Línea celular Neuro-2a
Neuro-2a es una línea celular neural derivada de ratón ampliamente utilizada en la investigación en neurociencia. Estas células se emplean principalmente para estudiar el desarrollo neural, la diferenciación, la neurotoxicidad, las vías de señalización celular y el crecimiento axonal. Además, se utilizan con fines de desarrollo y cribado de fármacos.
Este artículo se centra en aspectos importantes de las células de neuroblastoma Neuro-2a que podrían serte de ayuda antes de comenzar a trabajar con ellas. Abarcará principalmente:
- Características generales y origen de las células Neuro-2a
- Información sobre el cultivo de la línea celular Neuro-2a
- Ventajas y desventajas de la línea celular Neuro-2a
- Aplicaciones de investigación de la línea celular Neuro-2a
- Publicaciones de investigación que incluyen las células Neuro-2a
- Recursos para las células Neuro-2a: protocolos, videos y más
Características generales y origen de las células Neuro-2a
En esta parte del artículo se abordarán los antecedentes y las características básicas de la línea celular Neuro-2a que es esencial conocer antes de trabajar con ella. Aquí aprenderás: ¿Qué es la línea celular Neuro-2a? ¿Cuál es el origen de la línea celular Neuro-2a? ¿En qué consiste la diferenciación celular de Neuro-2a? ¿Cuál es el tamaño de una célula Neuro-2a? ¿Cuál es la morfología de las células Neuro-2a?
- Las células Neuro-2a se originaron a partir de un tumor espontáneo (neuroblastoma) de un ratón albino (cepa A). La línea celular fue establecida por R.J. Klebe y F.H. Ruddle.
- Las células de neuroblastoma Neuro-2a presentan una morfología neuronal y de células madre ameboides.
- El tamaño de las células Neuro-2a es de 12 micrómetros de altura [1].
- El número de cromosomas de las células Neuro-2a puede oscilar entre 59 y 193, con un número modal de 95. El cariotipo de estas células de neuroblastoma es inestable dentro de un rango de 94 a 98 cromosomas.
Información sobre el cultivo de la línea celular Neuro-2a
Las células Neuro-2a se utilizan ampliamente en los laboratorios de investigación en neurociencia. Antes de trabajar con estas células, debes conocer la información esencial sobre el cultivo celular que se menciona a continuación. Esto puede ayudarte a manejarlas con facilidad. Aprenderás: ¿Qué es un medio de cultivo para las células Neuro-2a? ¿Cómo se cultivan las células Neuro-2a? ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células Neuro-2a? ¿Cuál es la densidad de siembra de Neuro-2a ? ¿Cuál es el protocolo de cultivo de las células Neuro-2a? ¿Cuál es el medio de cultivo de las células Neuro-2a?
Puntos clave para el cultivo de células Neuro-2a
Tiempo de duplicación:
El tiempo de duplicación de las células Neuro-2a es de aproximadamente 70 horas.
Adherentes o en suspensión:
Neuro-2a es una línea celular adherente.
Densidad de siembra:
La densidad de siembra celular optimizada para la línea celular Neuro-2a es de 1 x 10⁴ células/cm². Para la siembra, las células se lavan con solución salina tamponada con fosfato libre de magnesio y calcio (1x). Posteriormente, se agrega una solución de pasaje (Accutase) y las células se incuban durante 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. Tras la disociación celular, se agrega medio fresco y las células se centrifugan. El sedimento celular obtenido se resuspende cuidadosamente y las células se vierten en un recipiente de cultivo para su crecimiento.
Medio de crecimiento:
Para el cultivo de células Neuro-2a se utiliza EMEM. Contiene 10 % de suero fetal bovino (FBS), 2 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃, EBSS, 1 mM de piruvato de sodio y NEAA para un crecimiento celular óptimo. El medio debe cambiarse de 1 a 2 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:
Los cultivos de Neuro-2a se mantienen en una incubadora humidificada a 37 °C conectada a un suministro de 5 % de CO₂.
