celice imWilms1

800,00 €*

Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 ⁶ celic za adhezivne linije ali 5 × 10⁶ celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300412

Varnostni list

List izdelka

Potrdilo o analizi (CoA)

Sporazum o prenosu materiala

Opis	Celična linija Wilms1 je bila prvotno pridobljena iz primarnega Wilmsovega tumorja, ki je bil pridobljen od bolnika z velikimi obojestranskimi tumorji ledvic, kar je značilna oblika Wilmsovega tumorja (nefroblastoma). Ta celična linija ima homozigotno nesmiselno mutacijo v genu WT1 (c.149 C>A, p.S50X), ki povzroča nastajanje skrajšanega, nefunkcionalnega proteina WT1. Gen WT1 je ključnega pomena za razvoj ledvic, njegova mutacija pa je tesno povezana s patogenezo Wilmsovega tumorja, zlasti pri tumorjih s stromalno diferenciacijo. Celice Wilms1 imajo stabilen kariotip brez večjih kromosomskih nepravilnosti, zanje je značilen mezenhimski fenotip, saj izražajo vimentin, nimajo pa epitelijskih označevalcev, kot je citokeratin. Linija kaže omejeno, vendar pomembno sposobnost mezenhimske diferenciacije, vključno z možnostjo diferenciacije v mišične celice pod posebnimi pogoji, zaradi česar je ključni model za preučevanje molekularnih posledic mutacij WT1. Da bi premagali omejeno življenjsko dobo primarnih celic Wilms1, je bila celična linija imWilms1 vzpostavljena z vnosom trojnega mutiranega antigena SV40 velikega T (U19dl89-97tsA58) v prvotne tumorske celice, kar je omogočilo njihovo nesmrtnost. Ta modifikacija omogoča celicam imWilms1 neomejeno razmnoževanje ob ohranjanju kromosomske stabilnosti, s tem pa ponuja zanesljiv model za dolgoročne študije. Imortalizirane celice imWilms1 še naprej kažejo isto mutacijo WT1 in ohranjajo mezenhimske značilnosti starševske linije Wilms1. Poleg genetskih in fenotipskih značilnosti je bila celična linija imWilms1 obsežno analizirana glede aktivnosti signalnih poti. Proteomske študije so razkrile fosforilacijo in aktivacijo več receptorskih tirozin kinaz (RTK), vključno z EGFR, PDGFRβ in AXL, z nadaljnjo aktivacijo signalnih poti MAPK. Dosledna aktivacija teh poti v celicah imWilms1 poudarja njihov pomen za raziskovanje ciljnih terapevtskih strategij pri tumorju Wilms. Na splošno je imWilms1 zanesljiv in dolgoročen model za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki so podlaga za razvoj in napredovanje tumorja Wilms, zlasti tistih, ki so posledica mutacij WT1 in aberantnih signalnih poti.
Organizem	Človek
Tkivo	Ledvice
Bolezen	Wilmsov tumor
Sinonimi	IM-WT-1

Starost	10 mesecev
Spol	Ženske
Etnična pripadnost	Kavkaški
Morfologija	Vretenasta oblika
Vrsta celice	Wilmsove celice
Lastnosti rasti	Pripadajoče

Citiranje	imWilms1 (Cytionova kataloška številka 300412)
Raven biološke varnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SN
Status GSO	GMO-S1: Ta linija človeškega Wilmsovega tumorja imWilms1 vsebuje trojno mutantno kaseto SV40 T-antigen, ki omogoča pogojno imortalizacijo za raziskave nefroblastoma. Ta razvrstitev velja samo v Nemčiji in se lahko drugje razlikuje.

Mutacijski profil	Status mutacije WT1: homozigotna c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, status mutacije CTNNB1: heterozigotna TCT>TTT, p.S45F

Medij za gojenje	Komplet MSCGM (Lonza)
Reagent za disociacijo	Accutase
Subkultiviranje	Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočin	1 do 2-krat na teden
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Prevleka za bučke	Nič
Postopek zamrzovanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Sterilnost	Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence. Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
Aleli HLA	A: '03:01:01, '24:02:01 B: '35:03:01, '38:01:01 C: '12:03:01 DRB1: '07:01:01, '14:54:01 DQA1: '01:04:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:03:01 DPB1*: '02:01:02G, '04:02:01G E: '01:03:01, '01:03:02

Številka parcele	Vrsta potrdila	Datum	Kataloška številka
300412-221	Potrdilo o analizi	23. May. 2025	300412
300412-030624	Potrdilo o analizi	18. Aug. 2025	300412

Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.

Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.

Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.

celice imWilms1

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Nadzor kakovosti / Genetski profil / HLA

Potrdilo o analizi (CoA)

Sporazum o prenosu materiala