Lignée cellulaire A375 – Guide sur la recherche sur le mélanome
La lignée cellulaire A375 est une lignée de cellules de mélanome humain largement utilisée dans la recherche en toxicologie et en immuno-oncologie. Les chercheurs utilisent cette lignée cellulaire pour étudier la biologie du cancer et les voies de signalisation, pour tester ou cribler des agents anticancéreux potentiels, et pour mettre au point de nouveaux traitements efficaces.
- Milieu de culture
- Voir la page du produit
- Temps de doublement
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- Type de croissance
- Adhérent
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible chez
- Cytion — Commander A375
- Origine et caractéristiques générales des cellules A375
- Cellules A375 : Renseignements sur la culture cellulaire
- Avantages et limites de la lignée cellulaire A375
- Achetez vos cellules A375 dès maintenant
- Applications de recherche de la lignée cellulaire A375
- Cellules A375 : publications
- Ressources sur la lignée cellulaire A375 : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions (FAQ) sur les cellules A375
- Références
- Foire aux questions
Origine et caractéristiques générales des cellules A375
Connaître l’origine et les caractéristiques générales d’une lignée cellulaire peut vous aider à planifier son utilisation dans le cadre de vos recherches. Cette section de l’article traitera de l’origine et des caractéristiques de la lignée cellulaire A375. Par exemple, qu’est-ce que la lignée cellulaire A375? Quelles sont les caractéristiques de la lignée cellulaire A375? D’où proviennent les cellules A375? Quelle est la morphologie des cellules de mélanome A375? Quelle est la taille des cellules A375?
- La lignée cellulaire de cancer de la peau A375 provient de la culture d’un explant d’une tumeur solide prélevée chez une femme de 54 ans atteinte d’un mélanome malin [1].
- Les cellules A375 présentent une morphologie de type épithélial.
- La taille des cellules A375 est relativement plus petite que celle des autres lignées cellulaires. Elles ont un diamètre d’environ 12 µm.
- Les cellules de mélanome A375 sont hypotriploïdes. Le nombre modal de chromosomes pour cette lignée cellulaire est de 62. Habituellement, chaque cellule possède neuf chromosomes marqueurs et une copie des chromosomes normaux N2, N6 et N22.
Cellules A375 : Renseignements sur la culture cellulaire
Les cultures cellulaires A375 sont faciles à entretenir. Elles ne présentent aucune exigence particulière en matière de culture cellulaire. Cette section vous aidera à acquérir les renseignements nécessaires sur la culture cellulaire, notamment le temps de doublement des cellules A375. Quel est le milieu de culture de la lignée cellulaire A375? Quelle est la densité d’ensemencement des cellules A375? Les cellules de mélanome A375 sont-elles adhérentes?
Points clés pour la culture des cellules A375
Temps de doublement de la population :
Le temps de doublement des cellules A375 est de 20 heures.
Adhérentes ou en suspension :
La lignée cellulaire A375 est une lignée de cellules de mélanome humain adhérentes.
Densité d’ensemencement :
Une densité cellulaire de 1 × 10⁴ cellules/cm² est idéale pour les cultures cellulaires A375. Les cellules adhérentes sont rincées avec une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) 1×, puis incubées avec une solution de repiquage (Accutase). Par la suite, on ajoute du milieu de culture aux cellules, puis on les centrifuge. Les cellules récoltées sont remises en suspension dans un milieu de culture et réparties dans de nouveaux flacons pour la croissance.
Milieu de croissance :
Le DMEM est recommandé comme milieu idéal pour les cellules A375 lorsqu’il est enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), de 4,5 g/L de glucose, de 1,5 g/L de NaHCO₃, de 4 mM de L-glutamine et de 1,0 mM de pyruvate de sodium. Le milieu de culture A375 doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de culture :
Les cellules de mélanome A375 sont cultivées dans un incubateur humidifié (37 °C) avec un apport de 5 % de CO₂.
Conservation :
Les cellules A375 congelées doivent être conservées à une température inférieure à -150 °C dans la phase vapeur d’azote liquide ou dans un congélateur électrique.
Procédure de congélation et milieu :
Les milieux CM-1 ou CM-ACF sont utilisés pour congeler la lignée cellulaire A375. Un processus de congélation lente, permettant une baisse graduelle de la température de 1 °C, a été choisi afin de préserver la viabilité cellulaire.
Procédure de décongélation :
Le flacon de cellules de mélanome A375 congelées est agité rapidement dans un bain-marie pendant 40 à 60 secondes jusqu’à ce qu’il ne reste plus qu’un petit morceau de glace. On ajoute du milieu frais aux cellules, puis on les centrifuge pour éliminer les résidus du milieu de congélation. Le culot cellulaire obtenu est à nouveau remis en suspension et transvasé dans de nouveaux flacons.
