Cellules NCI-H1299 : recherche et implications cliniques des cellules de cancer du poumon NCI-H1299
La lignée cellulaire NCI-H1299 est une lignée cellulaire immortalisée de cancer du poumon non à petites cellules d’origine humaine, largement utilisée dans la recherche en immuno-oncologie, en cancérologie et en découverte de médicaments. De plus, les chercheurs ont utilisé ces cellules pour étudier la sensibilité aux médicaments, les voies de signalisation sous-jacentes et les mécanismes moléculaires liés au cancer du poumon. Par ailleurs, ces cellules servent à étudier les infections virales telles que celle causée par le SARS-CoV-2.
- Milieu de culture
- Le RPM1 1640 est un milieu de culture idéal pour la lignée cellulaire NCI-H1299. Il est enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin, de 4 500 mg/L de glucose, de 2,0 mM de L-glutamine, de 1 mM de pyruvate de sodium, de 1 500 mg/L de NaHCO₃ et de 10 mM d’HEPES. Le milieu doit être renouvelé deux à trois fois par semaine.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement des cellules NCI-H1299 varie entre 22 et 30 heures.
- Type de croissance
- La lignée cellulaire NCI-H1299 est une lignée cellulaire adhérente.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander la lignée NCI-H1299
- Caractéristiques générales et origine des cellules NCI-H1299
- Informations sur la culture
- Acheter la lignée cellulaire NCI-H1299 : des outils de recherche de haute qualité pour l’étude de la biologie du cancer du poumon
- Avantages et inconvénients des cellules NCI-H1299
- Applications de recherche des cellules NCI-H1299
- Publications de recherche mettant en vedette les cellules NCI-H1299
- Ressources pour la lignée cellulaire NCI-H1299 : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions sur la lignée cellulaire NCI-H1299
- Références
- Foire aux questions
Caractéristiques générales et origine des cellules NCI-H1299
La première chose à savoir au sujet d’une lignée cellulaire est son origine et ses caractéristiques générales, car celles-ci vous aident à déterminer son utilisation dans vos recherches. Cette section de l’article vous aidera à découvrir des renseignements importants sur l’origine et les caractéristiques de la lignée NCI-H1299. Par exemple, que sont les cellules de cancer du poumon NCI-H1299? De quel type de cellule s’agit-il? Quelle est la taille des cellules NCI-H1299? Quelle est la différence entre les lignées A549 et NCI-H1299?
- La lignée cellulaire NCI-H1299 provient d’une métastase ganglionnaire du poumon d’un patient de sexe masculin, de type caucasien, âgé de 43 ans et atteint d’un cancer.
- Ces cellules présentent une délétion partielle homozygote du gène p53; elles n’expriment donc pas la protéine p53. L’absence d’expression de la protéine p53 par les cellules NCI-H1299 contribue à la tendance proliférative des cellules cancéreuses pulmonaires H1299.
- Outre le gène p53, ces cellules immortalisées présenteraient une mutation du gène KRAS, responsable de leurs propriétés de croissance, de prolifération, de migration et d’invasion.
- Le caryotype des cellules NCI-H1299 est quasi-diploïde.
- Les cellules NCI-H1299 présentent une morphologie de type cellulaire épithéliale.
- Ces cellules sont aplaties et ont une épaisseur inférieure à 5 µm.
NCI-H1299 et A549
Les lignées cellulaires NCI-H1299 et A549 sont des lignées de cellules de cancer du poumon non à petites cellules. Les cellules NCI-H1299 sont plus agressives et plus sensibles que les cellules A549. Les deux présentent des mutations relativement similaires, telles que KRAS. Cependant, contrairement aux cellules NCI-H1299, les cellules A549 expriment le gène P53.
Informations sur la culture
Il n’est pas facile d’entretenir une culture de lignée cellulaire tant que l’on ne connaît pas toutes les informations clés la concernant, notamment : Quel est le temps de doublement de la lignée NCI-H1299? Quelle est la densité d’ensemencement de la lignée NCI-H1299? Quel est le milieu de culture des cellules NCI-H1299? Comment cultiver les lignées cellulaires NCI-H1299? Cette section vous aidera à trouver les réponses à toutes ces questions concernant la culture des cellules NCI-H1299.
