Celice RBL-2H3 – pomen celic RBL-2H3 pri alergijskih odzivih in imunoloških raziskavah
Celična linija RBL-2H3 je linija bazofilnih levkemijskih celic, pridobljenih iz podgan, ki se uporablja v imunoloških raziskavah. Služi kot modelni sistem za preučevanje fiziologije, vedenja in funkcij mastocitov. Te celice se uporabljajo tudi za preučevanje alergijskih reakcij, imunoloških procesov ter testiranja in razvoja zdravil.
- Rastno gojišče
- Za gojenje celic RBL-2H3 se uporablja gojišče EMEM, ki vsebuje 10 % FBS, 2 mM L-glutamina, 2,2 g/l NaHCO3 in EBSS sol. Gojišče je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
- Čas podvojitve
- Čas podvojitve mastocitov RBL-2H3 je približno 50–60 ur.
- Vrsta rasti
- RBL-2H3 je adhezivna celična linija.
- Raven biološke varnosti
- BSL-2
- Na voljo pri
- Cytion — Naročite RBL-2H3
- Celice RBL-2H3: Izvor in splošne značilnosti
- Celice RBL-2H3: Informacije o gojenju
- Prednosti in omejitve bazofilne celične linije RBL-2H3
- Celična linija RBL-2H3: temelj imunoloških raziskav
- Celična linija RBL-2H3: bistvena vprašanja in odgovori za raziskovalce
- Viri
- Celična linija RBL-2H3 za napredne imunološke raziskave
- Celice RBL-2H3: raziskovalne publikacije
- Viri za celično linijo RBL-2H3: protokoli, videoposnetki in več
- Pogosto zastavljena vprašanja
Celice RBL-2H3: izvor in splošne značilnosti
Preden v svojih raziskavah uporabite linijo bazofilnih celic, morate poznati njen izvor in splošne lastnosti. V tem delu članka boste izvedeli osnovne informacije o celicah RBL-2H3. Na primer: Kaj so mastociti RBL-2H3? Zakaj uporabljati celice RBL-2H3? Kaj so celice RBL-2H3 pri bazofilni levkemiji podgan? Kakšna je morfologija celic RBL-2H3? Ali so celice RBL-2H3 nesmrtne?
- RBL-2H3 so bazofilne levkemijske celice, pridobljene iz bazofilnih celic podgane pasme Wistar leta 1978 v Laboratoriju za imunologijo Nacionalnega inštituta za zobozdravstvene raziskave.
- Celice RBL-2H3 imajo receptor tirozin kinaze c-kit in receptorje mastocitne proteaze II (RMCP-II), kar jih naredi za potencialni model mastocitov. Zato se jih pogosto imenuje mastociti, kljub temu da izvirajo iz bazofilov podgan [1].
- Ob aktivaciji sproščajo histamin in druge mediatorje ter izražajo receptorje IgE z visoko afiniteto.
- Celice RBL-2H3 imajo morfologijo, podobno fibroblastom.
Celice RBL-2H3: Navodila za gojenje
V tem poglavju boste spoznali nekaj ključnih vidikov gojenja celične linije RBL-2H3. Izvedeli boste: Kakšen je čas podvojitve celic RBL-2H3? Kakšna je gostota posevka celic RBL-2H3? Kakšen je protokol gojenja celic RBL-2H3? Kaj je medij za zamrzovanje celične linije RBL-2H3?
Ključne točke za gojenje celic RBL-2H3
Čas podvojitve populacije:
Čas podvojitve mastocitov RBL-2H3 je približno 50–60 ur.
Adhezivna ali v suspenziji:
RBL-2H3 je adhezivna celična linija.
Razmerje pri delitvi kulture:
Za celice RBL-2H3 se razmerje pri subkultivaciji ohranja med 1:2 in 1:4. Adherentne celice se operejo z raztopino 1 x PBS brez magnezija in kalcija. Raztopina za pasážiranje: Dodamo Accutase in celice 10 minut hranimo pri sobni temperaturi, da se odlepijo od dna kultivacijske posode. Dodamo svežo gojišče in celice centrifugiramo. Pobrane celice previdno ponovno suspendiramo v svežem gojišču in jih prelijemo v nove kolbe, ki vsebujejo gojišče za rast.
Rastno gojišče:
Za gojenje celic RBL-2H3 se uporablja gojišče EMEM, ki vsebuje 10 % FBS, 2 mM L-glutamina, 2,2 g/l NaHCO₃ in EBSS-sol. Gojišče je treba zamenjati 2- do 3-krat na teden.