Niveau de biosécurité :
Les cultures A375 sont manipulées et entretenues dans des laboratoires de niveau de biosécurité 1.
Avantages et limites de la lignée cellulaire A375
À l’instar d’autres lignées cellulaires, la lignée cellulaire de mélanome A375 présente une combinaison unique d’avantages et de limites, ce qui en fait un outil précieux pour la recherche sur le mélanome. Cette section ne présente que quelques-uns des principaux avantages et inconvénients de la lignée cellulaire A375.
Avantages
Les principaux avantages des cellules A375 sont énumérés ci-dessous :
- Modèle tumoral de mélanome : La lignée cellulaire A375 a été dérivée d’une tumeur maligne de type mélanome, ce qui en fait un modèle tumoral inestimable pour étudier la biologie du mélanome et les interventions thérapeutiques. Ces cellules présentent des propriétés caractéristiques du mélanome, telles qu’un taux de prolifération élevé et un fort pouvoir invasif.
- Tumorigénicité : Les cellules A375 sont hautement tumorigènes, ce qui signifie qu’elles peuvent former des tumeurs. On rapporte que les cellules A375 produisent des mélanomes amélaniques agressifs chez des souris NIH Swiss traitées avec du sérum anti-thymocytaire (un agent immunosuppresseur).
- Bien caractérisée : La lignée cellulaire A375 est génétiquement bien caractérisée. Elle présente des mutations génétiques spécifiques, comme celles observées dans le mélanome. Les mutations de la lignée A375 comprennent une altération du gène BRAF, ce qui la rend sensible aux inhibiteurs spécifiques de BRAF. Ce profil génétique fait donc des cellules A375 un excellent outil de recherche sur le cancer pour étudier les voies moléculaires sous-jacentes et les thérapies ciblées.
Limites
Les limites associées aux cellules A375 sont les suivantes :
- Limites in vitro : A375 est un modèle tumoral in vitro. Bien qu’elle imite les caractéristiques du mélanome, elle ne peut pas représenter pleinement la complexité des tumeurs mélaniques. Par conséquent, il convient de faire preuve de prudence lorsque les résultats obtenus in vitro sont généralisés aux études cliniques.
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Applications de la lignée cellulaire A375 en recherche
La lignée cellulaire A375 trouve de nombreuses applications dans la recherche sur le cancer. Voici quelques-uns des domaines courants dans lesquels les cellules A375 sont utilisées.
- Recherche sur le cancer : Les cellules A375 sont largement utilisées dans la recherche sur le mélanome. Les chercheurs se sont servis de ces cellules pour étudier la biologie du cancer de la peau, ses processus et les mécanismes de signalisation cellulaire sous-jacents, notamment la prolifération, la migration et l’invasion cellulaires. Cela pourrait également aider les chercheurs à identifier de nouvelles cibles thérapeutiques moléculaires. Une étude menée par Lin Zhu et ses collègues en 2019 a utilisé des cellules de mélanome A375 hautement agressives et a mis en évidence le rôle du microARN-3662 dans la croissance et l’invasion des cellules de mélanome A375. Les résultats de l’étude indiquent que le microARN-3662 cible le gène ZEB1 et régule la croissance des cellules de mélanome in vitro et in vivo dans le modèle tumoral A375 [2]. De même, des recherches menées en 2018 ont révélé que les voies PI3K/AKT et MAPK/ERK sont impliquées dans la prolifération et la métastase de la lignée cellulaire A375 [3].
- Découverte et essais de médicaments : La lignée cellulaire A375 constitue un modèle tumoral in vitro utile pour tester et cribler des agents anticancéreux potentiels. Les chercheurs évaluent la toxicité et l’efficacité de nouveaux médicaments chimiothérapeutiques, de composés et d’autres thérapies à l’aide de ces cellules de mélanome A375. Par exemple, une étude a exploré les propriétés anticancéreuses des microvésicules et nanovésicules dérivées du pamplemousse sur des cellules cancéreuses de mélanome humain A375. Les résultats ont révélé que les microvésicules et les nanovésicules induisent un arrêt du cycle cellulaire et l’apoptose, et entravent l’expression génique impliquée dans la prolifération, la migration et l’invasion cellulaires [4].
Cellules A375 : Publications
Certaines publications de recherche importantes portant sur les cellules A375 sont mentionnées ici.
Cette étude a été publiée dans le Journal of Oncology en 2019. Elle suggère que le traitement combiné à base de vitamine D et de ses analogues améliore l’activité anticancéreuse du cisplatine et de la dacarbazine dans les cellules de mélanome A375.
Cette recherche a été publiée dans le Journal of Herbal Medicine en 2022. Cette étude a exploré les effets antimélanomateux du gel d’aloès vera sur les cellules de mélanome A375.