Points clés pour la culture des cellules NCI-H1299
Temps de doublement :
Le temps de doublement de la lignée NCI-H1299 varie entre 22 et 30 heures.
Adhérentes ou en suspension :
La lignée cellulaire NCI-H1299 est une lignée cellulaire adhérente.
Rapport de repiquage :
Les cellules NCI-H1299 sont repiquées selon un rapport recommandé de 1:3 à 1:6. Pour l’ensemencement, les cellules adhérentes sont lavées avec du PBS 1x et incubées avec la solution de repiquage Accutase pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. On ajoute du milieu de culture frais aux cellules détachées, puis on les centrifuge. Le culot cellulaire est ensuite remis en suspension, et les cellules sont transférées dans de nouveaux flacons contenant du milieu de croissance.
Milieu de croissance :
Le RPM1 1640 est un milieu idéal pour les cellules NCI-H1299. Il est enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin, de 4 500 mg/L de glucose, de 2,0 mM de L-glutamine, de 1 mM de pyruvate de sodium, de 1 500 mg/L de NaHCO₃ et de 10 mM d’HEPES. Le milieu doit être renouvelé deux à trois fois par semaine.
Conditions de culture :
Les cultures de cellules de cancer du poumon NCI-H1299 sont maintenues dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport de 5 % de CO₂.
Conservation :
La lignée cellulaire NCI-H1299 peut être conservée à long terme dans la phase vapeur d’azote liquide ou dans des congélateurs à très basse température à une température inférieure à -150 °C.
Procédure de congélation et milieu :
Le CM-1 ou le CM-ACF sont des milieux de congélation pour les cellules NCI-H1299. Les cellules sont congelées selon un procédé de congélation lente qui ne permet qu’une baisse de température de 1 degré par minute afin de préserver la viabilité cellulaire.
Procédure de décongélation :
Les cellules NCI-H1299 congelées sont agitées rapidement dans un bain-marie préchauffé à 37 degrés Celsius pendant 40 à 60 secondes, jusqu’à ce qu’il ne reste plus qu’un petit morceau de glace. On ajoute du milieu frais aux cellules décongelées, qui peuvent ensuite être cultivées directement dans de nouveaux flacons ou centrifugées. Dans le premier cas, le milieu doit être remplacé après 24 heures d’incubation. La centrifugation permet d’éliminer les résidus du milieu de congélation. Par la suite, les cellules récoltées sont remises en suspension dans du milieu frais et transférées dans un nouveau flacon pour la culture.
Niveau de biosécurité :
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est requis pour manipuler la culture cellulaire NCI-H1299.
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Avantages et inconvénients des cellules NCI-H1299
À l’instar d’autres lignées cellulaires cancéreuses humaines, la lignée NCI-H1299 présente également certaines caractéristiques distinctives associées à des avantages et des inconvénients spécifiques. Nous en avons résumé ici quelques-unes parmi les plus importantes.
Avantages
Les principaux avantages de la lignée cellulaire NCI-H1299 de cancer du poumon à cellules non petites sont les suivants :
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Modèle in vitro du cancer du poumon
Les lignées cellulaires NCI-H1299 ont été développées à partir de métastases ganglionnaires d’un carcinome pulmonaire et possèdent donc des propriétés relativement similaires. Par conséquent, ces cellules peuvent servir de modèle in vitro pour étudier la biologie du cancer du poumon, ses mécanismes cellulaires et moléculaires, ainsi que pour cribler et tester des traitements potentiels.
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Facilité de culture
Les cellules NCI-H1299 sont faciles à cultiver et à entretenir dans un laboratoire de recherche. Elles ne nécessitent pas de conditions ni de procédures de culture cellulaire particulièrement exigeantes.
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Mutations P53 et KRAS des cellules NCI-H1299
Les cellules NCI-H1299 ne présentent pas d’expression du gène p53, ce qui leur permet de proliférer vigoureusement. De plus, elles possèdent une mutation du gène KRAS qui contribue à la croissance, à la prolifération, à l’invasion et à la migration cellulaires. Compte tenu de ces caractéristiques, les chercheurs utilisent les cellules H1299 pour étudier les mécanismes moléculaires liés aux mutations des gènes KRAS et p53.
