Cellules Hep3B : recherche et découvertes sur le carcinome hépatocellulaire
HEP3B est une lignée cellulaire immortalisée dérivée de carcinome hépatocellulaire humain. Elle est largement utilisée dans la recherche sur l’hépatotoxicité et le métabolisme des médicaments. L’efficacité de transfection de la lignée HEP3B est considérable; c’est pourquoi ces cellules sont couramment utilisées pour étudier le développement et la progression du cancer du foie, ainsi que les interventions thérapeutiques. Cet article présente toutes les informations nécessaires sur la lignée cellulaire HEP3B afin de vous aider à l’utiliser. Il comprend principalement :
- Milieu de croissance
- On utilise un milieu EMEM contenant 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), 2,2 g/L de NaHCO₃, 2 mM de L-glutamine et la solution saline équilibrée d’Earle (EBSS) pour cultiver les cellules HEP3B.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement des cellules HEP3B est d’environ 36 heures.
- Type de croissance
- Cette lignée cellulaire d’hépatome est adhérente.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander HEP3B
- Caractéristiques générales et origine des cellules HEP3B
- Renseignements sur la culture de la lignée cellulaire HEP3B
- Lignée cellulaire HEP3B : avantages et limites
- Applications des cellules HEP3B en recherche
- Publications sur la lignée cellulaire HEP3B
- Ressources sur la lignée cellulaire HEP3B : protocoles, vidéos et plus encore
- Caractéristiques générales et origine des cellules HEP3B
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire HEP3B
- Ligne cellulaire HEP3B : avantages et limites
- Applications des cellules HEP3B dans la recherche
- 5. Publications sur la lignée cellulaire HEP3B
- Ressources sur la lignée cellulaire HEP3B : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Caractéristiques générales et origine des cellules HEP3B
Les principales informations dont vous avez besoin au sujet d’une lignée cellulaire sont son origine et ses caractéristiques générales. Elles peuvent vous aider à déterminer son utilisation dans votre recherche et à la manipuler. Cette section de l’article couvre toutes les informations essentielles concernant l’origine et les caractéristiques de la lignée HEP3B. Vous apprendrez ici : Qu’est-ce que la lignée cellulaire HEP3B? Quelle est l’origine des cellules HEP3B? Quelle est la morphologie des cellules HEP3B?
- HEP3B, une lignée cellulaire continue d’hépatome humain, provient du tissu hépatique d’un garçon africain de 8 ans atteint d’un carcinome hépatocellulaire (CHC). Elle a été établie par Aden et ses collègues en 1979 au laboratoire de Barbara B. Knowles, à l’Institut Wistar, à Philadelphie, aux États-Unis [1].
- Les cellules HEP3B présentent une intégration du génome du virus de l’hépatite B (VHB) dans leur chromosome.
- Ces cellules de carcinome hépatocellulaire présentent une morphologie épithéliale.
- Les cellules HEP3B ont un nombre modal de chromosomes de 60. Contrairement aux cellules HepG2, elles ne présentent pas de réarrangement du chromosome 1.
Quelle est la différence entre les cellules HepG2 et HEP3B?
Les cellules HepG2 et HEP3B diffèrent par le nombre de chromosomes par cellule. Les cellules HEP3B contiennent 60 chromosomes, tandis que les cellules HepG2 en possèdent en moyenne 55. De plus, les cellules HepG2 sont non tumorigènes et négatives pour l’hépatite B, alors que les cellules HEP3B sont tumorigènes et positives pour le VHB.
Informations sur la culture de la lignée cellulaire HEP3B
Connaître les informations relatives à la culture d’une lignée cellulaire peut vous faciliter la tâche. Cette section aborde tous les points clés de la culture de la lignée cellulaire HEP3B HBV, notamment : Quel est le temps de doublement des cellules HEP3B? Quelles sont les conditions de culture des cellules HEP3B? Comment cultiver les cellules HEP3B HCC?
Points clés pour la culture des cellules HEP3B
Temps de doublement :
Le temps de doublement des cellules HEP3B est d’environ 36 heures.
Adhérentes ou en suspension :
Cette lignée cellulaire d’hépatome est adhérente.
Rapport de division :
Les cellules HEP3B sont repiquées à un rapport de 1:2 à 1:4. Les cellules HEP3B adhérentes sont rincées avec du PBS 1x, puis incubées avec la solution de dissociation Accutase. Après 8 à 10 minutes, on ajoute du milieu frais, puis on centrifuge les cellules. Les cellules récoltées sont ensuite soigneusement remises en suspension et transférées dans des flacons contenant du milieu de culture selon le rapport de division recommandé.
