Línea celular MRC-5: fibroblastos pulmonares fetales humanos en la investigación viral

Las células MRC-5 son una línea celular diploide humana ampliamente utilizada en la producción de vacunas virales, incluidas las de la hepatitis A, la poliomielitis y la rabia, así como con fines de investigación en el campo biomédico. Son una herramienta indispensable para el estudio de las infecciones y enfermedades virales y tienen aplicaciones significativas en la selección de fármacos y las pruebas de eficacia. Este artículo exhaustivo te brindará información esencial sobre la línea celular diploide humana MRC-5 para facilitar tu investigación.

Características generales y origen de las células MRC-5

Comprender el origen y las características generales de una línea celular es fundamental al considerar su aplicabilidad en la investigación. Esta sección profundiza en las características fibroblásticas y el origen de las células MRC-5. Aprenderás sobre:

• Origen: Estas células primarias fueron desarrolladas en 1966 por J.P. Jacobs a partir del tejido pulmonar de un feto varón caucásico de 14 semanas de gestación, y no en 1996 como se había indicado anteriormente.
• Morfología de las células MRC-5: Las células MRC-5 presentan una morfología similar a la de los fibroblastos.
• Diámetro celular: El diámetro de una célula MRC-5 es de aproximadamente 18 μm.
• Cariotipo: Las células MRC-5 tienen un cariotipo diploide normal, con un número modal de cromosomas de 46, típico de una línea celular humana normal.

Pautas para el cultivo de la línea celular MRC-5

Para cultivar de manera eficiente la línea celular MRC-5 es necesario comprender a fondo sus requisitos específicos. A continuación se presentan los puntos esenciales que se deben considerar para un cultivo exitoso:

• Tiempo de duplicación: La línea celular MRC-5 tiene un tiempo de duplicación de aproximadamente 45 horas. Dependiendo de las condiciones de cultivo, este puede variar entre 35 y 45 horas.

• Naturaleza adherente: Las células fetales MRC-5 son adherentes, por lo que requieren adherirse a una superficie para crecer, lo cual es típico de las células fibroblásticas.

• Densidad celular óptima: Para la siembra, se recomienda una densidad óptima de 1 x 10⁴ células/cm². El proceso de pasaje consiste en lavar las células adherentes con PBS, tratarlas con Accutase durante 8 a 10 minutos para desprenderse y, a continuación, centrifugarlas. Luego, el sedimento celular se resuspende en medio de crecimiento y se transfiere a nuevos frascos para continuar el cultivo.

• Medio de crecimiento: El medio de crecimiento recomendado para las células MRC-5 es EMEM, suplementado con 10 % de suero fetal bovino, 2,2 g/L de NaHCO₃, 2 mM de L-glutamina y la solución salina equilibrada de Earle (EBSS).

• Condiciones de cultivo: Mantenga los cultivos en una incubadora humidificada a 37 °C con un 5 % de CO₂ para simular las condiciones fisiológicas.

• Condiciones de almacenamiento: Para el almacenamiento a largo plazo, las células MRC-5 deben conservarse en la fase de vapor de nitrógeno líquido o a temperaturas inferiores a -150 °C.

• Congelación y descongelación: Utilice el medio de congelación CM-1 o CM-ACF, aplicando un método de congelación lenta para preservar la viabilidad celular. Para la descongelación, caliente las células en un baño de agua a 37 °C hasta que quede un pequeño trozo de hielo; luego, transfiéralas a un medio fresco y centrifúgelas para eliminar el agente crioprotector. Resuspender las células en medio de crecimiento fresco antes de sembrarlas en nuevos recipientes de cultivo.

• Nivel de bioseguridad: La manipulación y el mantenimiento de los cultivos de MRC-5 requieren un laboratorio de nivel de bioseguridad 1, lo que garantiza el cumplimiento de los protocolos de seguridad.

Estas pautas están diseñadas para ayudar a los investigadores a mantener la línea celular MRC-5 en condiciones óptimas, lo que facilita la obtención de resultados confiables y reproducibles en sus investigaciones científicas.

Publicado: 2023 | Última revisión: mayo de 2026

Línea celular MRC-5: ventajas y limitaciones

Al igual que otras líneas celulares, las células diploides humanas MRC-5 tienen muchas ventajas y desventajas. En esta sección, repasaremos algunas de las más destacadas que pueden ayudarte a decidir si utilizarlas en tu investigación.

