Celice B-LCL-HROG02
777,00 €*
Izdelki se pošiljajo zamrznjeni v suhem ledu v kriotubah. Vsaka kriotuba običajno vsebuje 3 × 10 6 celic za adhezivne linije ali 5 × 106 celic za suspenzijske linije (podrobnosti so navedene v certifikatu o analizi serije).
Splošne informacije
| Opis | B-LCL-HROG02 je človeška B-limfoblastoidna celična linija, transformirana z virusom Epstein-Barr (EBV) (B-LCL), vzpostavljena iz periferne krvi 68-letnega belega moškega z rakom želodca v okviru serije biobanke HROG, ki je ustreznik zbirke B-LCL za kolorektalnega raka HROC pri raku želodca. EBV-posredovana in vitro imortalizacija primarnih B-limfocitov iz periferne krvi je ustvarila stabilno proliferirajočo suspenzijsko celično linijo z morfologijo, podobno limfoblastom. Celice HROG02 konstitutivno izražajo antigene EBV-latentnosti (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) ter visoke ravni molekul HLA razreda I in II, kostimulativnih molekul CD80 in CD86, adhezijskih molekul CD54 in CD58 ter markerjev B-celic CD19, CD20 in CD23. B-LCL-HROG02 se uporablja v funkcionalnih testih T-celic in NK-celic, tipizaciji HLA, reakcijah mešanih limfocitov, študijah predstavitve antigenov ter protokolih indukcije CTL. V okviru biobanke HROG, usklajene s pacienti, zagotavlja opredeljeno imunološko referenco za raziskave raka želodca, kar omogoča avtologne ali alogene študije imunskih odzivov, povezanih s tumorjem. Linija podpira raziskave reaktivnosti T-celic, specifičnih za raka želodca, ter imunoloških testnih sistemov, usklajenih s pacienti, ki so pomembni za imunologijo tumorjev želodca. B-LCL-HROG02 se goji v suspenziji v gojišču RPMI 1640, dopolnjenem z 15–20 % FBS, pri 37 °C v vlažni atmosferi s 5 % CO₂. Celice se vsakih 2–3 dni prenesejo z razredčitvijo na 2–5 × 10⁵ celic/ml. Enzimska disociacija ni potrebna. Vse delo s to EBV-pozitivno celično linijo mora biti v skladu z zahtevami za biološko varnost BSL-2 ter veljavnimi institucionalnimi in nacionalnimi predpisi, ki urejajo z EBV transformirano biološko gradivo. |
|---|---|
| Organizem | Človek |
| Tkivo | Periferna kri |
| Bolezen | EBV-transformirana linija B-limfoblastoidnih celic (B-LCL); darovalec z rakom želodca |
| Aplikacije | Raziskave na področju imunologije; testi T-celic in NK-celic; tipizacija HLA; študije predstavitve antigenov; mešane limfocitne reakcije; ciljne celice za test CTL; imunologija raka želodca |
Značilnosti
| Starost | 68 let |
|---|---|
| Spol | Moški |
| Etnična pripadnost | Kavkaški |
| Morfologija | Limfoblastom podobni |
| Vrsta celice | Limfoblast B |
| Lastnosti rasti | Vzmetenje |
Regulativni podatki
| Citiranje | B-LCL-HROG02 (kataloška številka Cytion 302106) |
|---|---|
| Raven biološke varnosti | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Status GSO | GMO-S2: Ta B-LCL vsebuje stabilno ohranjen EBV-episom, ki kodira gene virusne latentne faze (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV je uvrščen v skupino patogenov tveganja 2. Za ravnanje z njim je potrebna varnostna stopnja BSL-2. Ta uvrstitev velja v Nemčiji; predpisi se v drugih jurisdikcijah lahko razlikujejo. |
Biomolekularni podatki
| Virusi | Transformant: EBV |
|---|
Ravnanje s spletno stranjo
| Medij za gojenje | RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a) |
|---|---|
| Dodatki | Gojilno gojišče dopolnite z 15–20 % FBS |
| Čas podvojitve | 24 do 48 ur |
