Celice SW-620 – vpliv na raziskave in eksperimente na področju raka debelega črevesa
Celice SW-620 predstavljajo človeško celično linijo raka debelega črevesa v Dukesovi stopnji C. Imajo visok tumorigeni in metastatični potencial. Zato se široko uporabljajo v raziskavah raka in toksikologiji. Ta članek bo raziskal temeljne vidike celične linije raka debelega črevesa SW-620.
- Rastno gojišče
- Za idealno rast celic SW-620 se uporablja gojišče DMEM, dopolnjeno z 10 % fetalnega govejega seruma, 4,5 g/l glukoze, 4 mM L-glutamina, 1,5 g/l NaHCO3 in 1,0 mM natrijevega piruvata. Medij je treba zamenjati dvakrat na teden.
- Čas podvojitve
- Čas podvojitve celic SW-620 znaša od 20 do 26 ur.
- Vrsta rasti
- Celična linija SW-620 je adhezivna. Celice tvorijo monosloje na površini kultivacijskega posoda.
- Raven biološke varnosti
- BSL-1
- Na voljo pri
- Cytion — Naročite SW-620
Poreklo in splošne značilnosti celic SW-620
Poreklo in splošne značilnosti so najpomembnejše informacije o celični liniji. Predhodno poznavanje teh podatkov je bistveno za raziskovalce, ki razmišljajo o vključitvi te celične linije v svoje raziskovalno delo. V tem delu članka bomo pojasnili ključne značilnosti in poreklo celične linije SW-620. Predvsem boste izvedeli: Kaj je celična linija SW-620? Kakšne so značilnosti celične linije SW-620? Kakšen je izvor celične linije SW-620? Kakšna je velikost celic SW-640? In kakšna je razlika med celičnima linijama SW-620 in SW-480?
- SW-620, celična linija kolorektalnega karcinoma, izvira iz mediatizirane lezije limfne bezgavke 51-letnega belca z adenokarcinomom debelega črevesa [1]. To celično linijo so deponirali A. Leibovitz in sodelavci.
- Celice SW-620 imajo epitelijsko morfologijo. Sestavljene so iz majhnih okroglih in bipolarnih celic, ki ustrezajo mikrovilam.
- Premer celic SW-620 je 14,4 ± 0,3 μm.
- Te celice raka debelega črevesa imajo hiperdiploidni kariotip. Modalno število kromosomov za celice SW-620 je 50, kar se lahko giblje od 45 do 53.
SW-480 v primerjavi s SW-620
SW-480 in SW-620 sta celični liniji raka debelega črevesa. SW-480 izhaja iz primarnega tumorja, medtem ko je bila SW-620 vzpostavljena iz metastaziranega limfnega vozla. Poleg tega se ksenotransplantati, razviti iz teh celičnih linij, med seboj razlikujejo. Ksenotransplantati SW-620 tvorijo plasti tumorskih celic, medtem ko ksenotransplantati SW-480 tvorijo žlezaste strukture [2]. Obe celični liniji imata identične mutacijske profile.
Celice SW-620: Navodila za gojenje
Razumevanje osnovnih konceptov gojenja celične linije je nujno, saj omogoča ustrezno ravnanje in vzdrževanje. V tem poglavju so navedene nekatere ključne točke za gojenje celic SW-620, ki vam lahko pomagajo pri razumevanju: Kaj je gojišče za celice SW-620? Kakšen je čas podvojitve celic SW-620? Kako gojiti celice SW-620?
Ključne točke za gojenje celic SW-620
Čas podvojitve:
Čas podvojitve celic SW-620 znaša od 20 do 26 ur.
Adhezivne ali v suspenziji:
Celična linija SW-620 je adhezivna. Celice tvorijo monosloje na površini kultivacijske posode.
Razmerje pri subkultivaciji:
Celice SW-620 se subkultivirajo v razmerju 1:3. Adherentne celice se speremo s fosfatnim fiziološkim pufrom (1X) brez magnezija in kalcija. Nato dodamo raztopino za pasážiranje, Accutase, in celice inkubiramo pri sobni temperaturi 8 do 10 minut. Dodajo se sveži gojišča, celice pa se centrifugirajo. Nato se pobrane celice previdno ponovno suspendirajo v gojišču in razporedijo v nove kolbe za rast.
Rastno gojišče:
Za idealno rast celic SW-620 se uporablja gojišče DMEM, dopolnjeno z 10 % fetalnim govejim serumom, 4,5 g/l glukoze, 4 mM L-glutamina, 1,5 g/l NaHCO₃ in 1,0 mM natrijevega piruvata. Medij je treba zamenjati dvakrat na teden.
