Celice Hep-66.3A

800,00 €*

Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 ⁶ celic za adhezivne linije ali 5 × 10⁶ celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 400206

Varnostni list

List izdelka

Sporazum o prenosu materiala

Opis	Hepatomska celična linija Hep-66.4A je pridobljena iz tumorja jeter miši, natančneje iz seva C57BL/6J. Za to celično linijo je značilno hepatocitno poreklo, ki je potrjeno z analizo proteinov vmesnih filamentov. Hep-66.4A izraža preprosta keratina K8 in K18, ki sta značilna za normalne jetrne celice, ter v različnem obsegu tudi vimentin in keratin K19. Ti proteinski vzorci potrjujejo hepatocitno naravo celične linije in njeno uvrstitev med hepatomske linije. Celična linija Hep-66.4A ima pretežno epitelijsko morfologijo, kar kaže na njen izvor iz hepatocitov. Ta morfološki fenotip je skladen s profilom izražanja beljakovin. Analiza prstnih odtisov DNK Hep-66.4A ni razkrila nobenih večjih strukturnih nepravilnosti, kar kaže na določeno stopnjo genomske stabilnosti. Vendar pa so bile z naraščajočim številom prehodov opažene nekatere spremembe v relativni intenzivnosti določenih pasov, kar kaže na manjšo genomsko spremenljivost v daljših obdobjih gojenja. Kljub odsotnosti zaznavnih mutacij p53 v primarnih tumorjih jeter miši so bile med razmnoževanjem in vitro pri nekaterih hepatomskih linijah ugotovljene aberacije. Celica Hep-66.4A je bila analizirana na mutacije v genih p53 in c-Ha-ras. Odsotnost zaznavnih mutacij v genu p53 v tej liniji v zgodnjih fazah kaže na stabilno genetsko ozadje. Ta celična linija služi kot dragocen model za preučevanje hepatocelularnega karcinoma in omogoča vpogled v celične in molekularne mehanizme, na katerih temelji tumorigeneza jeter.
Organizem	Miška
Tkivo	Jetra
Bolezen	Hepatocelularni karcinom
Sinonimi	HEP-66.3A, 66.3A

Pasma/podvrsta	C57BL/6J
Starost	Odrasli
Spol	Ženske
Morfologija	Epitelijam podobni
Lastnosti rasti	Pripadajoče

Citiranje	Hep-66.3A (kataloška številka Cytion 400206)
Raven biološke varnosti	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_5771

Izražanje beljakovin	Keratin 8, keratin 18, vimentin
Tumorigeni	Da, pri miših B6C3F1
Mutacijski profil	P53 wt

Medij za gojenje	DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Dodatki	Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagent za disociacijo	Accutase
Subkultiviranje	Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočin	Vsakih 3 do 5 dni
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Prevleka za bučke	Nič
Postopek zamrzovanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Sterilnost	Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence. Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.

Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.

Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.

Celice Hep-66.3A

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Nadzor kakovosti / Genetski profil / HLA

Sporazum o prenosu materiala