Cellules HL-60 : les éléments essentiels de la recherche sur la leucémie myéloïde aiguë
HL-60 est une lignée cellulaire immortelle de leucémie humaine. Elle est largement utilisée pour étudier la biologie du cancer et évaluer l’efficacité des médicaments anticancéreux. De plus, elle permet également de comprendre les différents mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans la prolifération et la différenciation des cellules leucémiques.
- Milieu de culture
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- Temps de doublement
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- Type de croissance
- Adhérent
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible chez
- Cytion — Commander HL-60
- Lignée cellulaire HL-60 : origine et renseignements généraux
- Informations sur la culture cellulaire HL-60
- Cellules HL-60 : avantages et inconvénients
- Applications de la lignée cellulaire HL-60 en recherche : du cancer à l’immunologie et au-delà
- La lignée cellulaire HL-60 au service de votre recherche
- Cellules HL-60 : publications de recherche
- Ressources sur la lignée cellulaire HL-60 : protocoles, vidéos et plus encore
- Lignée cellulaire HL-60 : FAQ essentielle pour les chercheurs
- Références
- Foire aux questions
Lignée cellulaire HL-60 : origine et renseignements généraux
La lignée cellulaire HL-60 constitue un modèle essentiel dans la recherche en hématologie, offrant des aperçus approfondis sur la nature et le traitement de la leucémie promyélocytaire aiguë. Cet article de blogue explore les origines et les caractéristiques distinctives de la lignée cellulaire HL-60, mettant en lumière son rôle crucial dans la recherche médicale et les développements thérapeutiques.
La lignée HL-60 a été initialement établie à partir des cellules leucémiques d’une femme de race blanche âgée de 36 ans chez qui on avait diagnostiqué une leucémie promyélocytaire aiguë. Ce travail pionnier a été mené par S.J. Collins et son équipe, marquant une percée significative puisque la lignée HL-60 a été la première lignée cellulaire de leucémie myéloïde à être isolée et cultivée avec succès en suspension. Cette réalisation a ouvert la voie à de nombreuses possibilités de recherche sur la leucémie et d’autres maladies apparentées. Sur le plan des caractéristiques physiques, les cellules HL-60 présentent une morphologie lymphoblastique et sont connues pour se développer en suspension, se présentant sous une forme arrondie. La taille de ces cellules varie, avec des diamètres allant de 9 à 25 μm, ce qui reflète leur hétérogénéité. Sur le plan génomique, la lignée cellulaire HL-60 est principalement pseudodiploïde, avec un nombre modal de chromosomes de 43. Il est intéressant de noter qu’un faible pourcentage (6,2 %) des cellules présente une composante 2S, ce qui ajoute une couche supplémentaire de complexité à leur constitution génétique [1].
La compréhension de ces aspects fondamentaux des cellules HL-60 permet non seulement d’approfondir nos connaissances sur la leucémie au niveau cellulaire, mais soutient également les efforts de recherche en cours visant à découvrir de nouvelles modalités de traitement. Dans les sections suivantes, nous examinerons comment les propriétés uniques de la lignée cellulaire HL-60 ont contribué à des avancées significatives dans la recherche médicale.
Informations sur la culture cellulaire HL-60
La culture des cellules HL-60 est simple et facile. Cette section vous permettra de vous familiariser avec les notions de base, telles que : Quel est le temps de doublement de la lignée cellulaire HL-60? La culture des cellules HL-60 est-elle adhérente ou en suspension? Quelle est la densité d’ensemencement de la lignée cellulaire HL-60? Quel milieu utilise-t-on pour la croissance des cellules HL-60?
Temps de doublement :
Le temps de doublement des cellules HL-60 est d’environ 36 à 48 heures.
Adhérente ou en suspension :
Les cellules HL-60 se développent en culture en suspension.
Densité d’ensemencement :
Ces cellules sont ensemencées à une densité de 1 × 10⁶ cellules/mL lors d’une repiquage et à une densité de 2 × 10⁵ cellules/mL lors du démarrage d’une nouvelle culture.
Milieu de croissance :
On utilise un milieu de croissance RPMI 1640 additionné de 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) et de 2,5 mM de L-glutamine pour cultiver les cellules HL-60. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de croissance :
Les cellules HL-60 sont cultivées dans un incubateur humidifié à une température de 37 °C et avec un apport de 5 % de CO₂.
Conservation :
Les cellules HL-60 sont conservées à une température inférieure à -150 °C ou dans la phase vapeur d’azote liquide afin de préserver un maximum de cellules viables.
