เซลล์ AGS - การสำรวจเซลล์ AGS ของมะเร็งต่อมน้ำเหลืองในกระเพาะอาหารในงานวิจัยมะเร็ง
เซลล์AGSเป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองของกระเพาะอาหารในมนุษย์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวการแพทย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งใช้ในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระเพาะอาหาร รวมถึงการเจริญเติบโต การพัฒนา การลุกลาม และการแทรกแซงทางการรักษา นอกจากนี้ยังใช้ในการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรค
บทความนี้จะกล่าวถึงพื้นฐานของเซลล์เยื่อบุกระเพาะอาหารชนิด AGS โดยเฉพาะจะครอบคลุม:
- ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ AGS
- การเพาะเลี้ยงข้อมูลเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ AGS
- สายเซลล์ AGS: ข้อดีและข้อจำกัด
- การประยุกต์ใช้เซลล์ AGS
- การตีพิมพ์งานวิจัยเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ AGS
- ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ AGS: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ
1. ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ AGS
การรู้เกี่ยวกับต้นกำเนิดและลักษณะทั่วไปของสายพันธุ์เซลล์เป็นสิ่งจำเป็นก่อนที่คุณจะเริ่มทำงานกับมัน ส่วนนี้จะครอบคลุมถึง: เซลล์ AGS คืออะไร? ต้นกำเนิดของเซลล์ AGS คืออะไร? ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของสายพันธุ์เซลล์มะเร็ง AGS คืออะไร?
- เซลล์ไลน์ AGS ได้มาจากเนื้อเยื่อกระเพาะอาหารของหญิงชาวคอเคเชียนอายุ 54 ปีที่เป็นมะเร็งต่อมกระเพาะอาหาร โดยถูกแยกออกมาในปี 1979 [1]
- เซลล์ AGS มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเยื่อบุผิว
- เซลล์เยื่อบุผิวกระเพาะอาหาร AGS มีลักษณะไฮเปอร์ไดพลอยด์ จำนวนโครโมโซมที่เป็นค่าโมดอลของเซลล์ AGS คือ 49 ซึ่งพบในเกือบ 60% ของเซลล์ นอกจากนี้ยังพบภาวะพอลิพลอยด์ในประมาณ 3.6% ของเซลล์
2. การเพาะเลี้ยงข้อมูลเกี่ยวกับสายเซลล์ AGS
สำหรับการจัดการและการดูแลเซลล์ไลน์อย่างถูกต้อง คุณจำเป็นต้องรู้แนวคิดพื้นฐานเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง คุณควรเรียนรู้: เวลาในการเพิ่มจำนวนเซลล์ AGS คืออะไร? สารอาหารที่ใช้เลี้ยงเซลล์ AGS คืออะไร? วิธีการแยกเซลล์ AGS ทำอย่างไร? สารอาหารสำหรับการแช่แข็งเซลล์เยื่อบุกระเพาะอาหาร AGS คืออะไร?
จุดสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS
|
เวลาสองเท่า: |
เวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ AGS อยู่ระหว่าง 24 ถึง 48 ชั่วโมง |
|
ติดกันหรือแขวนลอย: |
เซลล์ AGS เป็นเซลล์ที่เกาะติดกัน พวกมันเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียว |
|
ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด: |
เซลล์ AGS ถูกเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่นของเซลล์ 1 x104เซลล์/ซม.2 เซลล์จะสร้างชั้นเดียวที่หนาแน่นเต็มที่ใน 3 ถึง 5 วัน หลังจากนำสื่อเก่าออก เซลล์จะถูกล้างด้วย 1 x PBS และบ่มด้วยสารละลายการแยก Accutaseเซลล์ที่แยกตัวแล้วถูกนำไปแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเซลล์และปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่ตกตะกอนถูกแขวนลอยอีกครั้ง และหลังจากนับจำนวนเซลล์ AGS แล้ว จึงนำไปแบ่งใส่ขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่เพื่อเพาะเลี้ยงต่อไป |
|
อาหารเลี้ยงเชื้อ: |
ใช้สื่ออาหารเลี้ยงเซลล์ DMEM ที่มี FBS 10%, L-Glutamine 4 มิลลิโมลาร์, กลูโคส 4.5 กรัม/ลิตร, NaHCO3 1.5 กรัม/ลิตร และโซเดียมไพรูเวต 1.0 มิลลิโมลาร์ สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS ควรเปลี่ยนสื่ออาหารสัปดาห์ละ 2 ถึง 3 ครั้ง |
|
เงื่อนไขการเจริญเติบโต: |
เซลล์ AGS ถูกเก็บไว้ในตู้เพาะเลี้ยงแบบควบคุมความชื้น (ที่อุณหภูมิ 37°C) พร้อมกับการจ่ายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% |
|
การเก็บรักษา: |
เซลล์ AGS ที่ถูกแช่แข็งจะถูกเก็บไว้ในตู้แช่เย็นไฟฟ้าที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C หรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวเป็นเวลานาน |
|
กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง: |
CM-1 หรือ CM-ACF medium ใช้สำหรับการแช่แข็งเซลล์ AGS การแช่แข็งเซลล์ดำเนินการผ่านกระบวนการแช่แข็งช้าที่อนุญาตให้อุณหภูมิลดลงเพียง 1°C ต่อนาที และช่วยปกป้องความมีชีวิตของเซลล์ |
|
กระบวนการละลาย |
เซลล์เยื่อบุผิวของกระเพาะอาหารที่ถูกแช่แข็งจะถูกเขย่าอย่างรวดเร็วในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที เซลล์ที่ละลายแล้วจะถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และเทลงในขวดเลี้ยงเชื้อใหม่เพื่อการเจริญเติบโตหลังจากบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สารอาหารจะถูกเปลี่ยนใหม่เพื่อกำจัดส่วนประกอบของสารอาหารแช่แข็ง ตรงกันข้ามกับนี้ เซลล์ที่ละลายแล้วจะถูกปั่นเหวี่ยง และส่วนประกอบของสารอาหารแช่แข็งจะถูกกำจัดออก จากนั้นเซลล์ที่เก็บเกี่ยวแล้วจะถูกแขวนลอยอีกครั้งและถูกแจกจ่ายลงในขวดเพาะเลี้ยงที่มีสารอาหารเพาะเลี้ยงอยู่ |
|
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ: |
ห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 2 มีความจำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS |
3. สายเซลล์ AGS: ข้อได้เปรียบ & ข้อจำกัด
บทความส่วนนี้จะอธิบายถึงข้อได้เปรียบและข้อจำกัดที่สำคัญบางประการที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ AGS
ข้อดี
ข้อดีหลักของเซลล์เยื่อบุผิวกระเพาะอาหาร AGS คือ:
|
เพาะเลี้ยงง่าย |
สายพันธุ์เซลล์มะเร็งกระเพาะอาหาร AGS สามารถดูแลรักษาได้ง่ายในห้องปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเซลล์ ไม่มีความต้องการในการเพาะเลี้ยงที่ซับซ้อนหรือยุ่งยาก นอกจากนี้ยังมีลักษณะการเจริญเติบโตที่ดี ทำให้เป็นตัวเลือกที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระเพาะอาหาร |
|
ความเกี่ยวข้องกับมะเร็งกระเพาะอาหาร |
เซลล์ AGS ได้ถูกแยกออกมาจากมะเร็งกระเพาะอาหารชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาของมนุษย์ ทำให้เซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระเพาะอาหารและการรักษา |
ข้อจำกัด
ข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับสายเซลล์ AGS คือ:
|
แบบจำลองเซลล์ในหลอดทดลอง |
เซลล์ AGS ถูกเพาะเลี้ยงในห้องปฏิบัติการวิจัยทางชีวการแพทย์ภายใต้สภาวะเทียม ดังนั้นเซลล์เหล่านี้อาจไม่สามารถจำลองสภาพแวดล้อมจุลภาคของมะเร็งกระเพาะอาหารในร่างกายได้อย่างสมบูรณ์ รวมถึงการปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์และระดับโมเลกุลอื่นๆ |
4. การประยุกต์ใช้เซลล์ AGS
เซลล์ AGS ถูกนำมาใช้โดยเฉพาะในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระเพาะอาหาร นอกจากนี้ยังมีศักยภาพในการประยุกต์ใช้ในด้านชีวการแพทย์อื่น ๆ อีกมากมาย งานวิจัยที่น่าสนใจบางประการที่ใช้เซลล์ AGS ได้แก่:
- การศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งกระเพาะอาหาร: เซลล์AGS เป็นเครื่องมือวิจัยที่ยอดเยี่ยมในการศึกษาเซลล์และกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเจริญเติบโต การแพร่กระจาย และการรุกรานของมะเร็งกระเพาะอาหาร นักวิจัยยังใช้เซลล์เยื่อบุกระเพาะอาหาร AGS เพื่อศึกษาขั้นตอนต่างๆ ของเซลล์ การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรม และเส้นทางการส่งสัญญาณในการพัฒนาของมะเร็งกระเพาะอาหารการศึกษาของ Oncology Reports (2019) พบว่า microRNA-183-5p.1 ส่งเสริมการเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และการรุกรานของเซลล์มะเร็งโดยการยับยั้งกระบวนการส่งสัญญาณ Bcl 2/P53 นอกจากนี้ยังลดการแสดงออกของยีน TPM1 เพื่อสร้างผลกระทบเหล่านี้ ดังนั้น microRNA และ TPM1 จึงถูกเสนอให้เป็นเป้าหมายโมเลกุลที่มีประสิทธิภาพสำหรับการพัฒนาวิธีการรักษาแบบมุ่งเป้าสำหรับมะเร็งกระเพาะอาหาร [2]
- การคัดกรองยา: เซลล์AGS ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการคัดกรองยาต้านมะเร็งกระเพาะอาหารชนิดใหม่และมีประสิทธิภาพ นักวิจัยประเมินความเป็นพิษต่อเซลล์และประสิทธิผลของยาที่มีศักยภาพโดยใช้สายพันธุ์เซลล์ AGS นอกจากนี้ยังมีการศึกษาเพื่อระบุเป้าหมายโมเลกุลใหม่และพัฒนาวิธีการรักษาแบบมุ่งเป้าเพื่อต่อสู้กับมะเร็งกระเพาะอาหารการวิจัยที่ดำเนินการในปี 2021 ได้ใช้เซลล์มะเร็งกระเพาะอาหาร AGS และศึกษาผลทางบำบัดของยา paclitaxel ผลการวิจัยพบว่า paclitaxel กระตุ้นให้เกิดภาวะวิกฤตไมโทติก ซึ่งเป็นกลไกสำคัญของการเกิดอะพอพโทซิสหรือการตายของเซลล์ในเซลล์ AGS นอกจากนี้ ยังส่งเสริมกระบวนการออโตฟาจีในเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหารอีกด้วย [3]
- ปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อก่อโรค: สายพันธุ์เซลล์ มะเร็ง AGS ยังศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อก่อโรคด้วย ซึ่งช่วยให้นักวิจัยเข้าใจกลไกและปฏิกิริยาของเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อ เช่น การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2020 พบว่า RNA ที่ไม่เข้ารหัสขนาดเล็กซึ่งมีอยู่ในถุงหุ้มเยื่อหุ้มเซลล์ภายนอกของHelicobacter pylori ลดการหลั่ง อินเตอร์ลิวคิน 8 ในเซลล์ AGS ของมนุษย์ [4]
5. สิ่งพิมพ์งานวิจัยเกี่ยวกับสายเซลล์ AGS
ส่วนนี้จะครอบคลุมบทความวิจัยที่น่าสนใจและได้รับการอ้างอิงมากที่สุดซึ่งเกี่ยวข้องกับเซลล์ AGS
