Celice HepG2

Cytionov medij za zamrzovanje CM-1 je najsodobnejši medij za kriokonzervacijo, ki je zasnovan tako, da zagotavlja najvišjo raven vitalnosti in funkcionalnosti celic po odmrznitvi. To vsestransko gojišče je primerno za širok spekter vrst celic, vključno s človeškimi in živalskimi celicami, zato je bistveno orodje za različne raziskovalne aplikacije. Medij za zamrzovanje CM-1 je oblikovan s skrbno uravnoteženo kombinacijo krioprotektantov in bistvenih hranil, kar zmanjšuje nastajanje ledenih kristalov in celični stres med postopkom zamrzovanja ter tako ohranja celično celovitost.
Ključne značilnosti Freeze Medium CM-1 vključujejo:

Široka združljivost: Učinkovita za širok spekter celičnih vrst, vključno s primarnimi celicami, matičnimi celicami in uveljavljenimi celičnimi linijami.
Visoka sposobnost preživetja: Optimizirano za čim večjo obnovo in vitalnost celic po odmrzovanju, kar zagotavlja zanesljive rezultate poskusov.
Pripravljen za uporabo: Priročno pripravljene in sterilizirane za takojšnjo uporabo, kar zmanjšuje čas priprave in tveganje kontaminacije.
Izboljšana stabilnost: Ohranja dosledno delovanje v standardnih pogojih kriokonzervacije, kar zagotavlja ponovljive rezultate.
Dolg rok trajanja: CM-1 je za uporabo pripravljen medij za kriokonzervacijo, ki vsebuje serum in se lahko v hladilniku hrani do enega leta.


Uporaba CM-1 za zamrzovanje celic

Če želite uporabiti CM-1 za zamrzovanje adherentnih in suspenzijskih celic, sledite naslednjim korakom

Pri adherentnih celicah jih sperite in ločite od podlage za gojenje. Za suspenzijske celice nadaljujte neposredno z naslednjim korakom.
Preštejte celice, da zagotovite njihovo ustrezno koncentracijo.
Celice centrifugirajte, da jih oprašite, nato jih ponovno suspendirajte v gojišču za zamrzovanje CM-1.
Resuspendirane celice prenesite v kriovile.
Pred prenosom celic v dolgoročno skladiščenje uporabite metodo počasnega zamrzovanja





Metoda
Opis
Koraki





❄️
Ročno zamrzovanje

Postopna metoda, ki vključuje postopno zniževanje temperature, da se zagotovi vitalnost celic

1️⃣ Postavite celice v gojišče za zamrzovanje v zamrzovalnik pri 4 °C za 40 minut.
2️⃣ Za 24 ur prenesite v zamrzovalnik pri -80 °C.
3️⃣ Za dolgoročno shranjevanje shranite celice v tekočem dušiku



❄️
Uporaba pripomočka Mr. Frosty

Priročna naprava, ki omogoča nadzorovano hitrost zamrzovanja brez električne energije

1️⃣ Pripravite celice v kriovile z gojiščem za zamrzovanje.
2️⃣ Kriovile postavite v posodo Mr. Frosty.
3️⃣ Pred prenosom v tekoči dušik jih 24 ur hranite pri -80 °C



❄️
Zamrzovalnik z nadzorovano hitrostjo

Zelo natančen zamrzovalnik Thermo Fisher ali drugih proizvajalcev, namenjen nadzorovanemu zniževanju temperature

1️⃣ Napravo sprogramirajte tako, da postopoma znižuje temperaturo.
2️⃣ Pripravljene celice postavite v zamrzovalnik.
3️⃣ Po ciklu zamrzovanja prenesite celice v tekoči dušik









Kriovile shranite pri temperaturi pod -130 °C ali v tekočem dušiku za dolgoročno shranjevanje.


Sestavine

Vsebuje FBS, DMSO, glukozo, soli
Pufrirna sposobnost: pH = 7,2 do 7,6


Sredstvo za zamrzovanje CM-1 podjetja Cytion ponuja zanesljivo rešitev za kriokonzervacijo, ki zagotavlja visoko vitalnost in funkcionalnost celic po odmrznitvi za širok spekter raziskovalnih aplikacij.