Milieu et procédé de congélation :
Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF sont utilisés pour la congélation des cellules HL-60. Une méthode de congélation lente est privilégiée pour la congélation des cellules HL-60.
Procédure de décongélation :
Le flacon congelé de cellules HL-60 est agité rapidement dans un bain-marie réglé à 37 °C. Par la suite, les cellules sont centrifugées pour éliminer le milieu de congélation. Un nouveau milieu de culture est ajouté, et les cellules sont remises en suspension pour être transférées dans un flacon en vue de leur croissance.
Niveau de biosécurité :
Le niveau de biosécurité 1 est recommandé pour la manipulation des cultures de HL-60.
Cellules HL-60 : avantages et inconvénients
Avant de travailler avec une lignée cellulaire, il peut être utile de connaître ses avantages et ses inconvénients. Cette section de l’article abordera quelques avantages et inconvénients liés à l’utilisation des cellules HL-60.
Avantages
Voici quelques-uns des principaux avantages de la lignée cellulaire HL-60 :
- Polyvalence : Les cellules HL-60 ont la capacité de se différencier en plusieurs types cellulaires, notamment en monocytes, en macrophages et en granulocytes, dans des conditions de croissance appropriées. Cela les rend utiles pour l’étude de la différenciation cellulaire et d’autres processus cellulaires.
- Facilité de culture : les cellules HL-60 sont faciles à cultiver et à maintenir en culture en suspension, ce qui en fait un outil pratique pour l’étude de multiples processus cellulaires.
- Modèle in vitro de la leucémie : Ces cellules ont été prélevées chez un patient atteint de leucémie myéloïde aiguë et présentent donc des caractéristiques génétiques et moléculaires similaires à celles de la maladie.
Inconvénients
Les inconvénients de la lignée cellulaire HL-60 sont les suivants :
- Potentiel de différenciation limité : les cellules HL-60 peuvent se différencier en certaines lignées myéloïdes en réponse à des stimuli, mais leur potentiel de différenciation est limité comparativement aux cellules primaires.
Applications de la lignée cellulaire HL-60 en recherche : du cancer à l’immunologie et au-delà
La lignée cellulaire HL-60, dérivée d’un patient atteint de leucémie promyélocytaire aiguë, est devenue une pierre angulaire de la recherche médicale en raison de sa polyvalence et de sa facilité de culture. Ces cultures nécessitant peu d’entretien jouent un rôle central dans une multitude d’applications de recherche, et nous avons pour objectif d’explorer certaines des plus importantes d’entre elles, en intégrant un large éventail de mots-clés de recherche afin d’offrir un aperçu complet.
Recherche sur le cancer
Dans le domaine de l’oncologie, la lignée cellulaire HL-60 a joué un rôle déterminant dans l’élucidation des mécanismes complexes de la signalisation des cellules cancéreuses, faisant progresser notre compréhension de l’expression des oncogènes et favorisant la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques. Cette lignée cellulaire fait partie du panel de lignées cellulaires leucémiques utilisé pour le criblage de nouveaux agents chimiothérapeutiques. Un exemple frappant est l’utilisation des cellules HL-60 pour vérifier les propriétés antileucémiques de composés extraits d’organismes marins, révélant à la fois des effets antiprolifératifs et pro-apoptotiques [2]. De plus, cette lignée cellulaire a facilité l’étude de voies de signalisation clés telles que la voie JAK/STAT et de leur influence sur la prolifération des cellules leucémiques, tout en permettant d’évaluer le potentiel thérapeutique de composés bioactifs comme la thymoquinone [3].
Immunologie
Les cellules HL-60 constituent un système in vitro robuste permettant d’étudier diverses réponses immunitaires, y compris le processus complexe de la chimiotaxie et la régulation de l’expression de médiateurs immunitaires clés. Ces cellules peuvent se différencier en cellules myéloïdes apparentées aux macrophages et aux neutrophiles, servant ainsi de modèle polyvalent pour l’étude des voies inflammatoires. Par exemple, des cellules de type macrophage dérivées de HL-60 ont été utilisées pour explorer le potentiel anti-inflammatoire de composés phytochimiques issus du genre Brassica [4]. Dans une autre étude, la différenciation des cellules HL-60 en cellules de type neutrophiles a permis aux chercheurs d’identifier des gènes essentiels à la différenciation cellulaire et aux fonctions immunitaires associées [5].
Découverte de médicaments
Les capacités de différenciation myéloïde de la lignée HL-60 ont également été mises à profit dans la découverte de médicaments, notamment pour identifier des candidats susceptibles de moduler la voie de différenciation, ce qui est crucial dans le traitement de la leucémie. Cela est illustré par des études ayant utilisé la lignée cellulaire HL-60 pour évaluer le potentiel anticancéreux de produits naturels [6].
