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Afficher toutes les catégories Lignée cellulaire NIH-3T3 – Faire progresser la recherche sur les fibroblastes et les applications de la lignée NIH-3T3 Retour

Cellules NIH-3T3 : faire progresser la recherche sur les fibroblastes et les applications des cellules NIH-3T3

La lignée cellulaire NIH-3T3, établie à partir du tissu d’un embryon de souris albinos suisse âgé de 17 jours en 1962 par Howard Green et George Todaro à la Faculté de médecine de l’Université de New York, est devenue une ressource fondamentale dans la recherche biomédicale. Reconnues pour leur grande réceptivité à la formation de foyers par le virus de la leucémie et le virus du sarcome, les cellules NIH-3T3 constituent un outil essentiel pour une multitude de recherches scientifiques, notamment les études en oncologie virale, l’analyse de l’expression génique et l’exploration de la dynamique de croissance cellulaire. La nomenclature « 3T3 » fait référence à la méthode de culture cellulaire, indiquant un intervalle de « transfert tous les 3 jours » avec une densité d’ensemencement initiale de 3 × 10^5 cellules, soulignant ainsi les conditions normalisées dans lesquelles ces cellules ont été cultivées et multipliées pour la première fois.

📋 Lignée cellulaire NIH-3T3 — Faits en bref
Milieu de croissance
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Temps de doublement
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Type de croissance
Adhérent
Niveau de biosécurité
BSL-1

Morphologies et applications variées des cellules NIH-3T3

L’une des caractéristiques distinctives des cellules NIH-3T3 est leur adaptabilité morphologique, qui varie considérablement en fonction de la densité de culture. À de faibles densités, ces fibroblastes présentent une structure cellulaire solitaire en forme de fuseau, qui évolue vers des motifs denses et tourbillonnants à mesure que la population atteint la confluence. Avec un diamètre moyen d’environ 18 μm, les cellules NIH-3T3 constituent un modèle polyvalent pour des études approfondies en biologie cellulaire, allant des mécanismes de réparation tissulaire aux voies complexes de la régulation du cycle cellulaire.

NIH 3T3 cells at high and low confluence

Cellules NIH-3T3 à confluence élevée et faible.

Renseignements sur la culture

  • Détails clés sur la culture :

    • Temps de doublement de la population : environ 20 heures.

    • Type de croissance : Cultures adhérentes.

    • Densité d'ensemencement : Recommandée : 3 à 4 × 10⁴ cellules/cm².

    • Milieu de culture : DMEM ou Ham’s F12, enrichi de 5 % de sérum fœtal bovin (FBS) et de 2,5 mM de L-glutamine.

    • Conditions de croissance : Maintenir à 37 °C dans un incubateur humidifié contenant 5 % de CO₂.

    • Conservation : Conserver à des températures inférieures à -195 °C dans la phase vapeur d’azote liquide.

    • Méthode de congélation : Utiliser le milieu CM-1 ou CM-ACF; recourir à une méthode de congélation lente (baisse de température de 1 °C).

    • Protocole de décongélation : réchauffement rapide dans un bain-marie à 37 °C, suivi d’une centrifugation pour éliminer le milieu de congélation, puis d’une remise en suspension dans le milieu de culture.

    • Niveau de biosécurité : La culture nécessite un environnement de niveau de biosécurité 1.

Swiss Albino mouse in modern laboratory next to ampoules with medicine

Souris albinos suisse dans un laboratoire.

Avantages et inconvénients de l'utilisation des cellules NIH 3T3

Avantages

  • Efficacité de la transfection : Reconnues pour leurs taux de transfection élevés, les cellules NIH-3T3 sont idéales pour les études d’expression génique tant transitoire que stable, et se prêtent à diverses techniques de transfection.

  • Utilité comme couche nourricière : Ces cellules servent souvent de couche nourricière de soutien pour les cocultures avec des cellules telles que les kératinocytes et les cellules souches, grâce à la libération de facteurs de croissance qui favorisent la croissance des cellules en coculture.

  • Recherche sur les cellules souches : Les cellules NIH-3T3 constituent un choix privilégié dans la recherche sur les cellules souches pour induire la pluripotence sans modification génétique et offrir un environnement propice à la différenciation des cellules souches.

  • Stabilité de la culture : Les cellules NIH-3T3 sont reconnues pour leur stabilité et leur faible fréquence de transformation spontanée. Cependant, dans certaines conditions ou après exposition à des oncogènes ou à des mutagènes spécifiques, les cellules NIH-3T3 peuvent subir une transformation spontanée. Cette transformation peut entraîner l’acquisition de propriétés cancéreuses telles qu’une croissance incontrôlée, la perte de l’inhibition par contact et la capacité de former des tumeurs lorsqu’elles sont injectées à des hôtes sensibles. 