Ham's F-12 Medium, znan tudi kot Ham's F-12 Nutrient Mix, je široko uporabljen bazični medij, zasnovan posebej za celične kulture. V veliki meri se uporablja za brezserumsko, enocelično plastenje celic jajčnikov kitajskega hrčka (CHO), pljučnih celic in mišjih celic L. Poleg tega je Ham's F-12 izbrano gojišče za test klonske toksičnosti (CTA).
Ena od njegovih pomembnih prednosti je sposobnost podpiranja rasti celic brez potrebe po dodajanju seruma. To odpravlja morebitne motnje, ki jih povzročajo sestavine seruma, in zagotavlja dosledne in zanesljive eksperimentalne rezultate. Z zagotavljanjem okolja za gojenje brez seruma medij Ham's F-12 raziskovalcem omogoča večji nadzor nad njihovimi preiskavami.
Druga ključna značilnost medija Ham's F-12 je njegova primernost za nanos posameznih celic. Zaradi tega je odlična izbira za različne celične linije, vključno s celicami CHO, pljučnimi celicami in mišjimi celicami L. Optimizirana sestava hranil v gojišču omogoča učinkovito pritrjevanje in rast posameznih celic, kar omogoča vzpostavitev homogenih celičnih kultur z izboljšano ponovljivostjo.
Poleg tega je medij Ham's F-12 priznan kot najprimernejši medij za test klonske toksičnosti (CTA). Ta preskus ima ključno vlogo pri ocenjevanju citotoksičnih učinkov snovi na celice. Z uporabo gojišča Ham's F-12 v testu CTA lahko raziskovalci natančno ocenijo vpliv različnih spojin ali obdelav na posamezne celice, kar zagotavlja dragocen vpogled v toksikološke profile.
Nadzor kakovosti

pH = 7,2 +/
- 0,02 pri 20-25 °C.
Vsaka serija je bila testirana na sterilnost ter odsotnost mikoplazme in bakterij.

Vzdrževanje

Hranite v hladilniku pri temperaturi od +2 °C do +8 °C v temi. Zamrzovanje in segrevanje do +37 °C zmanjšujeta kakovost izdelka.
Medija ne segrevajte na več kot 37° C in ne uporabljajte nenadzorovanih virov toplote (npr. mikrovalovnih naprav).
Če želite uporabiti le del medija, to količino odstranite iz stekleničke in jo segrejte pri sobni temperaturi.
Rok trajanja za vsa gojišča, razen za osnovno gojišče, je 8 tednov od datuma izdelave.

