Lignée cellulaire HT22
La lignée cellulaire HT22 est une lignée de cellules neuronales murines couramment utilisée dans la recherche en neurosciences. Elle est précieuse pour l’étude des troubles neurodégénératifs et pour l’évaluation de thérapies ou de traitements neuroprotecteurs potentiels. De plus, les cellules HT22 sont sensibles au glutamate; elles sont donc utilisées pour étudier la toxicité induite par le glutamate ou les lésions neuronales.
- Milieu de croissance
- Le milieu DMEM est utilisé pour la culture des cellules HT22. Il est enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), de 4,5 g/L de glucose, de 4 mM de L-glutamine, de 1,5 g/L de NaHCO₃ et de 1,0 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire optimale.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement des cellules HT22 est d’environ 15 heures.
- Type de croissance
- Les cellules HT22 sont adhérentes.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander des cellules HT22
Cet article met en lumière les caractéristiques essentielles des cellules HT22 qui peuvent vous aider dans vos travaux de recherche. Il abordera principalement :
- des caractéristiques générales et de l’origine des cellules HT22
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire HT22
- Les avantages et les inconvénients de la lignée cellulaire HT22
- Les applications de recherche de la lignée cellulaire HT22
- Publications de recherche portant sur les cellules HT22
- Ressources sur les cellules HT22 : protocoles, vidéos et plus encore
- Caractéristiques générales et origine des cellules HT22
- Informations sur la culture de la lignée cellulaire HT22
- Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire HT22
- 5. Publications de recherche portant sur les cellules HT22
- Ressources sur les cellules HT22 : protocoles, vidéos et plus encore
- Références
- Foire aux questions
Caractéristiques générales et origine des cellules HT22
Cette section de l’article vous éclairera sur l’origine et les caractéristiques générales des cellules HT22. Il est essentiel de connaître ces renseignements sur une lignée cellulaire avant de commencer à travailler avec celle-ci. Vous apprendrez ici : Que sont les cellules HT22? Quelle est la morphologie des cellules de l’hippocampe HT22? Quelle est la taille des cellules HT22?
La lignée HT22 est une lignée cellulaire continue dérivée de la région de l’hippocampe du cerveau de la souris. Il s’agit d’un sous-clone de la lignée cellulaire parentale HT-4, développée par l’immortalisation de tissus neuronaux murins à l’aide de l’antigène T du virus simien 40 (SV40), un polyomavirus thermosensible.
Ces cellules diffèrent des cellules hippocampiques matures, car elles ne possèdent pas de récepteurs du glutamate ni de récepteurs cholinergiques, contrairement aux neurones matures d’origine hippocampique. Elles ne conviennent donc pas aux études de recherche liées à la mémoire [1].
Les cellules HT22 présentent un aspect semblable à celui des cellules épithéliales.
Informations sur la culture de la lignée cellulaire HT22
Les cellules HT22 sont utilisées dans les laboratoires de recherche en neurosciences. Avant de cultiver ces cellules, les chercheurs recherchent des renseignements essentiels sur la culture cellulaire afin de faciliter leur travail et d’en optimiser l’efficacité. Cette section couvre tous les points clés relatifs à la culture des cellules HT22. Vous apprendrez : Quel est le temps de doublement des cellules HT22? Comment cultiver les cellules HT22? Quel est le protocole de culture des cellules HT22? Quel est le milieu de culture des cellules HT22?
Points clés pour la culture des cellules HT22
Temps de doublement :
Le temps de doublement des cellules HT22 est d’environ 15 heures.
Adhérentes ou en suspension :
Les cellules HT22 sont adhérentes.
Rapport de repiquage :
Le rapport de sous-culture pour les cellules de l’hippocampe HT22 est de 1:3 à 1:6. En bref, on retire le milieu de culture, puis on rince les cellules adhérentes avec du PBS 1x. On ajoute la solution de dissociation Accutase dans le flacon, puis on incube les cellules pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. Ensuite, on ajoute du milieu de culture frais, et on recueille les cellules dans un flacon en vue de la centrifugation. Le culot cellulaire obtenu est soigneusement remis en suspension, puis les cellules sont transférées dans un flacon de culture pour la croissance.