Pogoji rasti:
Celice kolonskega karcinoma SW-620 se gojijo v vlažnem inkubatorju pri temperaturi 37 °C in 5 % CO₂.
Shranjevanje:
Po zamrzovanju se celice SW-620 shranjujejo pri temperaturi pod -150 °C v zamrzovalnikih z izjemno nizko temperaturo ali v plinski fazi tekočega dušika.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
CM-1 ali CM-ACF je idealno sredstvo za zamrzovanje celic SW-620. Za zamrzovanje celic SW-620 se uporablja postopek počasnega zamrzovanja. Ta omogoča znižanje temperature le za 1 °C na minuto, s čimer se ohrani vitalnost celic.
Postopek odmrzovanja:
Zamrznjene celice SW-620 se odmrzujejo v vodni kopeli, nastavljeni na 37 °C, 40 do 60 sekund. Po odmrzovanju se doda gojišče, celice pa se centrifugirajo, da se odstranijo ostanki sredstva za zamrzovanje. Nato se pridobljeni celični pelet ponovno suspendira v gojišču, celice pa se prelijejo v novo kolbo za rast.
Raven biološke varnosti:
Za ravnanje s kulturami SW-620 je potreben laboratorij stopnje biološke varnosti 1 (BSL-1).
Prednosti celic SW-620
Prednosti
- Modeliranje raka debelega črevesa: Celice SW-620 služijo kot ključen model za raka debelega črevesa, kar omogoča poglobljeno preučevanje mehanizmov tumorja in metastaz, zlasti v modelih ksenotransplantatov.
- Raziskave raka in terapije: Te celice omogočajo raziskovanje biologije raka, učinkovitosti kemoterapije in mehanizmov celične smrti, vključno z anoikisom.
- Ekspresija CD133: Ekspresija CD133 v celicah SW-620 omogoča vpogled v biologijo rakavih matičnih celic ter njene posledice za nastanek tumorjev in odpornost na zdravljenje.
- Uporaba pretočne citometrije: Analiza s pretočno citometrijo na teh celicah omogoča oceno celičnih populacij, stopenj apoptoze in proliferacije.
Raziskovalne aplikacije celične linije SW-620
Raziskovalna področja, na katerih so celice SW-620 obetavne, so opisana v nadaljevanju:
- Raziskave raka: SW-620 je neprecenljiv celični model za preučevanje biologije kolorektalnega raka. Raziskovalci uporabljajo ta in vitro model za raziskovanje molekularnih mehanizmov, ki poganjajo rast, invazijo in migracijo rakavih celic. Poleg tega se lahko uporablja za preučevanje mutacij celične linije SW620, npr. p53, APC in KRAS. Raziskava, izvedena leta 2021, je preučevala vpliv mutacije KRAS v celični liniji SW620 na občutljivost novega zdravila FL118. Ugotovili so, da prekomerna ekspresija KRAS poveča FL118-inducirano apoptozo kolorektalnih celic, medtem ko jo njegovo utišanje zmanjša. Ti rezultati lahko pomagajo pri napovedovanju uporabe FL118 pri bolnikih s karcinomom debelega črevesa z mutacijo KRAS [3].
- Presejanje in razvoj zdravil: Celična linija SW-620 se pogosto uporablja za presejanje in testiranje potencialnih kandidatov za zdravila proti raku debelega črevesa. Raziskovalci te celice uporabljajo za ocenjevanje citotoksičnosti in učinkovitosti zdravil, kar lahko vodi k razvoju ciljno usmerjenih terapevtskih pristopov. V eni od študij so na primer z uporabo celične linije SW-620 raziskovali protikolorektalne lastnosti posameznih eteričnih oljnih spojin cimeta in klinčkov [4].
- Študije metastaziranja: Zaradi visokega potenciala za metastaziranje se celice SW-620 lahko uporabljajo za preučevanje molekularnih poti, ki so osnova za metastaziranje rakavih celic. Zhou Yang in njegovi sodelavci so na primer odkrili vlogo gena Grainy-head-like 2 (GRHL2) pri napredovanju raka debelega črevesa in metastaziranju. Predlagali so, da ekspresija gena GRHL2 zavira napredovanje raka debelega črevesa in metastaziranje prek zaviranja epitelno-mezenhimalne preobrazbe (EMT) [5].
Zavarujte svojo celično linijo SW620
Celice SW-620: Objave
V tem poglavju bomo predstavili nekaj zanimivih in najpogosteje citiranih raziskovalnih publikacij o celicah SW-620.
Ta študija, objavljena v reviji Molecular Carcinogenesis (2017), je pokazala, da zdravljenje s polifenolom urolitinom A inducira avtofagijo v celični liniji raka debelega črevesa SW620. Prav tako je zaviralo metastaze rakavih celic.