Sestava




Sestavine
mg/L


Anorganske soli
Kalcijev klorid x 2H2O
44,00



Bakrov(II) sulfat x 5H2O
0,00



Železov (II) sulfat x 7H2O
0,83



Magnezijev klorid x 6H2O
122,00



Kalijev klorid
223,65



Natrijev klorid
7599,00



natrijev vodikov fosfatbrezvodni
142,04



Cinkov sulfat x 7H2O
0,86


Druge sestavine
D(+)-glukoza, brezvodna
1801,60



Hipoksantin
4,08



Linolna kislina
0,08



DL-α-lipojska kislina
0,21



Fenol rdeče
1,20



Putrescin x 2HCl
0,16



Natrijev piruvat
110,00



Timidin
0,73



NaHCO3
1176,00


Aminokisline
L-alanin
8,91



L-arginin x HCl
210,70



L-asparagin x H2O
15,01



L-asparaginska kislina
13,31



L-cistein x HCl x H2O
35,12



L-alanil-L-glutamin
217,30



L-glutaminska kislina
14,71



Glicin
7,51



L-histidin x HCl x H2O
20,96



L-izolevcin
3,94



L-levcin
13,12



L-lizin x HCl
36,54



L-metionin
4,48



L-fenilalanin
4,96



L-prolin
34,53



L-serin
10,51



L-treonin
11,91



L-triptofan
2,04



L-tirozin
5,44



L-valin
11,71


Vitamini
D(+)-biotin
0,01



D-kalcijev pantotenat
0,24



Holin klorid
13,96



Folna kislina
1,32



mio-nizitol
18,02



Nikotinamid
0,04



Piridoksin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

Raztopina za ločevanje celic Accutase z EDTA in fenol rdečim – 100 ml

Accutase je sterilno filtrirana raztopina za ločevanje celic, pripravljena za takojšnjo uporabo, zasnovana kot nežna alternativa tripsinu/EDTA za ločevanje adhezivnih sesalskih celic s standardne plastične posode za tkivno kulturo in površin, prevlečenih z adhezivnim premazom. Združuje proteolitično in kolagenolitično encimsko aktivnost v uravnoteženi solni raztopini, da zagotovi učinkovito, a nadzorovano ločevanje, ohranja proteine na površini celic ter podpira visoko preživetje po prehodu in hitro ponovno pritrditev.

Formulacija Accutase temelji na Dulbeccovem fosfatnem pufru (DPBS) z EDTA in fenol rdečim kot vizualnim indikatorjem pH. Encimi niso živalskega ali bakterijskega izvora, zaradi česar je Accutase še posebej primeren za raziskave matičnih celic, postopke pri razvoju cepiv in vse aplikacije, kjer je treba zmanjšati onesnaževala živalskega ali mikrobiološkega izvora. Raztopina se pri 37 °C samodejno inhibira, zato po ločitvi ni potrebno nevtralizacijsko reagens ali medij, ki vsebuje serum – celice se lahko prenesejo neposredno v svež medij.

Ključne lastnosti

Pripravljena za uporabo 1x sterilno filtrirana tekočina – ni potrebno redčenje ali rekonstitucija
Kombinirana proteolitična in kolagenolitična encimska aktivnost za nežno disociacijo
Vsaka serija je standardizirana na določeno disociacijsko aktivnost za doslednost med serijami
Encimi niso živalskega ali bakterijskega izvora
Samodejna inhibicija pri 37 °C – ni potrebna nevtralizacijska raztopina
Formulirano v Dulbeccovem PBS z EDTA
Vključena fenol rdeča kot vizualni indikator pH
pH 6,8 – 7,8


Tipične uporabe
Accutase nežno razkroji široko paleto adhezivnih in občutljivih celic, vključno s človeškimi embrionalnimi izvorniškimi celicami (hESCs), človeškimi indukiranimi pluripotentnimi izvorniškimi celicami (iPSCs), nevralnimi izvorniškimi celicami, primarnimi nevroni in rutinsko gojenimi adhezivnimi linijami, kot so HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 in A549. Tipični primeri uporabe vključujejo:

Rutinsko subkultiviranje in pasiranje adhezivnih sesalskih celic
Nežno razcepjanje posameznih celic hESCs, iPSCs in drugih občutljivih linij
Priprava vzorcev za pretočno citometrijo in analizo FACS
Analizo markerjev na celični površini, kjer je pomembna integriteta epitopa
Testi migracije, proliferacije in apoptoze celic
Testi mirovanja s pomočjo pomanjkanja seruma in študije transfekcije onkogenov
Testi migracije tumorskih celic in celic nevralnega grebena
Povečanje proizvodnje v delovnih tokovih bioreaktorjev

Za rutinsko delo nanesite približno 10 ml Accutase na 75 cm2 površine kulture in inkubirajte 5–10 minut pri sobni temperaturi. Optimalni čas inkubacije je treba določiti za vsako celično linijo in ne sme presegati ene ure. Pred dodajanjem sperite celični sloj z raztopino soli brez Ca2+/Mg2+, kot je DPBS brez kalcija in magnezija, da odstranite ostanke seruma in dvovalentne katione.