Milieu de croissance :
On utilise un milieu DMEM pour la culture des cellules HT22. Il est enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), de 4,5 g/L de glucose, de 4 mM de L-glutamine, de 1,5 g/L de NaHCO₃ et de 1,0 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire optimale.
Conditions de croissance :
Les cultures de cellules HT22 sont conservées dans un incubateur humidifié (à 37 °C) avec un apport de 5 % de CO₂.
Conservation :
Les cellules HT22 congelées peuvent être conservées à une température inférieure à -150 °C, soit dans la phase vapeur d’azote liquide, soit dans un congélateur électrique à très basse température pour une conservation à long terme.
Procédé de congélation et milieu :
Les cellules HT22 peuvent être congelées dans des milieux CM-1 ou CM-ACF à l’aide d’une méthode de congélation lente. Ce procédé ne permet qu’une baisse de 1 °C de la température de l’échantillon par minute, protège les cellules contre le choc thermique et contribue à préserver leur viabilité.
Procédure de décongélation :
Les cellules sont décongelées dans un bain-marie à 37 °C pendant 40 à 60 secondes, jusqu’à ce qu’il ne reste plus qu’un petit amas de glace. Ensuite, on ajoute du milieu de culture aux cellules, puis on les centrifuge pour éliminer les composants du milieu de congélation. Le culot cellulaire est remis en suspension et les cellules sont transférées dans un nouveau flacon contenant du milieu de culture. Les cellules sont ensuite incubées à 37 °C dans un incubateur pendant au moins 24 heures.
Niveau de biosécurité :
Des installations de laboratoire de niveau de biosécurité 1 sont obligatoires pour la culture des cellules HT22.
Avantages et inconvénients de la lignée cellulaire HT22
Les cellules de l’hippocampe HT22 présentent certains avantages et inconvénients qui les distinguent des autres lignées cellulaires neuronales. Voici quelques-uns des principaux avantages et inconvénients de cette lignée cellulaire.
Avantages
Les avantages de la lignée cellulaire neuronale murine HT22 sont les suivants :
-
Taux de croissance rapide
Les cellules HT22 ont un temps de doublement de 15 heures, ce qui permet une expérimentation rapide et efficace et favorise l’obtention de résultats de recherche en temps opportun.
-
Immortalisation
La lignée cellulaire HT22 est immortalisée, ce qui garantit une croissance continue sur de longues périodes. Cela assure une disponibilité constante des cellules, réduit le temps et les coûts, et facilite la réalisation d’expériences à long terme avec des résultats cohérents.
Inconvénients
Les inconvénients des cellules HT22 sont les suivants :
-
Origine murine
La lignée cellulaire HT22 a été dérivée de tissu de l’hippocampe du cerveau de souris, ce qui pourrait ne pas refléter pleinement la complexité de la physiologie et du comportement des neurones humains, limitant ainsi sa pertinence translationnelle.
4. Applications de la lignée cellulaire HT22 en recherche
Les cellules HT22 sont largement utilisées dans la recherche en neurobiologie. Quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire sont abordées dans cette section de l’article :
- Recherche en neurosciences : Les cellules HT22 sont largement utilisées dans la recherche sur les maladies neurodégénératives, notamment la maladie d’Alzheimer et la maladie de Parkinson. Elles sont considérées comme un outil de recherche précieux pour l’étude de la neurotoxicité et des mécanismes de stress oxydatif liés à ces maladies. Une étude menée en 2020 a révélé que la voie PI3K/AKT/CREB est impliquée dans la toxicité neuronale induite par l’hyperglycémie dans les cellules HT22 [2]. De même, une étude récente a suggéré que la voie Nrf2/HO-1 et l’axe de signalisation NF-κB jouent des rôles importants dans la toxicité de la bêta-amyloïde sur les cellules HT22 [3].