Almacenamiento:
Las células deben almacenarse a una temperatura inferior a -150 °C en un congelador eléctrico de temperatura ultrabaja o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para el almacenamiento a largo plazo.
Proceso de congelación y medio:
Para congelar las células Neuro-2a se utilizan los medios CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan mediante un proceso de congelación lenta que permite solo una disminución de 1 °C por minuto. Esto protege a las células del choque térmico y mantiene su viabilidad.
Proceso de descongelación:
Para descongelar los cultivos congelados, se coloca el vial en un baño de agua a 37 °C durante 40 a 60 segundos hasta que solo quede un pequeño trozo de hielo. Luego, se agrega medio de cultivo y las células se someten a centrifugación. Este paso ayuda a eliminar los componentes del medio de congelación. A continuación, se resuspende el sedimento celular y las células se transfieren a un nuevo frasco lleno de medio de cultivo. Posteriormente, las células se colocan en una incubadora a 37 °C durante un mínimo de 24 horas.
Nivel de bioseguridad:
Es obligatorio contar con un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para manipular y mantener los cultivos de Neuro-2a.
- Ventajas y desventajas de la línea celular Neuro-2a
- Aplicaciones de investigación de la línea celular Neuro-2a
- Información sobre el cultivo de la línea celular Neuro-2a
- Características generales y origen de las células Neuro-2a
- 5. Publicaciones de investigación sobre las células Neuro-2a
- Recursos para las células Neuro-2a: protocolos, videos y más
- Preguntas frecuentes
Ventajas y desventajas de la línea celular Neuro-2a
Las células Neuro-2a presentan algunas ventajas y desventajas que las distinguen de otras líneas celulares neuronales. A continuación se enumeran algunos de los pros y contras más destacados de estas células.
Ventajas
Las ventajas de la línea celular de neuroblastoma murino Neuro-2a son:
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Fácil de mantener:
La línea celular Neuro-2a no requiere procedimientos complejos ni intrincados de cultivo celular. Es fácil de cultivar y mantener en laboratorios de investigación.
-
Modelo de célula neuronal in vitro:
Neuro-2a es un modelo celular neuronal conveniente, ampliamente utilizado por los investigadores en estudios sobre el desarrollo y la diferenciación de las neuronas.
Desventajas
Las desventajas de las células Neuro-2a son:
-
Origen murino:
Neuro-2a es de origen murino, y los investigadores deben tener precaución al extrapolar los resultados de estudios basados en ratones a la salud y las enfermedades humanas, ya que la biología de los ratones y la de los humanos puede diferir significativamente.
Aplicaciones de investigación de la línea celular Neuro-2a
Las células Neuro-2a ofrecen numerosas aplicaciones en el campo de la investigación neurocientífica. A continuación se analizan algunos usos prometedores de esta línea celular:
- Desarrollo neuronal: Neuro-2a es un modelo de célula neuronal in vitro que se utiliza ampliamente para estudiar el desarrollo neuronal y procesos relacionados, como la diferenciación, el crecimiento axonal y la formación de sinapsis. Un estudio realizado en 2020 utilizó células Neuro-2a para explorar el papel del microARN-124 en la diferenciación de células neuronales inducida por el ácido retinoico [2]. Otro estudio investigó la expresión del receptor gamma del ácido retinoico (RARG) y del miARN-124 en la línea celular de neuroblastoma (N2A). Este estudio propuso que el miR-124 actúa sobre el RARG y suprime el crecimiento de las neuritas [3].
- Neurotoxicidad: Las células Neuro-2a también se utilizan para evaluar los efectos tóxicos de medicamentos, sustancias químicas o factores ambientales sobre las células neuronales. Por ejemplo, un estudio realizado por Zhihong Yin y sus colaboradores investigó la neurotoxicidad del bisfenol A (BPA), una sustancia química ambiental, utilizando células Neuro-2a. Observaron que el BPA reprime la diferenciación y la proliferación de las células neuronales al alterar su integridad celular y sináptica [4].