Inconvénients
Les inconvénients des cellules NCI-H1299 sont les suivants :
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Spécificité tissulaire
Les cellules NCI-H1299 proviennent d’un tissu pulmonaire. Par conséquent, leur applicabilité se limite principalement à la recherche sur le carcinome pulmonaire. Elles pourraient ne pas refléter pleinement l’hétérogénéité et les caractéristiques générales d’autres types de cancer.
Applications de recherche des cellules NCI-H1299
La lignée cellulaire NCI-H1299 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer du poumon. Voici quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire.
- Biologie du cancer : Les cellules NCI-H1299 constituent un excellent outil de recherche pour étudier le développement et la progression du cancer, ainsi que les mécanismes cellulaires et moléculaires associés. Ces cellules présentent certaines mutations, ce qui permet aux chercheurs d’explorer les comportements des cellules cancéreuses, les voies de signalisation et les profils d’expression génique associés. Plusieurs études ont utilisé la lignée cellulaire NCI-H1299 de carcinome pulmonaire à grandes cellules pour étudier la biologie du cancer du poumon. Par exemple, une étude menée en 2018 a examiné la voie de signalisation impliquée dans l’apoptose des cellules cancéreuses du poumon à l’aide de cellules NCI-H1299. Les chercheurs ont découvert que la voie PI3K/AKT contribue à la prolifération cellulaire et que son inhibition peut entraîner la mort des cellules cancéreuses [1]. De même, une autre étude a examiné les mécanismes impliqués dans la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM) de la lignée NCI-H1299. Cette étude a suggéré qu’une protéine extracellulaire, la SPARC (protéine sécrétée acide et riche en cystéine), contribue à l’EMT et à la migration des cellules NCI-H1299, favorisant ainsi la tumorigenèse; la protéine SPARC agit en tant que médiateur de la signalisation du TGF-β1 [2].
- Découverte et criblage de médicaments : la lignée cellulaire NCI-H1299, issue d’un cancer du poumon humain, est largement utilisée pour évaluer la toxicité et l’efficacité de médicaments potentiels. De plus, elle sert aux chercheurs à étudier le mécanisme d’action des médicaments antitumoraux. Des études ont également utilisé ces cellules pour identifier des cibles médicamenteuses possibles et des mécanismes de résistance. Par exemple, des recherches menées par Xiao-Yun Shen et ses collègues ont porté sur le potentiel anticancéreux du composé naturel brucéine D (BD). Les résultats ont révélé que la BD entrave de manière significative la prolifération, l’invasion et la migration des cellules NCI-H1299. Par conséquent, elle pourrait être considérée comme un traitement adjuvant potentiel pour le carcinome du poumon à cellules non petites [3]. De même, une étude a évalué les effets cytotoxiques du xanthohumol, seul et en association avec le cisplatine, un agent chimiothérapeutique, sur les cellules cancéreuses pulmonaires NCI-H1299 [4].
Publications de recherche portant sur les cellules NCI-H1299
Vous trouverez ici certaines des publications de recherche les plus importantes et les plus citées concernant la lignée cellulaire de carcinome pulmonaire NCI-H1299.
Cet article a été publié dans la revue *Human and Experimental Toxicology* (2021). L’étude suggère que l’indole-3-carbinol induit l’apoptose dans les cellules H1299 en augmentant les niveaux d’espèces réactives de l’oxygène (ERO).
Cette recherche a été publiée en 2018 dans la revue *Cellular Physiology and Biochemistry*. Les résultats de la recherche ont révélé que l’association de l’acide caféique et du paclitaxel exerce un effet anticancéreux synergique sur la lignée cellulaire de cancer du poumon non à petites cellules NCI-H1299.
Cet article de recherche a été publié dans la revue *Molecular Medicine Reports* (2018). L’étude a évalué l’effet antitumoral du tubeimoside-1, une saponine triterpénoïde, ainsi que les mécanismes sous-jacents dans la lignée cellulaire NCI-H1299.
