Celice HT55

430,00 €*

Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 ⁶ celic za adhezivne linije ali 5 × 10⁶ celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 305018

Varnostni list

List izdelka

Sporazum o prenosu materiala

Opis	HT55 je človeška celična linija adenokarcinoma danke, vzpostavljena iz primarnega tumorja danke 54-letne ženske kavkazske rase. Linija raste kot adhezivni monosloj z epitelijsko podobno morfologijo in je v bazi podatkov Cellosaurus registrirana pod oznako CVCL_1294. HT55 nosi več heterozigotnih in homozigotnih mutacij z izgubo funkcije v tumor supresorskem genu APC (adenomatozna polipoza debelega črevesa), vključno s p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr in p.Lys241Ter (vse heterozigotne), pa tudi homozigotno substitucijo p.Arg213Leu. Ta mutacijski profil naredi HT55 za biološko relevanten model kolorektalne karcinogeneze, ki jo povzroča APC, kar odraža motnjo v delovanju kanonične WNT-poti, ki povzroča večino primerov kolorektalnega raka pri ljudeh. HT55 se široko uporablja v raziskavah kolorektalnega raka za študije signalizacije WNT/β-katenina, funkcije tumor supresorja APC, občutljivosti in odpornosti na zdravila ter predklinično ocenjevanje ciljnih zdravil proti komponentam WNT-signalne poti. Linija je primerna za in vitro farmakološke teste in študije ksenotransplantatov v imunokompromitiranih mišjih modelih, saj zagotavlja adhezivno, prilagodljivo in vitro platformo za mehanistične in translacijske raziskave kolorektalnega raka. Prisotnost več mutacij s skrajšanjem gena APC pomeni, da je linija HT55 reprezentativna za mikrosatelitsko stabilen, kromosomsko nestabilen podtip raka debelega črevesa, ki ga pogosto povzroča izguba funkcije APC. HT55 se goji v EMEM (MEM Eagle, w: 2 mM L-glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO₃, w: EBSS; številka izdelka Cytion 820100a), dopolnjenem z 10 % FBS, pri 37 °C v vlažni atmosferi s 5 % CO₂. Celice se subkultivirajo z uporabo Accutase, ko dosežejo približno 80–90 % konfluence, pri čemer je priporočeno razmerje delitve 1:3 do 1:5 in gostota posejanja 1–3 × 10⁴ celic/cm². Gojišče se obnavlja vsakih 2–3 dni. Čas podvojitve je približno 28 ur.
Organizem	Človek
Tkivo	Rektum
Bolezen	Adenokarcinom
Aplikacije	Raziskave raka debelega črevesa in danke; študije poti WNT/APC; testiranje občutljivosti in odpornosti na zdravila; predklinična onkologija; modeli ksenotransplantatov; ocenjevanje ciljnega zdravljenja
Sinonimi	HT55

Starost	54 let
Spol	Ženske
Etnična pripadnost	Kavkaški
Morfologija	Epitelijam podobni
Vrsta celice	Epitelijske celice
Lastnosti rasti	Pripadajoče

Citiranje	HT55 (kataloška številka Cytion 305018)
Raven biološke varnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1294

Mutacijski profil	Mutacija: p.Gln1131Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Gln1303Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Arg1463Ser, heterozigotna; Mutacija: p.Asn581Tyr, heterozigotna; Mutacija: p.Lys241Ter, heterozigotna; Mutacija: p.Arg213Leu, homozigotna

Medij za gojenje	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Dodatki	Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagent za disociacijo	Accutase
Čas podvojitve	28 ur
Subkultiviranje	Odstranite staro gojišče iz prirastlih celic in jih sperite s PBS-om brez kalcija in magnezija. Za T25-kolbe uporabite 3–5 ml PBS-a, za T75-kolbe pa 5–10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1–2 ml za kolbe T25 in 2,5 ml za kolbe T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8–10 minut, da se odlepijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da jih ponovno suspendirate, nato centrifugirajte pri 300×g 3 minute. Supernatant zavrzite, celice ponovno suspendirajte v svežem gojišču in jih prenesite v nove kolbe, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razdelitveno razmerje	1 do 5
Gostota setve	1 do 3 x 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočin	Vsakih 2 do 3 dni
Sredstvo za zamrzovanje	Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Odmrzovanje in gojenje celic	Prepričajte se, da je viala ob dostavi globoko zamrznjena, saj se celice pošiljajo na suhem ledu, da se med prevozom ohranijo optimalne temperature. Po prejemu kriovial takoj shranite pri temperaturi pod -150 °C, da zagotovite ohranitev celične celovitosti, ali pa nadaljujte s korakom 3, če je potrebno takojšnje gojenje. Za takojšnje gojenje vialo hitro odtalite tako, da jo potopite v vodno kopel s čisto vodo in protimikrobnim sredstvom pri 37 °C ter 40-60 sekund nežno mešate, dokler ne ostane majhen ledeni kepica. Vse nadaljnje korake izvajajte v sterilnih pogojih v pretočni nape, pred odprtjem pa kriovial razkužite s 70 % etanolom. Previdno odprite razkuženo vialo in celično suspenzijo prenesite v 15-mililitrsko centrifugirno epruveto, ki vsebuje 8 ml gojišča sobne temperature, ter nežno premešajte. Mešanico centrifugirajte pri 300 x g 3 minute, da ločite celice, in previdno zavrzite supernatant, ki vsebuje ostanke zamrzovalnega gojišča. Pelet celic nežno ponovno suspendirajte v 10 ml svežega gojišča. Pri adherentnih celicah suspenzijo razdelite med dve bučki T25; pri suspenzijskih kulturah prenesite vse gojišče v eno bučko T25, da spodbudite učinkovito interakcijo in rast celic. Upoštevajte uveljavljene protokole subkultur za nadaljnjo rast in vzdrževanje celične linije ter tako zagotovite zanesljive rezultate poskusov.
Inkubacijska atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.
Pogoji pošiljanja	Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
Pogoji shranjevanja	Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Če nameravate celične linije Cytion uporabljati izključno za notranje raziskave na enem raziskovalnem mestu, izpolnite in podpišite našo pogodbo o prenosu materiala (MTA) in jo predložite skupaj z vašim naročilom.

Za vse komercialne namene – vključno z, vendar ne omejeno na, delo za plačilo, testiranje kakovosti, sproščanje izdelkov, diagnostično uporabo ali regulativne študije – izpolnite obrazec za nameravano uporabo, da bomo lahko pripravili ustrezno pogodbo, prilagojeno vašemu projektu.

Opomba: MTA velja le za določene celične linije. Če se to obvestilo in dokument MTA pojavita na strani izdelka, sporazum velja. Za celične linije, ki niso zajete v MTA, se sklic na sporazum ne prikaže. MTA ne velja za stranke v Ameriki, na Kitajskem ali Tajvanu. Za ustrezen sporazum se obrnite na našo ameriško podružnico.

Celice HT55

Splošne informacije

Značilnosti

Regulativni podatki

Biomolekularni podatki

Ravnanje s spletno stranjo

Kontrola kakovosti in molekularna analiza

Sporazum o prenosu materiala