre d’une cellule MRC-5 est d’environ 18 μm.
• Caryotype : Les cellules MRC-5 présentent un caryotype diploïde normal, le nombre modal de chromosomes étant de 46, ce qui est typique d’une lignée cellulaire humaine normale.

Lignes directrices pour la culture de la lignée cellulaire MRC-5

Pour cultiver efficacement la lignée cellulaire MRC-5, il est nécessaire de bien comprendre ses besoins spécifiques. Voici les points essentiels à prendre en compte pour une culture réussie :

• Temps de doublement : La lignée cellulaire MRC-5 a un temps de doublement d’environ 45 heures. Selon les conditions de culture, ce temps peut varier entre 35 et 45 heures.

• Nature adhérente : Les cellules fœtales MRC-5 sont adhérentes; elles doivent donc se fixer à une surface pour se développer, ce qui est caractéristique des fibroblastes.

• Densité cellulaire optimale : Pour l’ensemencement, une densité optimale de 1 x 10⁴ cellules/cm² est recommandée. Le processus de repiquage consiste à laver les cellules adhérentes avec du PBS, à les traiter avec de l’Accutase pendant 8 à 10 minutes pour les détacher, puis à les centrifuger. Le culot cellulaire est ensuite remis en suspension dans un milieu de croissance et transféré dans de nouvelles flacons pour la poursuite de la culture.

• Milieu de croissance : Le milieu de croissance recommandé pour les cellules MRC-5 est l’EMEM, enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin, de 2,2 g/L de NaHCO₃, de 2 mM de L-glutamine et de la solution saline équilibrée d’Earle (EBSS).

• Conditions de culture : Maintenir les cultures dans un incubateur humidifié à 37 °C avec 5 % de CO₂ afin de reproduire les conditions physiologiques.

• Conditions d’entreposage : Pour un entreposage à long terme, les cellules MRC-5 doivent être conservées en phase vapeur d’azote liquide ou à des températures inférieures à -150 °C.

• Congélation et décongélation : Utiliser un milieu de congélation CM-1 ou CM-ACF, en appliquant une méthode de congélation lente afin de préserver la viabilité cellulaire. Pour la décongélation, réchauffer les cellules dans un bain-marie à 37 °C jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de glace, puis les transférer dans un milieu frais et les centrifuger pour éliminer l’agent cryoprotecteur. Remettre les cellules en suspension dans un milieu de croissance frais avant de les ensemencer dans de nouveaux récipients de culture.

• Niveau de biosécurité : La manipulation et l’entretien des cultures MRC-5 nécessitent un laboratoire de niveau de biosécurité 1, garantissant le respect des protocoles de sécurité.

Ces lignes directrices visent à aider les chercheurs à maintenir la lignée cellulaire MRC-5 dans des conditions optimales, afin de faciliter l’obtention de résultats fiables et reproductibles dans le cadre de leurs recherches scientifiques.

Publié : 2023 | Dernière révision : mai 2026

Lignée cellulaire MRC-5 : avantages et limites

À l’instar d’autres lignées cellulaires, les cellules diploïdes humaines MRC-5 présentent de nombreux avantages et inconvénients. Dans cette section, nous passerons en revue certains des plus notables, qui pourraient vous aider à décider de leur utilisation dans le cadre de vos recherches.

Avantages

Les principaux avantages des cellules MRC-5 sont les suivants :

• Lignée cellulaire normale d’origine humaine

  Les cellules fœtales MRC-5 proviennent d’un tissu pulmonaire humain normal, ce qui en fait un outil précieux pour les chercheurs qui étudient des maladies spécifiques à l’humain. En tant que lignée cellulaire diploïde normale, elle reproduit fidèlement la physiologie et les réponses des cellules humaines, offrant ainsi un modèle plus précis pour la recherche biomédicale et pharmaceutique que les lignées cellulaires cancéreuses ou transformées.

• Sensibilité aux virus

  Les fibroblastes MRC-5 présentent une forte sensibilité à plusieurs virus humains, notamment ceux responsables d’infections et de maladies respiratoires telles que la grippe et les coronavirus. Cette caractéristique les rend particulièrement utiles pour l’étude de la pathogenèse virale, le criblage de médicaments antiviraux et le développement de vaccins viraux. La capacité des cellules MRC-5 à permettre une réplication virale efficace permet aux chercheurs de comprendre les mécanismes sous-jacents aux infections virales et d’évaluer l’efficacité de traitements potentiels.

