KC-celice
Splošne informacije
| Opis | KC (Kc167) je embrionalna celična linija Drosophila melanogaster, pridobljena iz ženskega zarodka v fazi dorzalnega zapiranja, registrirana v bazi Cellosaurus pod oznako CVCL_Z833. Linija je bila prvotno vzpostavljena in se široko uporablja v celični biologiji Drosophila, genetskih presejanjih in funkcionalni genomiki. Celice Kc167 so bile imortalizirane s SV40 in rastejo polprilepno, pri čemer tvorijo mešano populacijo pritrjenih in ohlapno lebdečih celic. Spadajo med najbolje karakterizirane celične linije Drosophila in so popolnoma primerne za utišanje genov s pomočjo RNAi, kar jih naredi za temeljni model za presejanja RNAi na ravni celotnega genoma v biologiji nevretenčarjev. Celice KC se uporabljajo v celični biologiji Drosophila, presejanjih z RNAi in CRISPR na ravni celotnega genoma, študijah signalnih transdukcijskih poti (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), raziskavah prirojenega imunskega sistema ter primerjalnih študijah evolucijsko ohranjenih poti. Popolnoma sekvenciran in anotiran genom Drosophila, v kombinaciji z obsežnimi javnimi bazami podatkov o reagentih RNAi (npr. DRSC/TRiP), daje celicam KC posebno moč za nepristransko odkrivanje funkcionalne genomike. Zaradi imortalizacije s SV40 velja klasifikacija BSL-2. KC-celice se gojijo v Schneiderjevem mediju za Drosophila, dopolnjenem z 2 mM glutamina in 10 % FBS. Pomembno je, da se celične linije Drosophila gojijo pri 25 °C v zunanjem zraku brez CO₂ (ne pri 37 °C / 5 % CO₂, kot pri celicah sesalcev). Celice se prenašajo z nežnim ponovnim suspenziranjem in redčenjem (poladhezivna rast). Gojišče se obnavlja ali celice redčijo vsakih 2–3 dni. |
|---|---|
| Organizem | Drosophila melanogaster (sadna mušica) |
| Tkivo | Zarodek |
| Bolezen | Normalno |
| Mesto metastaziranja | Zarodek (faza zapiranja hrbtne stene) |
| Aplikacije | Celična biologija Drosophila; presejalne študije RNAi na ravni celotnega genoma; presejalne študije CRISPR; signalna transdukcija (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); prirojena imunost; funkcionalna genomika nevretenčarjev |
| Sinonimi | KC, K C |
Značilnosti
| Starost | Faza zapiranja hrbtne stene |
|---|---|
| Spol | Ženske |
| Morfologija | Polprilepni, epitelijsko podobni |
| Vrsta celice | Embrionalne celice |
| Lastnosti rasti | polprilepiv |
Regulativni podatki
| Citiranje | KC (kataloška številka Cytion 300604) |
|---|---|
| Raven biološke varnosti | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| CellosaurusAccession | CVCL_Z833 |
| Status GSO | GMO-S2: Ta celična linija Drosophila vsebuje stabilno vgrajeno kaseto za imortalizacijo SV40. Zahteva se varnostna stopnja BSL-2. Ta razvrstitev velja le v Nemčiji in se drugod lahko razlikuje. |
Biomolekularni podatki
| Občutljivost na viruse | SV40, ki je postal nesmrten |
|---|
Ravnanje s spletno stranjo
| Medij za gojenje | Schneiderjev medij za Drosophila + 2 mM glutamina + 10 % govejega fetalnega seruma (FBS). |
|---|---|
| Dodatki | Gojilnemu mediju dodajte 2 mM glutamina in 10 % FBS |
| Reagent za disociacijo | Ni potrebno (polprilepno; nežno ponovno suspendirajte) |
| Čas podvojitve | približno 24 do 48 ur |
| Subkultiviranje | Kulturo previdno pipetirajte, da ponovno suspendirate polprilepne celice. Primeren volumen prenesite v novo kolbo in dodajte svež, predhodno ogret Schneiderjev medij. Razredčite do gostote 5 × 10⁵ do 1 × 10⁶ celic/ml. Inkubirajte pri 25 °C v zunanjem zraku brez CO₂. |
| Razdelitveno razmerje | 1 do 3 |
| Gostota setve | 5 × 10⁵ do 1 × 10⁶ celic/ml |
| Obnova tekočin | Vsakih 2 do 3 dni |
| Sredstvo za zamrzovanje | Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom. |
| Odmrzovanje in gojenje celic |
|
| Inkubacijska atmosfera | 25 °C, zunanji zrak (CO₂ ni potreben). |
| Pogoji pošiljanja | Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče. |
| Pogoji shranjevanja | Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik. |
Kontrola kakovosti in molekularna analiza
Sporazum o prenosu materiala
Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.
Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.
Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.