Inconvénients

  • Taille cellulaire variable : La morphologie allongée, en forme de fuseau, des cellules NIH-3T3 peut varier, ce qui complique les analyses d’images dans les essais.

  • Sensibilité aux infections : Ces cellules sont sujettes aux infections bactériennes et à celles causées par des mycoplasmes si elles ne sont pas conservées dans des conditions d’asepsie rigoureuses, ce qui peut compromettre l’intégrité des expériences.

Applications de recherche des cellules NIH-3T3

  • Études de transfection d’ADN : La robustesse des cellules NIH-3T3 les rend idéales pour l’introduction et l’étude de la fonction de divers gènes, comme l’ont démontré des recherches portant sur des protéines telles que NAB2-STAT6 et leur rôle dans les processus cellulaires.

  • Essais cellulaires : Leur fiabilité s’étend à divers essais, notamment ceux portant sur la viabilité, l’apoptose et la formation de foyers, offrant ainsi un aperçu des réponses cellulaires dans différentes conditions expérimentales.

  • Recherche sur le cycle cellulaire : La manipulation aisée du cycle cellulaire de cette lignée cellulaire par le biais des concentrations sériques en fait un modèle puissant pour l’étude de la régulation du cycle cellulaire et de ses anomalies dans le contexte de maladies.

Faites progresser vos recherches grâce aux cellules NIH-3T3

545,10 CAD$*

Contenu : 1.5 milliliter

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

cryovial
Numéro de produit : 400101

Présentation des principales études portant sur la lignée cellulaire de fibroblastes NIH 3T3 

La lignée cellulaire NIH-3T3 a joué un rôle central dans de nombreux projets de recherche couvrant divers aspects de la biologie cellulaire. Voici quelques études importantes utilisant ces cellules :

Ressources essentielles pour la recherche sur les cellules NIH-3T3

Pour les chercheurs souhaitant travailler avec des cellules NIH-3T3, diverses ressources sont disponibles pour les guider dans les protocoles de culture et d’expérimentation :

  • Formation de sphéroïdes à partir de cellules NIH-3T3 : Cette vidéo offre un guide détaillé sur la formation de sphéroïdes, une technique de culture cellulaire en 3D qui agrège les cellules NIH-3T3 en grappes, offrant ainsi un modèle plus pertinent sur le plan physiologique pour les études.
  • Suivi de la croissance des cellules NIH-3T3 : Grâce au système d’imagerie de cellules vivantes JuLI Br, cette vidéo capture la dynamique de croissance des cellules NIH-3T3 sur une période de 65 heures, illustrant ainsi la prolifération cellulaire en temps réel.

Ces ressources visent à soutenir vos travaux de recherche sur les cellules NIH-3T3, en vous fournissant les bases nécessaires à la réussite de vos expériences et de vos découvertes.