Ravnanje in shranjevanje
Neodprto stekleničko shranjujte zamrznjeno pri -15 °C ali nižji temperaturi. Odtalite pri sobni temperaturi ali čez noč pri +2 °C do +8 °C. Accutase ne odtaljujte v vodni kopeli pri 37 °C, saj višje temperature zmanjšujejo encimsko aktivnost. Po odtalitvi se raztopina lahko shranjuje do 2 mesecev pri +2 °C do +8 °C; ne shranjujte pri sobni temperaturi. Reagenta pred uporabo ne segrevajte na 37 °C – dodajte ga neposredno na oprane celice pri sobni temperaturi. Za daljšo rok uporabnosti priporočamo razdelitev v enkratne odmerke, da se izognete ponavljajočim se ciklom odmrzovanja. Vedno delajte v aseptičnih pogojih.

Kakovost
Izdelano v skladu s strogimi standardi kakovosti. Vsaka serija Accutase je sterilno filtrirana in testirana na sterilnost, pH, videz in disociacijsko aktivnost, da se zagotovi dosledna, ponovljiva učinkovitost med serijami.

Specifikacije izdelka



Specifikacija
Podrobnosti



Vrsta izdelkaReagent za ločevanje/disociacijo celic
OblikaSterilno filtrirana tekočina, pripravljena za uporabo
Količina100 ml
Delovna koncentracija1x (pripravljeno za uporabo)
Encimska aktivnostKombinirana proteolitična in kolagenolitična
Izvor encimovNesestavljen iz sesalcev in bakterij
Puferski sistemDulbeccov PBS z EDTA
Indikator pHFenol rdeča
Območje pH6,8 – 7,8
VidezBistra, bledo rdeča do oranžna raztopina
Temperatura shranjevanja-15 °C ali manj
Stabilnost po odmrzovanjuDo 2 mesecev pri temperaturi od +2 °C do +8 °C
Priporočena količina za uporabo~10 ml na 75 cm2 površine kulture
Tipični čas inkubacije5–10 minut pri sobni temperaturi
Pogoji za pošiljanjeZamrznjeno na suhem ledu
Namen uporabeSamo za raziskovalne namene in nadaljnjo proizvodnjo



Formulacija (sestava na liter)



Sestavina
Koncentracija (mg/l)




Anorganske soli

Natrijev klorid (NaCl)8000,00
Dinatrijev hidrogenfosfat (Na2HPO4)1150,00
Kalijev klorid (KCl)200,00
Kalijev dihidrogenfosfat (KH2PO4)200,00

Druge sestavine

EDTA · 4Na (tetranatrijev EDTA)220,00
Fenol rdeča3,00
Lastniška mešanica encimov (proteolitična in kolagenolitična aktivnost)1x



Accutase je registrirana blagovna znamka podjetja Innovative Cell Technologies, Inc.

Pregled izdelka
Prostornina: 100 ml Shranjevanje: ≤-15 °C Sterilnost: Sterilnost: Sterilno filtrirano
Antibiotična/antimikotična raztopina (100x ) je sterilen koncentrat, pripravljen za uporabo, namenjen zmanjšanju tveganja mikrobne kontaminacije v celičnih kulturah in sorodnih laboratorijskih aplikacijah. Ta raztopina 100x vsebuje uveljavljeno kombinacijo penicilina, streptomicina in amfotericina B, ki zagotavlja širok spekter protimikrobnega delovanja proti grampozitivnim in gramnegativnim bakterijam, kvasovkam in nitastim glivicam. Formulacija je primerna za uporabo v evkariontskih celičnih kulturah, bakterijskih gojiščih in drugih sistemih, občutljivih na kontaminacijo, ter podpira čiste in dosledne laboratorijske postopke.
Uporaba in prednosti Ta raztopina, optimizirana za rutinske raziskovalne protokole, se pogosto uporablja za vzdrževanje aseptičnih pogojev v delovnih postopkih celičnih kultur. Zagotavlja zanesljivo delovanje v okoljih, občutljivih na kontaminacijo, in raziskovalcem pomaga zmanjšati tveganje za prekomerno rast mikrobov, ne da bi pri tem ogrozili zdravje celic ali ponovljivost poskusov. Sterilno filtrirana formulacija odpravlja potrebo po dodatnih korakih solubilizacije, kar podpira poenostavljeno pripravo gojišč in zmanjšuje variabilnost vsakodnevnih laboratorijskih postopkov.
Uporaba in združljivost Za doseganje standardnih delovnih koncentracij raztopino razredčite v razmerju 1 : 100 v celotnem gojišču. Izdelek je združljiv s številnimi celičnimi linijami sesalcev in osnovnimi gojišči. Zaradi stalne razpoložljivosti zalog imajo raziskovalci koristi od zanesljive neprekinjene oskrbe in poenostavljenega načrtovanja logistike. Raztopino je treba hraniti pri ≤ -15 °C in jo zaščititi pred ponavljajočimi se cikli zamrzovanja in odmrzovanja, da se ohrani stabilnost. Samo za raziskovalno uporabo. Ni za uporabo v diagnostičnih ali terapevtskih postopkih. Ni za uporabo pri ljudeh ali živalih.