Limites

Durée de vie limitée : Malgré leur utilité, les cellules de la lignée de fibroblastes MRC-5 ont une durée de vie limitée in vitro. Elles subissent généralement environ 42 à 46 doublements de population avant d’entrer dans un état de sénescence réplicative. Cette capacité de réplication limitée pose un défi pour les expériences à long terme nécessitant une culture cellulaire continue. Les chercheurs doivent soigneusement tenir compte de la durée de leurs expériences et planifier celles-ci en conséquence afin d’éviter les problèmes liés aux altérations du comportement cellulaire induites par la sénescence. De plus, la durée de vie limitée des cellules MRC-5 nécessite un renouvellement périodique par des cellules fraîchement cultivées, ce qui peut affecter la cohérence et la reproductibilité des expériences.

Applications des cellules MRC-5 en recherche

Progrès de la recherche antivirale et du développement de vaccins à l’aide des cellules MRC-5

Les cellules MRC-5, issues du tissu pulmonaire d’un fœtus avorté âgé de 14 semaines, sont devenues une pierre angulaire dans le domaine de la recherche antivirale et du développement de vaccins. Ces souches cellulaires diploïdes font partie intégrante de la production du vaccin contre le virus de la rubéole et du vaccin Sabin contre le poliovirus. Le fait qu’elles proviennent de tissu humain fait des cellules MRC-5 un modèle exceptionnel pour l’étude des comportements viraux, tels que la réplication du poliovirus, les mécanismes d’amplification du SARS-CoV et la multiplication du virus de l’herpès simplex en laboratoire.

La sensibilité de ces cellules à divers virus a permis de rationaliser le processus de développement des vaccins, en fournissant un substrat cellulaire fiable pour la réplication virale, notamment celle des virus responsables de la rougeole et de la rubéole. La nature non cancéreuse des cellules MRC-5 est essentielle pour garantir la sécurité des vaccins, car elle permet d’observer une réponse représentative de ce qui se produirait dans des cellules humaines.

Des avancées significatives dans la compréhension des infections virales et l’amélioration des vaccins ont été rendues possibles grâce à la recherche utilisant les cellules MRC-5. Une étude de 2021, par exemple, a montré que l’échelle de production du virus de la rage pouvait être augmentée en inhibant certaines protéines cellulaires à l’aide d’inhibiteurs d’interféron, ce qui a permis d’obtenir des rendements viraux plus élevés [3]. De plus, une étude de 2019 examinant la réponse des cellules MRC-5 à l’infection par le virus de la rage a mis en évidence le potentiel des exosomes, du miR-423-5p et de la voie de signalisation de l’interféron (de type I) en tant que cibles pour améliorer la production du vaccin antirabique [4].

Les cellules MRC-5 dans la thérapie cellulaire et la recherche sur les maladies

Les cellules MRC-5 jouent également un rôle central dans le domaine de la thérapie cellulaire. Leur comparaison avec les cellules stromales mésenchymateuses du cordon ombilical, notamment en termes de potentiel de différenciation, a suscité un intérêt considérable pour leur utilisation dans des applications thérapeutiques. Des prises de position sur la thérapie cellulaire ont reconnu le potentiel thérapeutique de ces cellules dans le traitement de diverses affections. Par exemple, elles se révèlent prometteuses pour moduler les réponses du système immunitaire dans des maladies comme la sclérose en plaques et pour renforcer l’activité des activateurs de mégacaryocytes, ce qui est important pour la production de plaquettes.

Outre leurs applications thérapeutiques, les cellules MRC-5 ont enrichi le domaine de la recherche sur les maladies, notamment en ce qui concerne la compréhension des traitements antiviraux et des produits antiprotozoaires. En tant que lignée cellulaire réfractaire, les cellules MRC-5 ont une durée de vie limitée, mais leurs contributions à la recherche médicale sont considérables. Elles jouent un rôle déterminant dans la découverte d’agents antiviraux et sont utilisées dans les tests de colonies de mégacaryocytes pour faire progresser notre compréhension de la formation des plaquettes sanguines. L’héritage durable des cellules MRC-5 continue de façonner le paysage de la science médicale, améliorant ainsi nos capacités à traiter des maladies et des affections complexes.

