HT22 เซลล์ไลน์
HT22เป็นสายพันธุ์เซลล์ประสาทของหนูที่ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านประสาทวิทยาศาสตร์ มีคุณค่าในการศึกษาโรคทางระบบประสาทเสื่อมและทดสอบการรักษาหรือบำบัดที่มีศักยภาพในการปกป้องเซลล์ประสาท นอกจากนี้ เซลล์ HT22 ยังไวต่อกลูตาเมต จึงถูกใช้ในการศึกษาความเป็นพิษหรือความเสียหายของเซลล์ประสาทที่เกิดจากกลูตาเมต
บทความนี้เน้นย้ำถึงแง่มุมที่สำคัญของเซลล์ HT22 ที่สามารถช่วยคุณในงานวิจัยของคุณได้ โดยจะกล่าวถึง:
- ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ HT22
- ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ HT22
- ข้อดีและข้อเสียของเซลล์ไลน์ HT22
- การวิจัยการประยุกต์ใช้สายพันธุ์เซลล์ HT22
- สิ่งพิมพ์งานวิจัยที่นำเสนอเซลล์ HT22
- ทรัพยากรสำหรับเซลล์ HT22: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ
1. ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ HT22
ส่วนนี้จะอธิบายถึงที่มาและลักษณะทั่วไปของเซลล์ HT22 การทราบข้อมูลเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์นี้มีความจำเป็นก่อนที่จะเริ่มทำงานกับมัน ในที่นี้ คุณจะได้เรียนรู้: เซลล์ HT22 คืออะไร? รูปร่างของเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 เป็นอย่างไร? ขนาดของเซลล์ HT22 คืออะไร?
HT22 เป็นสายเซลล์ต่อเนื่องที่ได้มาจากบริเวณฮิปโปแคมปัสของสมองหนู เป็นสายย่อยของสายเซลล์ HT-4 พ่อแม่ที่พัฒนาโดยการทำให้เซลล์ประสาทของหนูเป็นอมตะผ่านการใช้แอนติเจน T ของไวรัสโพลิโอมาไวรัสที่ไวต่ออุณหภูมิ (SV40) จากลิง
เซลล์เหล่านี้แตกต่างจากเซลล์ฮิปโปแคมปัสที่เจริญเต็มที่ เนื่องจากขาดตัวรับกลูตาเมตและตัวรับโคลีนเหมือนกับเซลล์ประสาทที่เจริญเต็มที่ซึ่งมีต้นกำเนิดจากฮิปโปแคมปัส ดังนั้น เซลล์เหล่านี้จึงไม่เหมาะสำหรับการศึกษาวิจัยที่เกี่ยวข้องกับหน่วยความจำ [1]
เซลล์ HT22 มีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว
2. ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ HT22
เซลล์ HT22 ถูกใช้ในห้องปฏิบัติการวิจัยทางประสาทวิทยา ก่อนที่จะเพาะเลี้ยงเซลล์เหล่านี้ นักวิจัยจะค้นหาข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่จำเป็นซึ่งทำให้การทำงานของพวกเขาง่ายและมีประสิทธิภาพ ส่วนนี้จะครอบคลุมทุกประเด็นสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 คุณจะทราบ: เวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ HT22 คืออะไร? วิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 คืออะไร? โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 คืออะไร? สารอาหารสำหรับเซลล์ HT22 คืออะไร?
จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22
|
เวลาสองเท่า: |
เวลาการเพิ่มจำนวนเซลล์ HT22 ประมาณ 15 ชั่วโมง |
|
ติดกันหรือแขวนลอย: |
เซลล์ HT22 ติดแน่น |
|
อัตราส่วนการเพาะปลูกย่อย: |
อัตราส่วนการเพาะเลี้ยงย่อยสำหรับเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 คือ 1:3 ถึง 1:6 โดยสังเขป ให้ดูดสื่อออก แล้วล้างเซลล์ที่เกาะติดด้วย 1 x PBS จากนั้นเติมสารละลาย Accutase เพื่อแยกเซลล์ลงในขวดเพาะเลี้ยง แล้วนำไปบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8 ถึง 10 นาที หลังจากนั้นเติมสื่อเพาะเลี้ยงใหม่ แล้วเก็บเซลล์ในหลอดเพื่อนำไปปั่นเหวี่ยงนำก้อนเซลล์ที่ได้มาละลายให้เข้ากันอย่างระมัดระวัง แล้วนำเซลล์ไปหยดลงในขวดเพาะเลี้ยงเพื่อเพิ่มจำนวนเซลล์ |
|
อาหารเลี้ยงเชื้อ: |
DMEM เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่ใช้สำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 โดยเติม FBS 10%, กลูโคส 4.5 กรัม/ลิตร, L-Glutamine 4 มิลลิโมลาร์, NaHCO3 1.5 กรัม/ลิตร และโซเดียมไพรูเวต 1.0 มิลลิโมลาร์ เพื่อการเจริญเติบโตของเซลล์ที่เหมาะสมที่สุด |
|
เงื่อนไขการเจริญเติบโต: |
เซลล์ HT22 ถูกเก็บรักษาไว้ในตู้เพาะเลี้ยงแบบควบคุมความชื้น (อุณหภูมิ 37 °C)พร้อมกับการเติมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% |
|
การเก็บรักษา: |
เซลล์ HT22 ที่ถูกแช่แข็งสามารถเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150 °C ได้ทั้งในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวหรือในตู้แช่แข็งไฟฟ้าอุณหภูมิต่ำพิเศษสำหรับการเก็บรักษาระยะยาว |
|
กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง: |
เซลล์ HT22 สามารถแช่แข็งในสื่อ CM-1 หรือ CM-ACF โดยใช้วิธีแช่แข็งช้า กระบวนการนี้อนุญาตให้ลดอุณหภูมิของตัวอย่างได้เพียง 1 °C ต่อนาที ช่วยปกป้องเซลล์จากการช็อก และช่วยรักษาความมีชีวิตของเซลล์ |
|
กระบวนการละลาย |
เซลล์ถูกละลายน้ำแข็งในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จนกระทั่งเหลือเป็นก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก หลังจากนั้นเติมอาหารเลี้ยงเซลล์ลงในเซลล์ แล้วนำไปปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดส่วนประกอบของอาหารเลี้ยงเซลล์ที่แช่แข็งออก นำตะกอนเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยใหม่ แล้วเทเซลล์ลงในขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์อยู่ จากนั้นนำเซลล์ไปบ่มในตู้บ่มที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง |
|
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ: |
ห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 |
3. ข้อดีและข้อเสียของเซลล์ไลน์ HT22
เซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 มีความเกี่ยวข้องกับข้อดีและข้อเสียบางประการที่ทำให้แตกต่างจากสายพันธุ์เซลล์ประสาทอื่นๆ ข้อดีและข้อเสียที่โดดเด่นบางประการของสายพันธุ์เซลล์นี้ได้กล่าวไว้ที่นี่
ข้อดี
ข้อดีของสายพันธุ์เซลล์ประสาท HT22 murine คือ:
-
อัตราการเติบโตอย่างรวดเร็ว