- Criblage de médicaments : Les cellules HT22 sont largement utilisées à des fins d’essais et de criblage de médicaments. Elles aident les chercheurs à identifier des agents thérapeutiques potentiels présentant des effets neuroprotecteurs pour lutter contre les maladies neurodégénératives. Une étude menée en 2019 a exploré le potentiel neuroprotecteur de la tétrahydrocurcumine dans des cellules de l’hippocampe HT22 traitées au glutamate. Dans ce contexte, le glutamate induit un stress oxydatif dans les cellules HT22 et provoque la mort cellulaire en activant les protéines kinases activées par les mitogènes [4].
5. Publications de recherche portant sur les cellules HT22
Voici quelques articles de recherche intéressants portant sur la lignée cellulaire HT22 :
Cette étude, publiée dans l’International Journal of Molecular Medicine (2019), a mis en évidence le potentiel neuroprotecteur de la crocine, un composé isolé du Crocus sativus L., dans des cellules HT22 endommagées par le L-glutamate.
Cette publication parue dans Neuropharmacology (2018) a rapporté que les dérivés de l’oxindole protègent contre la mort cellulaire des cellules HT22 induite par le stress oxydatif.
Cet article de recherche a été publié dans le Journal of Ginseng Research en 2019. Cette étude a exploré les effets neuroprotecteurs d’un produit naturel, le ginsénoside Rb2, à l’aide de la lignée cellulaire HT22. L’étude a révélé que le ginsénoside Rb2 réduisait efficacement le stress oxydatif et la mort cellulaire induits par le glutamate dans les cellules HT22 de l’hippocampe murin.
Cette étude publiée dans *Ecotoxicology and Environmental Safety* (2021) a évalué le potentiel cytotoxique des nanoparticules d’argent sur la lignée cellulaire HT22.
La ferrostatine-1 protège les cellules HT-22 contre la toxicité oxydative
Cet article de recherche a été publié en 2020 dans la revue *Neural Regeneration Research*. Il suggère que la ferrostatine-1, un inhibiteur de la ferroptose, prévient la toxicité oxydative dans les cellules de l’hippocampe HT22.
Ressources sur les cellules HT22 : protocoles, vidéos et plus encore
Certaines ressources en ligne sur les cellules HT22 expliquent leurs protocoles de transfection, de différenciation et de culture cellulaire :
- Transfection des cellules HT22 : Ce document contient un protocole optimisé pour la transfection des cellules HT22 dans des plaques de culture cellulaire à 24 et 96 puits.
- Différenciation des cellules HT22 : Cet article vous guidera de manière exhaustive à travers le protocole de différenciation des cellules HT22.
Le lien suivant contient le protocole de culture cellulaire des cellules HT22 :
- Sous-culture des cellules HT22 : Ce lien vous aidera à apprendre le protocole de sous-culture de la lignée cellulaire HT22. De plus, il vous aidera à apprendre le protocole d’induction de la neurotoxicité dans les cellules.
- Cellules hippocampiques HT22 : Ce site Web contient de nombreuses informations utiles sur le temps de doublement des cellules HT22, les milieux de culture et les protocoles de culture cellulaire.
Références
- He, M., et al., La différenciation rend les neurones HT22 sensibles à l’excitotoxicité. Neural Regen Res, 2013. 8(14) : p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., La fisétine protège les cellules HT22 contre la neurotoxicité induite par une glycémie élevée par l’intermédiaire de la voie de signalisation PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14 : p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Effets protecteurs de la berbérine contre la neurotoxicité induite par la β-amyloïde dans les cellules HT22 par l’intermédiaire de la voie Nrf2/HO-1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133 : p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Effets neuroprotecteurs de la tétrahydrocurcumine contre le stress oxydatif induit par le glutamate dans les cellules HT22 de l’hippocampe. Molecules, 2019. 25(1) : p. 144.