Milieu de croissance :
On utilise un milieu EMEM contenant 10 % de FBS, 2,2 g/L de NaHCO₃, 2 mM de L-glutamine et une solution saline équilibrée d’Earle (EBSS) pour cultiver les cellules HEP3B.
Conditions de culture :
Les cellules HEP3B sont cultivées dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport continu de 5 % de CO₂.
Conservation :
Les cellules HEP3B congelées sont conservées à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique ou en phase vapeur d’azote liquide.
Procédure et milieu de congélation :
Le milieu de congélation recommandé pour les cellules HEP3B est le CM-1 ou le CM-ACF. Les cellules sont congelées selon un processus de congélation lente qui ne permet qu’une baisse de température de 1 °C par minute afin de préserver la viabilité cellulaire.
Procédure de décongélation :
Les cellules congelées sont décongelées dans un bain-marie préréglé à 37 °C pendant 40 à 60 secondes. Elles sont ensuite ajoutées au milieu de culture frais et centrifugées pour éliminer les résidus du milieu de congélation. Les cellules recueillies sont remises en suspension et réparties dans de nouveaux flacons pour la culture.
Niveau de biosécurité :
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est requis pour la culture des cellules HEP3B.
Lignée cellulaire HEP3B : avantages et limites
HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire largement utilisée. Cette section mettra l’accent sur certains avantages et limites clés de ces cellules d’hépatome.
Avantages
Les principaux avantages des cellules HEP3B sont les suivants :
Facilité de culture
Les cellules HEP3B ne présentent pas d’exigences particulières en matière de culture cellulaire, ce qui les rend faciles à manipuler et à entretenir dans un laboratoire de recherche. Cela simplifie les procédures expérimentales.
Efficacité de transfection élevée
Les cellules HEP3B présentent une efficacité de transfection remarquable, ce qui explique leur utilisation généralisée dans les études liées à la manipulation génétique et à l’expression génique.
Tumorigénicité
HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire tumorigène capable de former des tumeurs lorsqu’elle est injectée à une souris immunodéprimée. Cela facilite l’étude de la progression et du développement du cancer à l’aide de modèles de xénogreffes HEP3B.
Statut P53 des cellules HEP3B
Les cellules HEP3B présentent une mutation du gène P53 similaire à celle observée dans le carcinome hépatocellulaire (CHC) et d’autres cancers, ce qui les rend pertinentes pour l’étude des effets de la mutation du gène P53 sur la croissance, le développement et la progression du cancer.
Limites
La limite associée à la lignée cellulaire HEP3B est la suivante :
Modèle cellulaire in vitro
La lignée cellulaire HEP3B sert de modèle in vitro des cellules du carcinome hépatocellulaire (CHC). Cependant, elle pourrait ne pas refléter pleinement la complexité du CHC telle qu’on la retrouve chez les organismes vivants. Par conséquent, les résultats expérimentaux in vitro peuvent différer de ceux observés in vivo.
Applications des cellules HEP3B en recherche
La lignée cellulaire HEP3B offre plusieurs applications dans le domaine de la recherche biomédicale. Voici quelques-unes des principales applications des cellules HEP3B :
- Biologie du cancer : HEP3B est une lignée cellulaire de carcinome hépatocellulaire humain. Il s’agit d’un modèle cellulaire inestimable pour étudier les mécanismes cellulaires et moléculaires sous-jacents au développement et à la progression du CHC. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier les mutations génétiques, les processus cellulaires et les voies de signalisation cellulaire associés au cancer du foie. Par exemple, une étude a utilisé des cellules HEP3B et a révélé que le microARN-223-3p régule les composants de l’inflammasome NLRP3, inhibe la prolifération et favorise l’apoptose des cellules d’hépatocarcinome HEP3B [2].
- Criblage et développement de médicaments : La lignée cellulaire HEP3B est également utilisée pour tester, cribler et développer de nouveaux traitements contre le carcinome hépatique. De plus, elle sert à évaluer la toxicité et l’efficacité de différents médicaments et traitements anticancéreux. Les chercheurs ont également utilisé ces cellules d’hépatome pour étudier le métabolisme des médicaments. Ils ont ainsi évalué le potentiel cytotoxique d’un extrait de la plante Cotinus coggygria sur des cellules de carcinome hépatocytaire HEP3B [3].