Pogoji rasti:
Celice RBL-2H3 se gojijo v vlažnem inkubatorju, nastavljenem na temperaturo 37 °C in priključenem na vir 5 % CO₂.
Shranjevanje:
Celice se shranjujejo v plinski fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C v električnem zamrzovalniku, da se dolgoročno ohrani njihova vitalnost.
Postopek zamrzovanja in gojišče:
Za zamrzovanje celic RBL-2H3 s postopkom počasnega zamrzovanja se uporabljata zamrzovalna sredstva CM-1 ali CM-ACF. Na kratko, ta metoda omogoča znižanje temperature za 1 °C na minuto in ščiti celice pred temperaturnim šokom.
Postopek odmrzovanja:
Celice RBL-2H3 se odmrzujejo v vnaprej nastavljeni vodni kopeli (37 °C) približno 60 sekund. Nato se celice dodajo v svež gojišče in centrifugirajo. Ta korak je bistven za odstranitev sestavin sredstva za zamrzovanje. Nato se celični pelet ponovno suspendira v rastnem mediju, celice pa se prenesejo v kolbo za gojenje.
Raven biološke varnosti:
Celice RBL-2H3 je treba gojiti v laboratorijih z ravnjo biološke varnosti 1.
Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026
Prednosti in omejitve celične linije bazofilov RBL-2H3
Celice RBL-2H3 se pogosto uporabljajo v imunoloških raziskavah. V tem poglavju so opisane njihove glavne prednosti in omejitve.
Prednosti
- Enostavno gojenje: Celice RBL-2H3 je mogoče enostavno gojiti in vzdrževati v laboratorijskem okolju. To omogoča stroškovno učinkovito in ponovljivo eksperimentiranje, zaradi česar so priljubljena izbira za začetne študije na področju imunologije.
Omejitve
- Nehumani izvor: Ker izvirajo iz bazofilov podgan, celice RBL-2H3 morda ne posnemajo natančno človeških bioloških procesov, kar lahko omeji njihovo uporabnost v raziskavah, specifičnih za človeka. Zaradi tega je pri ekstrapolaciji rezultatov na človeške sisteme potrebna previdna interpretacija podatkov.
- Poenostavljen model mastocitov: Čeprav te celice predstavljajo osnovni model za preučevanje funkcij mastocitov, ne odražajo v celoti kompleksne narave interakcij mastocitov znotraj človeškega imunskega sistema. Posledično morda ne morejo ustrezno modelirati večplastnih vlog mastocitov v imunskih odzivih ali bolezenskih stanjih in vivo.
Celična linija RBL-2H3: temelj imunoloških raziskav
Raziskave bazofilov in mastocitov z uporabo celične linije RBL-2H3
Celična linija RBL-2H3, pridobljena iz Rattus norvegicus, služi kot ključni model za preučevanje biologije bazofilov in mastocitov. Ti mastociti podgan zagotavljajo bistvene vpoglede v sproščanje mediatorjev mastocitov, kar je ključnega pomena za razumevanje alergijskih stanj, kot je alergijski rinitis. S pomočjo teh celic raziskovalci preučujejo dinamiko celičnih receptorjev in vzpostavljanje imunoloških sinaps, ki so osrednjega pomena za odziv imunskega sistema na alergene. Zanimiva študija, objavljena leta 2019, je uporabila celično linijo RBL-2H3 in preučila mehanizme, ki stojijo za psevdoalergijskimi reakcijami, ki jih povzroča injekcija zdravila Qingkailing. Študija je ugotovila, da signalna kaskada PI3K-RAC1 delno sproži ta alergijski odziv v celicah [2].
Dinamika imunoloških sinaps v raziskavah alergij
Celice RBL-2H3, ki se obsežno uporabljajo v imunoloških raziskavah, so še posebej učinkovite za preučevanje dinamike imunoloških sinaps. To pomaga pri razjasnjevanju komunikacijskih procesov imunskega sistema, z uporabo pri preučevanju mastocitov v periferni krvi in peritonealnih mastocitov. Takšne raziskave so ključne za celovito razumevanje imunskega odziva tako v sistemskem kot v lokaliziranem kontekstu.