Cet article, publié dans le Journal of Cancer (2020), suggère que la pristimérine, un composé naturel, inhibe la prolifération et la migration des cellules NCI-H1299.
Mécanisme de régulation des cellules d’adénocarcinome pulmonaire humain H1299 par le gène VIPR1
Cette étude, parue dans Medical Oncology (2019), a exploré les effets potentiels de la surexpression du gène VIPR1 sur la lignée cellulaire d’adénocarcinome NCI-H1299.
Ressources sur la lignée cellulaire NCI-H1299 : protocoles, vidéos et plus encore
Voici quelques ressources en ligne consacrées aux cellules NCI-H1299.
- Transfection de la lignée NCI-H1299 : cette vidéo explique le protocole de transfection transitoire pour les lignées cellulaires NCI-H1299.
- Repiquage d’une lignée cellulaire adhérente : cette vidéo vous aidera à apprendre la procédure générale de repiquage d’une lignée cellulaire adhérente.
Le lien suivant contient des renseignements sur la culture cellulaire des cellules NCI-H1299.
- Lignée cellulaire NCI-H1299 : Ce lien vous permettra de vous renseigner sur le protocole de repiquage et de transfection des cellules NCI-H1299.
La lignée cellulaire NCI-H1299 provient d’une métastase ganglionnaire d’un carcinome du poumon.
Les cellules NCI-H1299 sont fréquemment utilisées comme système modèle pour l'étude de la biologie du cancer du poumon, notamment dans le cadre de l'analyse du transcriptome et des mécanismes moléculaires.
Les cellules NCI-H1299 ne présentent pas d'expression du gène p53, ce qui entraîne leur prolifération vigoureuse. Cette mutation fait souvent l'objet d'études portant sur les gènes suppresseurs de tumeurs et les effets anticancéreux.
Oui, les chercheurs utilisent des cellules NCI-H1299 pour évaluer les effets inhibiteurs et l'activité antitumorale de divers composés et agents thérapeutiques potentiels.
Oui, les cellules NCI-H1299 font généralement partie des panels de cellules de cancer du poumon utilisés pour étudier la progression du cancer, les réponses aux traitements et l’identification de cibles potentielles.
Les cellules NCI-H1299 sont souvent comparées à des cellules pulmonaires normales afin d’étudier les différences au niveau de l’expression génique, des voies de signalisation et des réponses aux traitements dans le contexte du cancer du poumon.
Les chercheurs utilisent des cellules NCI-H1299 pour étudier les effets de la radiothérapie sur les cellules tumorales, notamment en évaluant la viabilité cellulaire, les dommages causés à l’ADN et les mécanismes potentiels de résistance.
Oui, des études ont examiné les effets du protopanaxadiol sur les cellules NCI-H1299, notamment ses propriétés anticancéreuses potentielles et ses mécanismes d’action.
Oui, les cellules NCI-H1299 peuvent généralement être récupérées après une cryoconservation ou une culture prolongée dans des conditions appropriées, tout en conservant leurs caractéristiques en vue d'expériences ultérieures.
Les cellules NCI-H1299 constituent un outil précieux pour comprendre la biologie du cancer, identifier de nouvelles cibles thérapeutiques et évaluer des agents anticancéreux potentiels, contribuant ainsi aux progrès de la recherche sur le cancer et à l'élaboration de nouvelles stratégies de traitement.
Références
- Gu, J., et al., Étude de l’apoptose induite par l’EGCG dans les cellules cancéreuses pulmonaires par inhibition de la voie de signalisation PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14) : p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC agit comme médiateur du TGF-β1 dans la promotion de la transition épithélio-mésenchymateuse dans les cellules cancéreuses pulmonaires A549 et H1299. Biofactors, 2018. 44(5) : p. 453-464.
- Shen, X.-Y., et al., Étude sur le mécanisme d’action de la bruceine D dans le traitement des cellules H1299 du cancer du poumon non à petites cellules. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4) : p. 500.
- Long, B., et al., Effets cytotoxiques du xanthohumol et de son association avec le cisplatine sur les cellules H1299 de cancer du poumon métastatique humain. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9) : p. 1-15.