เซลล์ HT22 มีเวลาการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่า 15 ชั่วโมง ทำให้สามารถทำการทดลองได้อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพ และช่วยให้ได้ผลลัพธ์การวิจัยอย่างทันเวลา
-
การทำให้เป็นอมตะ
HT22 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่คงสภาพความเป็นอมตะ ทำให้สามารถเจริญเติบโตได้อย่างต่อเนื่องเป็นระยะเวลานาน สิ่งนี้ช่วยให้มีเซลล์พร้อมใช้งานอย่างสม่ำเสมอ ลดเวลาและค่าใช้จ่าย และเอื้อต่อการทดลองระยะยาวที่มีผลลัพธ์ที่สอดคล้องกัน
ข้อเสีย
ข้อเสียของเซลล์ HT22 คือ:
-
ต้นกำเนิดจากหนู
เซลล์ไลน์ HT22 ถูกแยกได้จากเนื้อเยื่อฮิปโปแคมปัสของสมองหนู ซึ่งอาจไม่สามารถแสดงถึงความซับซ้อนของสรีรวิทยาและพฤติกรรมของเซลล์ประสาทมนุษย์ได้อย่างสมบูรณ์ ส่งผลให้ข้อจำกัดในการนำไปประยุกต์ใช้ในทางคลินิก
4. วิจัยการประยุกต์ใช้สายพันธุ์เซลล์ HT22
เซลล์ HT22 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านประสาทชีววิทยา การประยุกต์ใช้งานที่น่าสนใจบางประการของสายพันธุ์เซลล์นี้ได้ถูกกล่าวถึงในส่วนนี้ของบทความ:
- การวิจัยทางประสาทวิทยา: เซลล์HT22 ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยโรคความเสื่อมของระบบประสาท เช่น โรคอัลไซเมอร์และโรคพาร์กินสัน เซลล์เหล่านี้ถือเป็นเครื่องมือวิจัยที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาความเป็นพิษต่อระบบประสาทและกลไกความเครียดออกซิเดชันที่เกี่ยวข้องกับโรคเหล่านี้งานวิจัยที่ดำเนินการในปี 2020 พบว่า เส้นทาง PI3K/AKT/CREB มีส่วนเกี่ยวข้องกับความเป็นพิษต่อเซลล์ประสาทที่เกิดจากภาวะน้ำตาลในเลือดสูงในเซลล์ HT22 [2] ในทำนองเดียวกัน งานวิจัยล่าสุดได้เสนอว่า เส้นทาง Nrf2/HO‐1 และแกนสัญญาณ NF-κB มีบทบาทสำคัญในความเป็นพิษของอะไมลอยด์เบต้าต่อเซลล์ HT22 [3]
- การตรวจคัดกรองยา: เซลล์HT22 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการทดสอบและคัดกรองยา พวกมันช่วยให้นักวิจัยสามารถระบุสารที่มีศักยภาพในการรักษาซึ่งแสดงฤทธิ์ปกป้องระบบประสาท เพื่อใช้ในการต่อสู้กับโรคความเสื่อมของระบบประสาทการศึกษาที่ดำเนินการในปี 2019 ได้สำรวจศักยภาพในการปกป้องระบบประสาทของสารประกอบเตตระไฮโดรเคอร์คูมินในเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 ที่ได้รับการรักษาด้วยกลูตาเมต ในที่นี้ กลูตาเมตจะกระตุ้นความเครียดออกซิเดชันในเซลล์ HT22 และทำให้เกิดการตายของเซลล์โดยการกระตุ้นโปรตีนไคเนสที่ถูกกระตุ้นด้วยไมโตเจน [4]
5. สิ่งพิมพ์งานวิจัยที่นำเสนอเซลล์ HT22
นี่คือเอกสารวิจัยที่น่าสนใจซึ่งเกี่ยวข้องกับเซลล์ไลน์ HT22:
การศึกษาในวารสาร International Journal of Molecular Medicine (2019) ได้เสนอศักยภาพในการปกป้องระบบประสาทของโครซิน ซึ่งเป็นสารประกอบที่สกัดได้จาก Crocus sativus L.ในเซลล์ HT22 ที่ได้รับความเสียหายจาก L‑กลูตาเมต
การตีพิมพ์ในวารสาร Neuropharmacology (2018) รายงานว่าอนุพันธ์ออกซินโดลช่วยปกป้องเซลล์ HT22 จากการตายที่เกิดจากภาวะเครียดออกซิเดชัน
จินเสโนไซด์ อาร์บ2 ยับยั้งความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากกลูตาเมตและการตายของเซลล์ประสาทในเซลล์ HT22
งานวิจัยฉบับนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Journal of Ginseng Research ในปี 2019 การศึกษานี้ได้สำรวจผลในการปกป้องระบบประสาทของสารธรรมชาติ กินเซโนไซด์ Rb2 โดยใช้เซลล์ไลน์ HT22 ผลการวิจัยพบว่า กินเซโนไซด์ Rb2 สามารถลดความเครียดออกซิเดชันและการตายของเซลล์ที่เกิดจากกลูตาเมตในเซลล์ฮิปโปแคมปัสของหนู HT22 ได้อย่างมีประสิทธิภาพ
การศึกษาในสาขาพิษวิทยาสิ่งแวดล้อมและความปลอดภัยทางสิ่งแวดล้อม (2021) นี้ได้ประเมินศักยภาพในการเป็นพิษต่อเซลล์ของอนุภาคนาโนเงินในสายพันธุ์เซลล์ HT22
Ferrostatin-1 ปกป้องเซลล์ HT-22 จากความเป็นพิษจากการออกซิเดชัน
บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2020 ในวารสารวิจัยการฟื้นฟูระบบประสาท โดยเสนอว่า ferrostatin-1 ซึ่งเป็นตัวยับยั้งกระบวนการ ferroptosis สามารถป้องกันความเป็นพิษจากออกซิเดชันในเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 ได้
6. ทรัพยากรสำหรับเซลล์ HT22: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ
แหล่งข้อมูลออนไลน์บางแห่งเกี่ยวกับเซลล์ HT22 อธิบายขั้นตอนการถ่ายโอนยีน การเปลี่ยนแปลงลักษณะเฉพาะ และการเพาะเลี้ยงเซลล์:
- การถ่ายยีน HT22: เอกสารนี้ ประกอบด้วยโปรโตคอลที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมสำหรับการถ่ายยีน HT22 ในจานเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ 24 หลุมและ 96 หลุม
- การแยกเซลล์ HT22:บทความนี้จะให้คำแนะนำอย่างครอบคลุมเกี่ยวกับโปรโตคอลการแยกเซลล์ HT22
ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22:
- การเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22: ลิงก์นี้จะช่วยให้คุณ เรียนรู้ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 นอกจากนี้ยังช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนการเหนี่ยวนำให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์ประสาทในเซลล์
- HT22 hippocampal cells:เว็บไซต์นี้มีข้อมูลที่เป็นประโยชน์มากมายเกี่ยวกับเวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ HT22, สื่อ, และโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์
เอกสารอ้างอิง
- เขา, เอ็ม., และคณะ,การเปลี่ยนแปลงลักษณะเฉพาะทำให้เซลล์ประสาท HT22 มีความไวต่อพิษจากภาวะกระตุ้นเกิน.วารสารวิจัยการฟื้นฟูระบบประสาท, 2013.8(14): หน้า 1297-306.
- จาง, เอส., และคณะ,ฟิเซตินป้องกันเซลล์ HT22 จากความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจากน้ำตาลกลูโคสสูงผ่านเส้นทางสัญญาณ PI3K/Akt/CREB.Frontiers in Neuroscience, 2020.14: หน้า 241.
- จาง, อาร์.-แอล., และคณะ,ผลการป้องกันของเบอร์เบอรีนต่อความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจาก β-amyloid ในเซลล์ HT22 ผ่านเส้นทาง Nrf2/HO‐1.ชีวเคมีเชิงอินทรีย์, 2023.133: หน้า 106-210.
- Park, C.-H., et al.,ฤทธิ์ปกป้องระบบประสาทของเตตระไฮโดรเคอร์คูมินต่อการเกิดความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากกลูตาเมตในเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22.Molecules, 2019.25(1): หน้า 144.