Ta članek v reviji *Oncology Letters* (2018) je raziskoval protimetastatični potencial tetrandrina, bis-benzilizokinolinskega alkaloida, z uporabo celic SW-620.
Ta članek je objavljen v reviji Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). V njem je bilo predlagano, da je gen CDCA3 (Cell division cycle associated 3) v celicah kolorektalnega raka nadreguliran in spodbuja njihovo proliferacijo prek aktivacije signalne poti NF-κB.
Študija, objavljena v reviji International Journal of Molecular Sciences (2021), je preučevala sinergistični učinek bispecifičnega protitelesa (ABL001) in kemoterapevtskih zdravil na napredovanje tumorja v ksenotransplantatu SW620.
Ta članek je objavljen v reviji Cells (2018). V njem so raziskovali protitumorske učinke izvlečka Bacopa monnieri, Bacopaside II, na celice SW-620 in druge celice raka debelega črevesa.
Viri za celično linijo SW-620: protokoli, videoposnetki in več
V nadaljevanju je navedenih nekaj spletnih virov, ki obravnavajo celice kolorektalnega karcinoma SW-620.
- Transfekcija SW-620: Ta članek na kratko opisuje protokol za stabilno transfekcijo celične linije SW-620.
Naslednja povezava vsebuje protokol za gojenje celic SW-620.
- Protokol za gojenje celic SW-620: Ta povezava ponuja osnovne informacije o celični liniji SW-620. Prav tako vam bo v pomoč pri spoznavanju protokola za subkultiviranje celic SW-620 ter ravnanja s krioprezerviranimi in proliferativnimi kulturami SW-620.
- Protokoli za gojenje celic: Ta video je odličen vir za spoznavanje protokolov za pasážiranje adhezivnih celic ter zamrzovanje in odmrzovanje.
Pogosto zastavljena vprašanja o celicah SW620
Celice SW620 so celice človeškega adenokarcinoma debelega črevesa in danke, pridobljene iz metastaz v bezgavkah bolnika z rakom debelega črevesa, zato so pomembne za raziskave raka.
Celice SW620 imajo običajno premer od 15 do 30 mikrometrov, čeprav se ta lahko spreminja glede na pogoje gojenja.
Celice SW620 imajo več mutacij, vključno z genom TP53. Te mutacije lahko vplivajo na morfologijo celic, zaradi česar so v populaciji različne oblike in velikosti.
Celice SW620 in SW480 so pridobljene iz adenokarcinomov debelega črevesa, vendar celice SW620 izvirajo iz metastaz, medtem ko celice SW480 izvirajo iz primarnega tumorja. Ta razlika lahko vpliva na njihovo genetsko sestavo, obnašanje v kulturi in odziv na zdravljenje.
Celice SW620 so koristne pri preučevanju tumorigeneze, zlasti zaradi njihove sposobnosti tvorjenja tumorjev v ksenografskih mišjih modelih in izražanja označevalcev rakavih matičnih celic, kot je CD133.
Da, celice SW620 se uporabljajo za preučevanje poti celične smrti, vključno z apoptozo in anoikisom, saj se odzivajo na različne terapije raka in okoljske pogoje.
Zaradi velikega metastatskega potenciala celic SW620 in njihovega izvora iz metastatske bezgavke so primerne za preučevanje širjenja raka debelega črevesa.
Pretočna citometrija raziskovalcem omogoča analizo lastnosti celic SW620, vključno z vzorci izražanja CD133 in stopnjo apoptoze ali občutljivosti na anoikis.
Celice SW620 imajo velik tumorigen potencial, ko jih vnesemo v imunodeficientne ksenografske mišje modele, zaradi česar so dragocene za študije in vivo o napredovanju raka.
Viri
- Siekmann, W., et al., Vpliv lidokaina in ropivakaina na primarne (SW480) in metastatske (SW620) celične linije raka debelega črevesa. Oncol Lett, 2019. 18(1): str. 395–401.
- Hewitt, R.E., et al., Potrditev modela napredovanja raka debelega črevesa. J Pathol, 2000. 192(4): str. 446–54.
- Thangaiyan, R., in sod., Podtipi mutacij KRAS različno vplivajo na občutljivost celic kolorektalnega raka na FL118, nov inhibitor survivina, Mcl-1, XIAP, cIAP2 in MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): str. 7458.
- Petrocelli, G., et al., Molekule, prisotne v eteričnih oljih rastlin, za preprečevanje in zdravljenje kolorektalnega raka (CRC). Molecules, 2021. 26(4): str. 885.
- Yang, Z., et al., GRHL2 zavira napredovanje in metastaziranje kolorektalnega raka z zaviranjem epitelno-mezenhimalne preobrazbe. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): str. 1195–1205.