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Publications sur la lignée cellulaire MRC-5

La lignée cellulaire MRC-5, un pilier de la recherche médicale, a fait l’objet de diverses études importantes. Voici quelques publications notables qui ont utilisé cette lignée cellulaire dans le cadre de leurs recherches :

• Détection du circovirus porcin dans les cellules diploïdes humaines 2BS et MRC-5 en vue de la production
  de vaccins Publiée dans le Chinese Journal of Biologicals en 2019, cette étude a examiné la présence des circovirus porcins de types I et II dans les lignées cellulaires diploïdes humaines 2BS et MRC-5, soulignant ses implications pour le développement de vaccins.

• L’inhibition de circ-UQCRC2 a atténué les lésions induites par les lipopolysaccharides dans les cellules MRC-5 par la voie
  miR-326/PDCD4/NF-κB. Dans cet article de 2021 publié dans *International Immunopharmacology*, les chercheurs ont examiné comment le ciblage d’un ARN circulaire, plus précisément le circ-UQCRC2, pouvait atténuer les dommages cellulaires induits par le lipopolysaccharide dans les cellules MRC-5 par l’intermédiaire de la voie de signalisation miR-326/PDCD4/NF-κB.

• La kurarinone inhibe l’infection par le HCoV-OC43 en perturbant le-flux autophagique induit par le virus dans les cellules
  pulmonaires humaines MRC-5 Cette étude de 2020, publiée dans le Journal of Clinical Medicine, a examiné l’efficacité thérapeutique de la kurarinone contre le coronavirus humain HCoV-OC43 dans les cellules MRC-5, soulignant le potentiel de ce composé à moduler les.

• L’auraptène possède une activité antivirale contre le coronavirus humain OC43 dans les cellules
  MRC-5 Publiée dans la revue *Nutrients* en 2023, cette recherche a démontré que l’auraptène présente des capacités antivirales contre le coronavirus HCoV-OC43 lorsqu’il est testé sur des cellules diploïdes humaines MRC-5, ouvrant ainsi une nouvelle voie pour les stratégies antivirales.

• Les effets des extraits riches en resvératrol issus des résidus de taille de Vitis vinifera sur les cellules HeLa, MCF-7 et MRC-5 : interaction
  entre l’apoptose, l’autophagie et la nécrose Cette étude, publiée dans la revue *Pharmaceutics* en 2022, a examiné l’impact d’extraits riches en resvératrol issus de *Vitis vinifera* sur trois lignées cellulaires humaines, dont la lignée MRC-5, apportant ainsi des éclairages sur les applications thérapeutiques potentielles de ces extraits dans le traitement du cancer et d’autres maladies.

Ces publications soulignent la polyvalence de la lignée cellulaire MRC-5, qui facilite des recherches variées et novatrices en virologie, en oncologie et au-delà, contribuant ainsi de manière significative à notre compréhension des réponses cellulaires et des potentiels thérapeutiques.

Foire aux questions sur les cellules MRC-5

Références

1. Yang, X., et al., L’inhibition de l’interféron améliore la production à l’échelle pilote du virus de la rage dans des cellules MRC-5 diploïdes humaines. Viruses, 2021. 14(1) : p. 49.
2. Wang, J., et al., L’administration de miR-423-5p inductible par exosomes renforce la résistance des cellules MRC-5 à l’infection par le virus de la rage. International Journal of Molecular Sciences, 2019. 20(7) : p. 1537.
3. McKenna, K.C., L’utilisation de tissus fœtaux issus d’avortements dans les vaccins et la recherche médicale occulte la valeur de toute vie humaine. Linacre Q, 2018. 85(1) : p. 13-17.
4. Jordan, I. et V. Sandig, « Matrix and backstage : substrats cellulaires pour les vaccins viraux ». *Viruses*, 2014. 6(4) : p. 1672-700.