Ventajas

Las principales ventajas de las células MRC-5 son:

• Línea celular normal derivada de humanos

  Las células fetales MRC-5 se derivan de tejido pulmonar humano normal, lo que las convierte en una herramienta valiosa para los investigadores que estudian enfermedades específicas del ser humano. Al ser una línea celular diploide normal, imita fielmente la fisiología y las respuestas de las células humanas, ofreciendo un modelo más preciso para la investigación biomédica y farmacéutica en comparación con las líneas celulares cancerosas o transformadas.

• Susceptibilidad a los virus

  Las células fibroblásticas MRC-5 presentan una alta susceptibilidad a varios virus humanos, incluidos los que causan infecciones respiratorias y enfermedades como la influenza y los coronavirus. Esta característica las hace particularmente útiles para estudiar la patogénesis viral, evaluar fármacos antivirales y desarrollar vacunas contra virus. La capacidad de las células MRC-5 para permitir una replicación viral eficiente permite a los investigadores comprender los mecanismos subyacentes a las infecciones virales y evaluar la eficacia de posibles tratamientos.

Limitaciones

Vida útil limitada: A pesar de su utilidad, la línea celular de fibroblastos MRC-5 tiene una vida útil limitada in vitro. Por lo general, experimentan entre 42 y 46 duplicaciones de población antes de entrar en un estado de senescencia replicativa. Esta capacidad replicativa limitada representa un desafío para los experimentos a largo plazo que requieren un cultivo celular continuo. Los investigadores deben considerar cuidadosamente la duración de sus experimentos y planificarlos en consecuencia para evitar problemas relacionados con las alteraciones en el comportamiento celular inducidas por la senescencia. Además, la vida útil limitada de las células MRC-5 requiere un reabastecimiento periódico con células recién cultivadas, lo que puede afectar la consistencia y la reproducibilidad de los experimentos.

Aplicaciones de las células MRC-5 en la investigación

Avances en la investigación antiviral y el desarrollo de vacunas utilizando células MRC-5

Las células MRC-5, que provienen del tejido pulmonar de un feto abortado de 14 semanas de gestación, se han convertido en una piedra angular en el campo de la investigación antiviral y el desarrollo de vacunas. Estas cepas celulares diploides son fundamentales para la producción de la vacuna contra el virus de la rubéola y la vacuna Sabin contra el poliovirus. El hecho de que provengan de tejido humano convierte a las células MRC-5 en un modelo excepcional para estudiar comportamientos virales, como la replicación del poliovirus, los mecanismos de amplificación del SARS-CoV y la generación del virus del herpes simple en entornos de laboratorio.

La susceptibilidad de estas células a diversos virus ha agilizado el proceso de desarrollo de vacunas, al proporcionar un sustrato celular confiable para la replicación de virus, como los que causan el sarampión y la rubéola. La naturaleza no cancerosa de las células MRC-5 es vital para garantizar la seguridad de las vacunas, ya que proporciona una respuesta indicativa de lo que ocurriría en las células humanas.

La investigación con células MRC-5 ha permitido avances significativos en la comprensión de las infecciones virales y en la mejora de las vacunas. Un estudio de 2021, por ejemplo, demostró que la escala de producción del virus de la rabia podía aumentarse al suprimir proteínas celulares específicas con inhibidores de interferón, lo que condujo a un mayor rendimiento viral [3]. Además, un estudio de 2019 que examinó la respuesta de las células MRC-5 a la infección por el virus de la rabia destacó el potencial de los exosomas, el miR-423-5p y la vía de señalización del interferón (tipo I) como dianas para mejorar la producción de la vacuna contra la rabia [4].

Las células MRC-5 en la terapia celular y la investigación de enfermedades

Las células MRC-5 también desempeñan un papel fundamental en el ámbito de la terapia celular. Su comparación con las células estromales mesenquimales del cordón umbilical, especialmente en términos de potencial de diferenciación, ha despertado un gran interés por su uso en aplicaciones terapéuticas. Las declaraciones de posición sobre la terapia celular han reconocido el potencial terapéutico de estas células para el tratamiento de diversas afecciones. Por ejemplo, son prometedoras para modular las respuestas del sistema inmunológico en enfermedades como la esclerosis múltiple y para potenciar la actividad de los potenciadores de megacariocitos, lo cual es importante para la producción de plaquetas.