De plus, la lignée cellulaire HL-60 sert à étudier divers aspects de la biologie des cellules myéloïdes, notamment pour comprendre comment le traitement par des agents tels que l’acide rétinoïque peut entraîner une différenciation monocytaire, ou comment ces cellules imitent les neutrophiles primaires dans la formation de pièges extracellulaires. L’utilisation de ce modèle pour élucider les événements moléculaires liés aux hémopathies malignes est encore élargie par son application dans les études de panels de cellules mutées, en particulier dans le contexte de l’analyse des « hotspots » p53 en leucémie.
Pour ceux qui étudient la mécanique cellulaire, le temps de doublement des cellules HL-60 et leur réponse à l’électroporation dans des canaux microfluidiques, cette lignée cellulaire offre une plateforme fiable de recherche.
La lignée cellulaire HL-60 pour vos recherches
Cellules HL-60 : Publications de recherche
Plusieurs études de recherche sont disponibles sur les cellules HL-60. Nous en avons répertorié ici quelques exemples notables :
Cet article de recherche a mis en évidence l’effet antitumoral d’un composé, le stigmast-5-en-3-ol, sur les cellules de leucémie HL-60 et les cellules de cancer du sein MCF-7.
Cette étude décrit le rôle de la voie de signalisation JAK/STAT dans la prolifération des cellules HL-60. De plus, les chercheurs examinent le potentiel thérapeutique de la thymoquinone à l’aide de cette lignée cellulaire leucémique. Le composé inhibe la prolifération cellulaire et induit la mort cellulaire en réactivant l’expression des régulateurs négatifs de la cascade JAK/STAT.
Cette étude a utilisé des cellules HL-60 pour dériver un modèle cellulaire de type macrophage afin d’étudier l’activité anti-inflammatoire des composés végétaux de Brassica.
Cette étude, publiée dans la revue International Immunopharmacology, a permis de développer des cellules mimant les neutrophiles à partir de la lignée cellulaire HL-60 en utilisant du diméthylsulfoxyde. L’étude a observé que le gène ERK est impliqué dans la différenciation de ces cellules.
Cet article de recherche examine le potentiel anticancéreux de composés polyphénoliques végétaux, à savoir l’acide gallique et l’acide ellagique, sur des cellules leucémiques HL-60 sensibles et résistantes aux médicaments.
Ligne cellulaire HL-60 : ressources, protocoles, vidéos et plus encore
De nombreuses ressources éducatives en ligne sont disponibles sur la lignée cellulaire HL-60. Cette section présente quelques ressources décrivant la culture et la transfection de cette lignée cellulaire.
Protocoles de culture cellulaire
Les ressources décrivant les méthodes de culture des cellules HL-60 sont les suivantes :
- Propagation des cellules HL-60 : Ce document fournit des renseignements sur la repiquage des cellules HL-60.
- Ligne cellulaire HL-60 : Ce site Web contient des renseignements de base sur les cellules HL-60 et les protocoles, y compris la culture, la congélation et la décongélation des cellules.
Protocoles de transfection
Voici quelques ressources décrivant les méthodes de transfection choisies pour les cellules HL-60.
- Transfection des cellules HL-60 : Ce lien présente une procédure détaillée de transfection des cellules leucémiques HL-60.
- Transfection transitoire des cellules HL-60 : Ce document contient des renseignements utiles sur la lignée cellulaire et présente un protocole détaillé pour la transfection transitoire des cellules HL-60.
Vidéos relatives à la lignée cellulaire HL-60
Les ressources vidéo sur les cellules HL-60 sont très limitées.
- Passage des cellules HL-60 : Cette vidéo explique le protocole de repiquage des cellules HL-60.
Nous espérons que cet article vous fournira des renseignements de base sur la culture et l’entretien de la lignée cellulaire HL-60. De plus, il vous permettra d’approfondir vos connaissances sur les avantages liés à l’utilisation de ces cellules leucémiques dans la recherche. Si vous prévoyez utiliser cette lignée cellulaire, n’hésitez pas à en faire la commande auprès de nous.
Lignée cellulaire HL-60 : Foire aux questions indispensables pour les chercheurs
La lignée cellulaire HL-60 est une lignée cellulaire de leucémie promyélocytaire issue d’un patient atteint de leucémie promyélocytaire aiguë. Cette lignée cellulaire est largement utilisée dans la recherche pour étudier la différenciation des cellules myéloïdes et l’expression des oncogènes.