Raztopina fiziološke raztopine s puferjem fosfata (PBS)
S fosfatom puferirana fiziološka raztopina (PBS) je široko uporabljena puferska raztopina v bioloških in kemijskih raziskavah. Ima ključno vlogo pri ohranjanju ravnovesja pH in osmolarnosti med različnimi eksperimentalnimi postopki, vključno z obdelavo tkiv in gojenjem celic. Naša raztopina PBS je skrbno pripravljena iz sestavin visoke čistosti, kar zagotavlja stabilnost in zanesljivost pri vsakem poskusu. Osmolarnost in koncentracije ionov v naši raztopini PBS natančno posnemajo tiste v človeškem telesu, zato je izotonična in nestrupena za večino celic.

Sestava naše raztopine PBS
Naša raztopina PBS je mešanica fosfatnih pufrov in fizioloških raztopin ultračiste kakovosti, ki ji je prilagojen pH. V 1-kratni delovni koncentraciji vsebuje:

8000 mg/L natrijevega klorida (NaCl)
200 mg/L kalijev klorid (KCl)
1150 mg/L natrijev fosfat dvodazni brezvodni (Na2HPO4)
200 mg/L Kalijev fosfat enobazni brezvodni (KH2PO4)

Ta sestava zagotavlja optimalno pH in ionsko ravnovesje, primerno za širok spekter bioloških aplikacij.

Uporaba naše raztopine PBS
Naša raztopina PBS je idealna za različne aplikacije v bioloških raziskavah. Zaradi izotoničnih in netoksičnih lastnosti je primerna za redčenje snovi in izpiranje celičnih posod. Raztopine PBS, ki vsebujejo EDTA, so učinkovite za odstranjevanje pritrjenih in zlepljenih celic. Vendar se PBS ne sme dodajati dvovalentnih kovin, kot je cink, saj lahko povzroči obarjanje. V takih primerih se priporočajo Goodovi pufri. Poleg tega je naša raztopina PBS sprejemljiva alternativa mediju za prenos virusov za prenos in shranjevanje virusov RNA, vključno z virusom SARS-CoV-2.

Nadzor kakovosti

Sterilno filtriran


Shranjevanje in rok uporabnosti

Shranjujte pri temperaturi od +2 °C do +25 °C, zaščiteni pred svetlobo.
Po odprtju hranite pri temperaturi od 2 °C do 25 °C in porabite v 24 mesecih.


Pogoji pošiljanja

Temperatura okolja


Vzdrževanje

Hranite v hladilniku pri temperaturi od +2 °C do +8 °C v temi. Izogibajte se zamrzovanju in pogostemu segrevanju na +37 °C, saj to zmanjša kakovost izdelka.
Medija ne segrevajte nad 37 °C in ne uporabljajte nenadzorovanih virov toplote, kot so mikrovalovne naprave.
Če želite uporabiti le del medija, pred uporabo odstranite potrebno količino in jo segrejte na sobno temperaturo.

Sestava



Kategorija
Sestavine
Koncentracija (mg/L)


Soli
Kalijev klorid
200



Kalijev fosfat monobazni brezvodni
200



Natrijev klorid
8000



Natrijev fosfat dvobazni brezvodni
1150

Organizem	Človek
Tkivo	Jetra
Bolezen	Hepatocelularni karcinom