Además de sus aplicaciones terapéuticas, las células MRC-5 han enriquecido el campo de la investigación de enfermedades, particularmente en la comprensión de terapias virales y productos antiprotozoarios. Como línea celular refractaria, las células MRC-5 tienen una vida útil limitada, pero sus contribuciones a la investigación médica son sustanciales. Son fundamentales para el descubrimiento de agentes antivirales y se utilizan en ensayos de colonias de megacariocitos para avanzar en nuestra comprensión de la formación de plaquetas sanguíneas. El legado perdurable de las células MRC-5 sigue dando forma al panorama de la ciencia médica, mejorando nuestra capacidad para abordar enfermedades y afecciones complejas.

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Publicaciones sobre la línea celular MRC-5

La línea celular MRC-5, un elemento fundamental en la investigación médica, ha sido objeto de diversos estudios importantes. A continuación se presentan algunas publicaciones destacadas que han utilizado esta línea celular en sus investigaciones:

• Determinación del circovirus porcino en células diploides humanas 2BS y MRC-5 para la producción
  de vacunas. Publicada en la revista Chinese Journal of Biologicals en 2019, esta investigación analizó la presencia de los tipos I y II del circovirus porcino en las líneas celulares diploides humanas 2BS y MRC-5, destacando sus implicaciones para el desarrollo de vacunas.

• La inhibición de circ-UQCRC2 atenuó el daño inducido por lipopolisacáridos en células MRC-5 a través de la vía
  miR-326/PDCD4/NF-κB. En este artículo de 2021 publicado en *International Immunopharmacology*, los investigadores exploraron cómo la intervención sobre el ARN circular, específicamente el circ-UQCRC2, podría mitigar el daño celular inducido por el lipopolisacárido en las células MRC-5 a través de la vía de señalización miR-326/PDCD4/NF-κB.

• La kurarinona inhibe la infección por HCoV-OC43 al alterar elen las células
  pulmonares humanas MRC-5 Este estudio de 2020, publicado en el Journal of Clinical Medicine, analizó la eficacia terapéutica de la kurarinona contra el coronavirus humano HCoV-OC43 en células MRC-5, lo que subraya el potencial del compuesto para modular.

• El aurapteno tiene actividad antiviral contra el coronavirus humano OC43 en células
  MRC-5. Presentado en la revista *Nutrients* en 2023, esta investigación planteó que el aurapteno exhibe capacidades antivirales contra el coronavirus HCoV-OC43 cuando se prueba en células diploides humanas MRC-5, lo que presenta una nueva vía para las estrategias antivirales.

• Los efectos de los extractos ricos en resveratrol de residuos de poda de Vitis vinifera en las células HeLa, MCF-7 y MRC-5: la interacción
  entre la apoptosis, la autofagia y la necrosis Esta investigación, publicada en la revista *Pharmaceutics* en 2022, examinó el impacto de los extractos ricos en resveratrol de *Vitis vinifera* en tres líneas celulares humanas, incluida la línea MRC-5, lo que proporcionó información sobre las posibles aplicaciones terapéuticas de dichos extractos en el cáncer y otras enfermedades.

Estas publicaciones resaltan la versatilidad de la línea celular MRC-5 para facilitar investigaciones diversas e innovadoras en virología, oncología y otras áreas, lo que contribuye significativamente a nuestra comprensión de las respuestas celulares y los potenciales terapéuticos.

Preguntas frecuentes sobre las células MRC-5

Referencias

1. Yang, X., et al., La inhibición del interferón mejora la producción a escala piloto del virus de la rabia en células diploides humanas MRC-5. Viruses, 2021. 14(1): p. 49.
2. Wang, J., et al., La administración mediada por exosomas de miR-423-5p inducible mejora la resistencia de las células MRC-5 a la infección por el virus de la rabia. International Journal of Molecular Sciences, 2019. 20(7): p. 1537.
3. McKenna, K.C., «El uso de tejido fetal procedente de abortos en vacunas e investigación médica oscurece el valor de toda vida humana». Linacre Q, 2018. 85(1): p. 13-17.
4. Jordan, I. y V. Sandig, «Matriz y entre bastidores: sustratos celulares para vacunas virales». *Viruses*, 2014. 6(4): p. 1672-700.