L'acide rétinoïque induit la différenciation dans la lignée cellulaire HL-60, amenant les cellules à mûrir en cellules de type granulocytes. Ce processus est essentiel à l'étude des mécanismes sous-jacents à la différenciation myéloïde.
Le sérum est un composant essentiel du milieu de culture des cellules hématopoïétiques; il fournit les facteurs de croissance et les nutriments indispensables à la prolifération et au maintien des cellules HL-60 en culture.
Oui, la lignée cellulaire HL-60 est capable de chimiotaxie, c'est-à-dire le déplacement des cellules en réponse à des stimuli chimiques. Cela la rend utile pour les essais de chimiotaxie et pour la compréhension de la migration cellulaire.
La lignée cellulaire HL60, qui présente une expression d'oncogènes cellulaires, sert de système modèle pour étudier la régulation de l'expression des oncogènes et leur rôle dans la leucémogenèse.
La lignée cellulaire HL-60 est d’une valeur inestimable dans les études de biologie cellulaire, notamment pour l’étude du cycle cellulaire, des processus de différenciation cellulaire et des mécanismes moléculaires à l’origine de la leucémie.
Les panels de lignées cellulaires leucémiques permettent de mener des études comparatives sur diverses lignées cellulaires leucémiques, notamment en ce qui concerne leur profil génétique, leurs profils de mutations, leur réponse aux médicaments et les voies moléculaires impliquées dans la leucémogenèse, comme la voie MAPK.
Les certificats d'analyse et d'origine peuvent généralement être téléchargés ou demandés auprès du fournisseur ou de la banque de cellules qui met à disposition la lignée cellulaire HL-60, ce qui garantit aux chercheurs de disposer de cellules authentifiées et exemptes de contaminants pour leurs études.
La lignée cellulaire HL-60 peut être différenciée pour acquérir des caractéristiques similaires à celles des neutrophiles primaires, notamment la capacité de former des pièges extracellulaires, ce qui permet aux chercheurs de l’utiliser comme modèle de substitution pour étudier le comportement et le fonctionnement des neutrophiles.
Les cellules HL-60 servent de modèle in vitro pour l’étude de la leucémie promyélocytaire aiguë, de la biologie des lignées cellulaires myéloïdes et des effets de divers composés sur la différenciation et la prolifération. Elles sont également utilisées dans des expériences visant à étudier les réponses cellulaires telles que la chimiotaxie, l’expression des oncogènes et l’impact des mutations sur les processus cellulaires.
L'abréviation « HL-60 » signifie « Human Leukemia 60 ». Elle désigne la 60e lignée cellulaire établie à partir de patients atteints de leucémie au moment de sa mise au point. Les lettres « HL » indiquent qu'il s'agit de cellules leucémiques humaines.
Le temps de doublement des cellules HL-60 est d’environ 36 à 48 heures dans des conditions de croissance optimales. Toutefois, ce délai peut varier en fonction des conditions de culture et du nombre de passages des cellules.
Lorsque les cellules HL-60 sont traitées au 12-myristate-13-acétate de phorbol (PMA), elles se différencient généralement en un type cellulaire s’apparentant aux macrophages ou aux monocytes. Cette différenciation s’inscrit dans le cadre de l’étude des voies de différenciation monocytaire et de la compréhension des mécanismes de différenciation des cellules myéloïdes.
Références
- Fleck, R., S. Romero-Steiner et M. Nahm, « Utilisation de la lignée cellulaire HL-60 pour mesurer la capacité opsonique des anticorps antipneumococciques ». Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1) : p. 19-27.
- Fernando, I.S., et al., Effets apoptotiques et antiprolifératifs du stigmast-5-en-3-ol issu de Dendronephthya gigantea sur les cellules HL-60 de leucémie humaine et les cellules MCF-7 de cancer du sein humain. Toxicology in Vitro, 2018. 52 : p. 297-305.
- Almajali, B., et al., La thymoquinone inhibe la prolifération cellulaire et favorise l’apoptose des cellules leucémiques HL60 par la réexpression des régulateurs négatifs de la voie JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention : APJCP, 2021. 22(3) : p. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analyse du potentiel anti-inflammatoire des composés bioactifs de Brassica dans un modèle de cellules de type macrophages humains dérivées de cellules HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149 : p. 112804.
- Wang, D., et al., L’ERK intervient dans la différenciation et la fonction des cellules de type neutrophiles HL-60 induites par le diméthylsulfoxyde, qui imitent les neutrophiles inflammatoires. International Immunopharmacology, 2020. 84 : p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Activité antileucémique des composés bioactifs dérivés de Brassica sur les cellules de leucémie myéloïde HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21) : p. 13400.