- Cribado de fármacos: Las células Neuro-2a también se emplean para evaluar las actividades terapéuticas de diversos fármacos, compuestos y productos naturales. Por ejemplo, en un estudio se utilizaron células Neuro-2a para analizar el potencial antioxidante del extracto de la planta Ginkgo biloba. Además, la investigación sugirió que este extracto reduce la agregación de Aβ y podría constituir un tratamiento potencial para la enfermedad de Alzheimer [5].
5. Publicaciones de investigación sobre las células Neuro-2a
A continuación se presentan algunos artículos de investigación interesantes sobre la línea celular Neuro-2a.
Este estudio, publicado en el Journal of Natural Medicines en 2018, investigó los efectos terapéuticos de las alcamidas aisladas de la pimienta blanca (P. nigrum) en las células neuronales Neuro-2a.
Esta investigación, publicada en *Acta Biochimica et Biophysica Sinica* en 2020, propuso que el gen Nkx2.1 desempeña un papel importante en el desarrollo del cerebro de los ratones al regular la cascada de señalización de Shh.
Este artículo, publicado en Toxicology and Industrial Health (2023), propone que el bisfenol A, una sustancia química ambiental, desencadena neurotoxicidad en las células Neuro-2a y altera su función sináptica y citoesquelética.
Este artículo, publicado en la revista Pharmaceuticals (2021), propone que un fármaco, la hexarelina, modula las cascadas de PI3K/AKT y MAPK en las células de neuroblastoma (Neuro-2a) e inhibe la apoptosis de las células Neuro-2a inducida por el peróxido de hidrógeno.
Este artículo de investigación publicado en Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) propone que el extracto etanólico de la fruta de Emblica officinalis suprime la neuroinflamación en las células Neuro-2a y, por lo tanto, puede ser beneficioso para las enfermedades neuroinflamatorias.
Recursos para las células Neuro-2a: protocolos, videos y más
A continuación se presentan los recursos en línea disponibles sobre las células Neuro-2a. Incluyen el protocolo de cultivo y transfección de células Neuro-2a.
- Protocolo de transfección de Neuro-2a: Neuro-2a es un huésped adecuado para la transfección. Este enlace te guiará sobre el protocolo de transfección de esta línea celular. La eficiencia de la transfección de Neuro-2a varía según el reactivo utilizado.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo de células Neuro-2a.
- Protocolo de cultivo de células Neuro-2a: Este enlace te ayudará a conocer el protocolo de subcultivo de las células Neuro-2a.
- Células Neuro-2a: El sitio web contiene información exhaustiva sobre los medios de cultivo de las células Neuro-2a, la densidad de siembra y los protocolos para el subcultivo y el manejo de cultivos criopreservados y proliferativos.
Referencias
- Lulevich, V., et al., La mecánica de célula única ofrece un método sensible y cuantitativo para estudiar las interacciones entre el péptido beta-amiloide y las células neuronales. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
- You, Q., et al., Papel del miR-124 en la regulación de la diferenciación de las células Neuro-2A inducida por el ácido retinoico. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
- Su, X., et al., El receptor gamma del ácido retinoico es diana del microARN-124 e inhibe el crecimiento de las neuritas. Neuropharmacology, 2020. 163: p. 107657.
- Yin, Z., et al., La exposición al bisfenol A indujo neurotoxicidad y se asoció con las sinapsis y el citoesqueleto en las células Neuro-2A. Toxicology in Vitro, 2020. 67: p. 104911.
- Chen, L., et al., El extracto de Ginkgo biloba (EGb) inhibe el estrés oxidativo en células Neuro-2A que sobreexpresan APPsw. BioMed Research International, 2019. 2019.