Presejanje zdravil in testiranje toksičnosti
Pri presejanju in testiranju zdravil se izkorišča odzivnost celic RBL na različne dražljaje, vključno s preučevanjem, kako H₂O₂ zavira odzive, posredovane z IgE. Te celice igrajo bistveno vlogo pri razvoju zdravljenja bolezni, kot so streptokokne okužbe, pri katerih streptokoki skupine mitis zavirajo aktivacijo mastocitov. Poleg tega raziskovalci z uporabo tega modela RBL 2H3 mc ocenjujejo toksične učinke različnih snovi, vključno s kemikalijami, zdravili in nanodelci. Na primer, v nedavni študiji (2022) so ocenili citotoksičnost mikroplastike iz polistirena na celicah RBL-2H3. Ugotovili so, da mikroplastika poškoduje organele celic RBL-2H3 in pospešuje celično smrt [3]. Druga študija iz leta 2021 je z uporabo modela RBL 2H3 mc ocenila protialergijski in protivnetni potencial naravnega proizvoda, neferina. Študija je pokazala dobre protialergijske in protivnetne lastnosti te spojine [4].
Napredne metodologije v imunoloških meritvah
Dosledno in merljivo sproščanje mediatorjev iz celic RBL-2H3 jih naredi idealne za enostavno fluorimetrijo, kar omogoča natančne in točne meritve, ki so ključne za raziskovanje bolezni in ocenjevanje terapevtskih sredstev.
Celična linija RBL-2H3, ki izvira iz Rattus norvegicus, je neprecenljivo sredstvo tako v temeljnih kot v aplikativnih raziskavah na področju imunologije. Ponuja obsežne možnosti za napredek našega znanja in zdravljenja imunoloških bolezni.
Celična linija RBL-2H3 za napredne imunološke raziskave
Celice RBL-2H3: Raziskovalne publikacije
V nadaljevanju so navedene nekatere zanimive raziskovalne publikacije, ki obravnavajo mastocite RBL-2H3:
Zaviralni učinek narirutina na degranulacijo celic RBL-2H3
Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Študija je pokazala, da narirutin, naravna spojina, zavira degranulacijo celic RBL-2H3 prek regulacije signalnih poti NF-κB, MAPK in tirozin kinaze.
Ta raziskava, objavljena v reviji International Journal of Molecular Sciences (2020), je pokazala, da spojina apigenin znatno zavira alergijske in vnetne odzive celic RBL-2H3 in RAW264.7. Zato bi lahko služila kot potencialno sredstvo za boj proti boleznim, povezanim z imunskim sistemom.
Ta raziskovalni članek v reviji International Journal of Molecular Sciences (2021) je ocenil protialergijske in protivnetne učinke naravnega proizvoda, saponarina, z uporabo različnih celičnih linij, vključno z RBL-2H3.
Ta študija, objavljena v reviji Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014), je ugotovila, da izvlečki Benchalokawichiana in nekatere aktivne sestavine potencialno zavirajo sproščanje β-heksosaminidaze iz celic RBL-2H3.
Ta članek je bil objavljen leta 2018 v reviji International Journal of Biological Macromolecules. Študija je pokazala, da naravni proizvod spirulina maxima zavira degranulacijo celic RBL 2H3 s preprečevanjem fosforilacije MAPK in AKT.
Viri za celično linijo RBL-2H3: protokoli, videoposnetki in več
RBL-2H3 je široko uporabljena linija mastocitov. Tukaj so navedena razpoložljiva gradiva, ki zajemajo protokole za gojenje in transfekcijo RBL-2H3:
- Model mastocitov RBL-2H3: Ta raziskovalni članek vsebuje protokole za vzdrževanje kultur RBL-2H3 in za transfekcijo RBL-2H3.
Tukaj je nekaj virov, ki pojasnjujejo protokol gojenja celic RBL-2H3:
- Celice RBL-2H3: Ta spletna stran vam bo v pomoč pri učenju protokolov za gojenje celic celične linije RBL-2H3. Poleg tega vsebuje informacije o gojiščih za celice RBL-2H3 in pogojih gojenja.
Celična linija RBL-2H3: Najpomembnejša vprašanja in odgovori za raziskovalce
Viri
- Passante, E. in N. Frankish, Celična linija RBL-2H3: njen izvor in primernost kot model za mastocite. Inflamm Res, 2009. 58(11): str. 737–45.
- Li, Q. in sod., Psevdoalergična reakcija, ki jo povzroča injekcija Qingkailinga, delno prek signalne poti PI3K-Rac1 v celicah RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): str. 353–360.
- Liu, L., et al., Mikro- (nano-) plastični delci iz polistirena poškodujejo organele celic RBL-2H3 in spodbujajo MOAP-1 k indukciji apoptoze. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: str. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Protialergijski in protivnetni učinki neferina na celice RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): str. 10994.