Cette étude publiée dans Oncogene (2021) a suggéré que le membre 2 de la famille des fermitines (FERMT2 ou kindlin-2) favorise la progression du mélanome en activant la voie MAPK par liaison avec p-α-Pix et Rac1.
Cette étude publiée dans *The American Journal of Dermatopathology* (2019) suggère que la protéine FARP1 pourrait favoriser le développement et la progression du mélanome cutané. Elle pourrait donc constituer une cible thérapeutique utile.
Cet article de recherche a été publié dans Bioengineered (2019). Cette étude a exploré l’activité cytotoxique et apoptotique d’un extrait de la plante Phyllodium elegans sur des lignées cellulaires de carcinome humain, dont la lignée A375.
Ressources sur la lignée cellulaire A375 : protocoles, vidéos et plus encore
Voici quelques ressources en ligne consacrées aux cellules A375.
- Transfection des cellules A375 : Ce tutoriel vidéo vous aidera à apprendre, étape par étape, comment effectuer la transfection des cellules A375.
- Culture cellulaire : Cette vidéo contient des renseignements très utiles sur la culture de lignées cellulaires.
Les protocoles de culture cellulaire pour les cellules A375 sont répertoriés ici.
- Lignée cellulaire A375 : Ce lien contient des renseignements utiles sur la culture et l’entretien de la lignée cellulaire A375, y compris les milieux de culture A375 et la manipulation des cultures A375 congelées et en prolifération.
La lignée cellulaire A375 est une lignée cellulaire de mélanome humain issue d’une tumeur maligne de type mélanome. Elle est couramment utilisée dans la recherche sur le cancer en raison de son profil génétique bien caractérisé.
Les cellules A375 sont utilisées dans diverses études, notamment celles portant sur les effets du rutoside dans le traitement du mélanome, l’inhibition de l’expression du gène TMSB4X et la thérapie photodynamique pour le traitement des tumeurs.
La xénogreffe de la lignée cellulaire A375 est un modèle couramment utilisé pour étudier la progression tumorale et les interventions thérapeutiques in vivo. Les chercheurs implantent des cellules A375 chez des souris afin de créer des xénogreffes qui reproduisent le mélanome humain.
Des études portant sur l'exposition aux ondes millimétriques de l'ordre du GHz examinent ses effets sur les cellules A375, notamment les changements potentiels dans le comportement cellulaire et l'expression de l'apoptose.
Il a été démontré que le traitement au rutoside agit sur le cytosquelette et le cytosquelette d'actine des cellules A375, ce qui pourrait influencer leurs propriétés biomécaniques et leur capacité d'invasion.
Les recherches portent souvent sur l’expression des protéines liées à l’apoptose, les concentrations de Tβ4 et les interactions avec des composés associés au mélanome, afin de comprendre les mécanismes moléculaires sous-jacents à cette maladie.
Les chercheurs peuvent consulter un certificat d’analyse, télécharger une fiche signalétique et consulter un certificat d’origine pour les cellules A375 afin de s’assurer qu’elles respectent les normes de qualité et de sécurité.
Les cellules A375 présentent des modes de croissance spécifiques et forment des couches cellulaires distinctes, ce qui les rend adaptées à divers protocoles expérimentaux dans le cadre de la recherche sur le mélanome.
La thérapie photodynamique, qui fait appel au bleu de méthylène et à d’autres photosensibilisateurs exposés à la lumière, est utilisée pour provoquer la mort cellulaire des cellules cancéreuses A375, ce qui ouvre de nouvelles perspectives pour le traitement du mélanome.
Les études portant sur le caryotype, les caractéristiques de souche et les cellules migratoires du mélanome contribuent à mieux comprendre la nature agressive et le potentiel métastatique des cellules A375 dans le cadre de la recherche sur le mélanome.
Références
- Avram, S., et al., Normalisation des modèles de mélanome humain A375 sur la membrane chorio-allantoïdienne d’embryon de poulet et chez la souris nue Balb/c. Oncol Rep, 2017. 38(1) : p. 89-99.
- Zhu, L., et al., Le microARN-3662 cible ZEB1 et atténue l’invasion de la lignée cellulaire de mélanome hautement agressive A375. Cancer Manag Res, 2019. 11 : p. 5845-5856.
- Peng, X., et al., L’oxyfadichalcone C inhibe la prolifération et les métastases des cellules de mélanome A375 en bloquant les voies PI3K/Akt et MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206 : p. 35-44.
- Stanly, C., et al., Les micro- et nanovésicules dérivées du pamplemousse présentent des profils métabolomiques distincts et des activités anticancéreuses dans la lignée cellulaire de mélanome humain A375. Cells, 2020. 9(12) : p. 2722.