Les cellules 3T3 de souris constituent une lignée cellulaire de fibroblastes dérivée de tissus embryonnaires de souris, plus précisément d’embryons de souris de la souche NIH Swiss. Elles sont largement utilisées dans la recherche biologique pour l’étude de comportements cellulaires tels que la division, la migration et la transformation.
Les cellules NIH3T3 sont largement utilisées dans la recherche biologique et médicale à des fins diverses, notamment l’étude du comportement cellulaire (comme la croissance, la division et la différenciation), la compréhension de la biologie du cancer et des mécanismes de transformation cellulaire, les études sur l’expression et la régulation des gènes, ainsi que la découverte et le développement de médicaments. Leur facilité de culture et de transfection en fait également des cellules idéales pour étudier les effets de la surexpression ou de l’inhibition génique.
Le « 3T3 » dans NIH3T3 signifie « transfert tous les trois jours, inoculum de 3 × 10^5 cellules ». Cette nomenclature fait référence au protocole de culture original mis au point pour ces cellules, qui consistait à transférer les cellules tous les trois jours à une densité d’inoculum déterminée afin de maintenir des conditions de croissance optimales et d’éviter l’inhibition par contact.
Les cellules 3T3, y compris les NIH3T3, ne sont pas intrinsèquement cancéreuses. Il s’agit de fibroblastes immortalisés issus d’embryons de souris. Elles peuvent toutefois subir une transformation vers un état cancéreux lorsqu’elles sont exposées à certains oncogènes ou dans des conditions expérimentales spécifiques, ce qui les rend utiles pour l’étude de la biologie du cancer et de la tumorigenèse.
Grâce à des techniques telles que la transfection des cellules NIH 3T3, les chercheurs peuvent manipuler cette lignée cellulaire afin d’étudier des voies moléculaires spécifiques impliquées dans la croissance et la différenciation cellulaires, ainsi que dans des processus pathologiques, comme le cancer.
Les cellules NIH 3T3 servent de modèle pour l'étude de divers sous-types de fibroblastes, notamment les myofibroblastes, en offrant un système permettant d'observer les caractéristiques de la différenciation cellulaire et le rôle de la composition cellulaire dans la réparation tissulaire et la fibrose.
Oui, les cellules NIH 3T3 sont immortalisées. Elles proviennent de fibroblastes embryonnaires de souris et ont acquis la capacité de proliférer indéfiniment in vitro, ce qui en fait un outil précieux pour les études biologiques à long terme.
Le taux de croissance des cellules NIH3T3 peut varier en fonction des conditions de culture, mais dans des conditions optimales, leur temps de doublement est généralement compris entre 18 et 24 heures. Cela signifie que la population de cellules NIH3T3 peut doubler en environ une journée, ce qui les rend particulièrement adaptées aux expériences nécessitant une prolifération cellulaire rapide.
La lignée cellulaire NIH3T3 a été mise au point au début des années 1960 à partir de fibroblastes embryonnaires de souris. Plus précisément, ces cellules provenaient de tissus d’embryons de souris NIH Swiss âgés de 17 à 19 jours. Cette lignée cellulaire a été développée afin de fournir un modèle cellulaire homogène et reproductible pour la recherche scientifique.
Bien que les cellules 3T3 et 3T3-L1 proviennent toutes deux de fibroblastes embryonnaires de souris, leur principale différence réside dans leur spécialisation et leur application. Les cellules NIH3T3 sont largement utilisées dans la recherche en biologie cellulaire et en oncologie. En revanche, les cellules 3T3-L1 constituent une sous-lignée des cellules 3T3 qui a été spécifiquement sélectionnée pour sa capacité à se différencier en adipocytes (cellules adipeuses) dans des conditions appropriées. Cela rend les cellules 3T3-L1 particulièrement précieuses pour les études liées à l’adipogenèse, au métabolisme et à l’obésité.

Références

  1. Rahimi, A.M., M. Cai et S. Hoyer-Fender, « Hétérogénéité de la lignée cellulaire de fibroblastes NIH3T3 ». Cells, 2022. 11(17) : p. 2677.
  2. Leibiger, C., et al., Première caractérisation cytogénétique moléculaire à haute résolution de la lignée cellulaire NIH 3T3 par bandage multicolore murin. Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4) : p. 306-312.
  3. Wang, H.-X., et al., Analyse comparative de différentes couches de cellules nourricières avec des fibroblastes 3T3 pour la culture de cellules souches limbiques de lapin. International Journal of Ophthalmology, 2017. 10(7) : p. 1021.
  4. Wang, Z., et al., Différenciation de cellules neuronales à partir de fibroblastes NIH/3T3 dans des conditions définies. Development, growth & differentiation, 2011. 53(3) : p. 357-365.
  5. Park, Y.-S., et al., La protéine de fusion NAB2-STAT6 intervient dans la prolifération cellulaire et la progression oncogénique par la régulation de l’EGR-1. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020. 526(2) : p. 287-292.
  6. Mattsson, M., Expression de la Sloppymerase™ dans les cellules NIH/3T3 : exploration de la polyvalence d’une polymérase de fusion sujette à des erreurs. 2021.
  7. Sahinturk, V., et al., L’acrylamide exerce sa cytotoxicité dans les fibroblastes NIH/3T3 par apoptose. Toxicology and Industrial Health, 2018. 34(7) : p. 481-489.
  8. Lusi, E.A. et F. Caicci, Découverte du premier rétrovirus géant humain : description de sa morphologie, de sa kinase rétrovirale et de sa capacité à induire des tumeurs chez la souris. bioRxiv, 2019 : p. 851063.
  9. Endo, M., et al., La voie de signalisation E2F1-Ror2 assure une régulation transcriptionnelle coordonnée pour favoriser la transition de la phase G1 à la phase S dans les fibroblastes NIH/3T3 stimulés par le bFGF. The FASEB Journal, 2020. 34(2) : p. 3413-3428.
  10. Long, L., et al., La carence en riboflavine favorise la tumorigenèse dans les cellules HEK293T et NIH3T3 en maintenant la prolifération cellulaire et en régulant la transcription des gènes liés au cycle cellulaire. The Journal of Nutrition, 2018. 148(6) : p. 834-843.

 

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