การศึกษานี้ในวารสาร Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) เสนอว่าซาลิโดไรด์ ซึ่งเป็นสารประกอบธรรมชาติ สามารถกระตุ้นการเกิดออโตฟาจีแบบป้องกันและการตายของเซลล์ในเซลล์เยื่อบุกระเพาะอาหาร AGS ผ่านการปรับเปลี่ยนเส้นทางสัญญาณ PI3K/AKT/mTOR
การศึกษานี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Biomedicine & Pharmacotherapy (2018) โดยมุ่งศึกษาผลเสริมฤทธิ์กันในการต้านมะเร็งของโพลีแซ็กคาไรด์จากโสมเหลืองร่วมกับยาอะพาทินิบในเซลล์ AGS ผลการศึกษาพบว่าโสมเหลืองช่วยเพิ่มฤทธิ์ต้านเนื้องอกของอะพาทินิบผ่านการยับยั้งสัญญาณ AKT
งานวิจัยในวารสาร Journal of Ethnopharmacology (2018) ได้เสนอว่า curcuzedoalide ซึ่งเป็นสารประกอบธรรมชาติจากพืช Curcuma zedoaria Roscoe มีส่วนช่วยในศักยภาพความเป็นพิษต่อเซลล์ของเซลล์ AGS
การตีพิมพ์ในวารสาร Gene (2018) เสนอว่า การเพิ่มขึ้นของ FOXA1 ช่วยยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในกระเพาะอาหารชนิด AGS และการเปลี่ยนแปลงของเซลล์จากเยื่อบุผิวไปเป็นเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (EMT) และการรุกราน
บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสารนานาชาติด้านจุลชีววิทยาการแพทย์ในปี 2020 ในการศึกษานี้ ได้ใช้เซลล์ AGS เพื่อศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อก่อโรค ผลการวิจัยพบว่า Helicobacter pylori มี RNA ที่ไม่เข้ารหัสบางส่วนในถุงเยื่อหุ้มเซลล์ภายนอกซึ่งส่งผลต่อระดับ IL-8 ในเซลล์ AGS
6. ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ AGS: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่นๆ
ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลบางส่วนที่มีเซลล์ AGS
- โปรโตคอลการถ่ายโอนเซลล์ AGS:วิดีโอนี้ เป็นคู่มือแบบทีละขั้นตอนสำหรับการเรียนรู้โปรโตคอลการถ่ายโอนสำหรับเซลล์เยื่อบุผิวกระเพาะอาหาร AGS
ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS
- โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS:เว็บไซต์นี้มีข้อมูล ที่เป็นประโยชน์เกี่ยวกับอาหารเลี้ยงเซลล์ AGS และโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ โดยสรุปแล้ว เว็บไซต์นี้มีโปรโตคอลสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์เยื่อบุผิวกระเพาะอาหาร AGS และการจัดการเซลล์ AGS ที่กำลังเพิ่มจำนวนและเซลล์ AGS ที่ถูกแช่แข็ง
- การเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS ในอาหารเลี้ยงเชื้อ:เว็บไซต์นี้จะอธิบายขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS ในอาหารเลี้ยงเชื้ออย่างละเอียด
เอกสารอ้างอิง
- Phuc, B.H., และคณะ,การเปรียบเทียบจีโนมของเชื้อ Helicobacter pylori สองสายพันธุ์จากเวียดนาม, CHC155 จากผู้ป่วยมะเร็งกระเพาะอาหารที่ไม่ใช่บริเวณคอหอยและ VN1291 จากผู้ป่วยแผลในกระเพาะอาหารส่วนต้น.รายงานทางวิทยาศาสตร์, 2023.13(1): หน้า 8869.
- Lin, J., และคณะ,miRNA‑183‑5p. 1 ส่งเสริมการเคลื่อนที่และการรุกรานของเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหาร AGS โดยมุ่งเป้าไปที่ TPM1 การแก้ไขใน/10.3892/or. 2020.7902.Oncology reports, 2019.42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al.,ผลของแพคลิแทกเซลต่อการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส, อัตโนมัติ และการล่มสลายของไมโทซิสในเซลล์ AGS.รายงานทางวิทยาศาสตร์, 2021.11(1): หน้า 23490.
- จาง, เอช., และคณะ,sncRNAs ที่บรรจุอยู่ในถุงหุ้มเยื่อหุ้มเซลล์ชั้นนอกของ Helicobacter pylori ลดการหลั่ง IL-8 ในเซลล์มนุษย์.วารสารนานาชาติด้านจุลชีววิทยาการแพทย์, 2020.310(1): หน้า 151356.