- Infections virales : HEP3B est une lignée cellulaire positive pour le virus de l’hépatite B; elle est donc utilisée pour étudier les infections virales pouvant mener au développement d’un cancer du foie, à savoir le VHB et le VHC. Cela peut aider à mieux comprendre les infections virales et à mettre au point des traitements antiviraux potentiels. Par exemple, une étude a utilisé des cellules cancéreuses hépatocytaires HEP3B et a examiné l’importance de l’ubiquitination dans la propagation du virus de l’hépatite C. Les résultats ont suggéré que la protéase 15 spécifique de l’ubiquitine (USP15) participe à la propagation du VHC en régulant des fonctions spécifiques aux hépatocytes, notamment la formation de gouttelettes lipidiques et la traduction de l’ARN du VHC [4].
5. Publications sur la lignée cellulaire HEP3B
Cette section de l’article présentera quelques publications de recherche intéressantes sur les cellules HEP3B.
Cette publication parue dans *Biochemical and Biophysical Research Communications* (2019) suggère que le stress du réticulum endoplasmique induit par la lutéoline pourrait exercer des effets antitumoraux sur les cellules HEP3B déficientes en p53, et ce, de manière indépendante de p53.
Ciblage potentiel des cellules cancéreuses hépatiques HEP3B par le lupéol isolé d’Avicennia marina
Cette étude publiée dans *Archiv der Pharmazie* (2021) a proposé le lupéol, un triterpénoïde pentacyclique, comme agent anticancéreux potentiel contre les cellules HEP3B.
Cet article a été publié dans Molecular Medicine Reports (2017). Les résultats de l’étude indiquent que l’extrait éthanolique de Cnidium monnieri (L.) Cusson induit la mort cellulaire (apoptose) et l’arrêt du cycle cellulaire dans les cellules de carcinome hépatocellulaire HepG2 et HEP3B par la régulation de p53 et de la voie de signalisation Akt/GSK-3β.
Cette étude, publiée dans Biomolecules and Therapeutics (2020), a suggéré que l’auranofin présente une activité synergique et favorise l’apoptose induite par le sulforaphane dans les cellules HEP3B par l’activation de la voie de signalisation PI3K/AKT.
Cet article de recherche publié dans BioFactors (2023) suggère que l’ARN circulaire-0072309 exerce des effets antitumoraux sur les cellules de carcinome hépatocellulaire HEP3B en ciblant le miARN-665.
Ressources sur la lignée cellulaire HEP3B : protocoles, vidéos et plus encore
Voici quelques ressources disponibles sur les cellules HEP3B :
- Transfection des cellules HEP3B : cette vidéo explique le protocole de transfection des cellules HEP3B.
- Efficacité de la transfection des cellules HEP3B : Ce lien vous aidera à connaître la composition du milieu DMEM pour les cellules HEP3B, les procédures de repiquage cellulaire et le protocole de transfection pour ces cellules. De plus, il fournit des renseignements permettant d’optimiser l’utilisation du réactif Lipofectamine 3000 dans votre protocole de transfection des cellules HEP3B.
Le lien suivant contient le protocole de culture des cellules HEP3B :
- Conditions de culture des cellules HEP3B : Ce lien vous aidera à connaître le protocole de manipulation et d’entretien des cultures de cellules Huh7 et HEP3B.
- Cellules HEP3B : Ce site Web contient de nombreuses informations sur les cellules HEP3B, notamment sur les milieux de culture HEP3B, ainsi que sur le protocole de division cellulaire, de décongélation et de manipulation des cultures prolifératives et cryoconservées.
Références
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origine et propriétés des lignées cellulaires de carcinome hépatocellulaire. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8) : p. 1040.
- Wan, L., et al., Le miARN-223-3p régule NLRP3 pour favoriser l’apoptose et inhiber la prolifération des cellules HEP3B. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3) : p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. et S. Selen-Isbilir, Effet cytotoxique de l’extrait de Cotinus coggygria sur la lignée cellulaire cancéreuse Hep3B. Natural Product Research, 2022 : p. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., L’USP15 participe à la propagation du virus de l’hépatite C par la régulation de la traduction de l’ARN viral et de la formation de gouttelettes lipidiques. Journal of Virology, 2019. 93(6) : p. 10.1128/jvi.01708-18.