| Subkultiviranje | Kulturo vsakih 2–3 dni razredčite na 2–5 × 10⁵ celic/ml s svežim, predhodno ogretim popolnim gojiščem. Pred prenosom v novo posodo preštejte živih celic, da ohranite optimalno gostoto. Ne dopustite, da gostota kulture preseže 2 × 10⁶ celic/ml. Po potrebi lahko za zamenjavo gojišča uporabite centrifugiranje (300 × g, 5 min). Enzimska disociacija ni potrebna. |
| Razdelitveno razmerje | 1 do 4 |
| Gostota setve | 2 do 5 × 10⁵ celic/ml |
| Obnova tekočin | Vsakih 2 do 3 dni |
| Sredstvo za zamrzovanje | Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi. |
| Odmrzovanje in gojenje celic |
|
| Inkubacijska atmosfera | 37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje. |
| Pogoji pošiljanja | Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče. |
| Pogoji shranjevanja | Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik. |
Kontrola kakovosti in molekularna analiza
Sporazum s tretjo osebo
Upoštevajte, da ta celična linija ni na voljo v okviru standardnega sporazuma Cytion MTA, saj je zanjo potreben sporazum s tretjo stranjo in/ali se je treba pogajati s prvotnim izdajateljem licence.-
Potrebni izdelki
Potrebni izdelki
Sredstvo za zamrzovanje CM-1 - 50 mlRazličice medijev za krioprezervacijo: 50 mlCytionov medij za zamrzovanje CM-1 je najsodobnejši medij za kriokonzervacijo, ki je zasnovan tako, da zagotavlja najvišjo raven vitalnosti in funkcionalnosti celic po odmrznitvi. To vsestransko gojišče je primerno za širok spekter vrst celic, vključno s človeškimi in živalskimi celicami, zato je bistveno orodje za različne raziskovalne aplikacije. Medij za zamrzovanje CM-1 je oblikovan s skrbno uravnoteženo kombinacijo krioprotektantov in bistvenih hranil, kar zmanjšuje nastajanje ledenih kristalov in celični stres med postopkom zamrzovanja ter tako ohranja celično celovitost.
Ključne značilnosti Freeze Medium CM-1 vključujejo:
Široka združljivost: Učinkovita za širok spekter celičnih vrst, vključno s primarnimi celicami, matičnimi celicami in uveljavljenimi celičnimi linijami.
Visoka sposobnost preživetja: Optimizirano za čim večjo obnovo in vitalnost celic po odmrzovanju, kar zagotavlja zanesljive rezultate poskusov.
Pripravljen za uporabo: Priročno pripravljene in sterilizirane za takojšnjo uporabo, kar zmanjšuje čas priprave in tveganje kontaminacije.
Izboljšana stabilnost: Ohranja dosledno delovanje v standardnih pogojih kriokonzervacije, kar zagotavlja ponovljive rezultate.
Dolg rok trajanja: CM-1 je za uporabo pripravljen medij za kriokonzervacijo, ki vsebuje serum in se lahko v hladilniku hrani do enega leta.
Uporaba CM-1 za zamrzovanje celic
Če želite uporabiti CM-1 za zamrzovanje adherentnih in suspenzijskih celic, sledite naslednjim korakom
Pri adherentnih celicah jih sperite in ločite od podlage za gojenje. Za suspenzijske celice nadaljujte neposredno z naslednjim korakom.
Preštejte celice, da zagotovite njihovo ustrezno koncentracijo.
Celice centrifugirajte, da jih oprašite, nato jih ponovno suspendirajte v gojišču za zamrzovanje CM-1.
Resuspendirane celice prenesite v kriovile.
Pred prenosom celic v dolgoročno skladiščenje uporabite metodo počasnega zamrzovanja
Metoda
Opis
Koraki
❄️
Ročno zamrzovanje
Postopna metoda, ki vključuje postopno zniževanje temperature, da se zagotovi vitalnost celic
1️⃣ Postavite celice v gojišče za zamrzovanje v zamrzovalnik pri 4 °C za 40 minut.
2️⃣ Za 24 ur prenesite v zamrzovalnik pri -80 °C.
3️⃣ Za dolgoročno shranjevanje shranite celice v tekočem dušiku
❄️
Uporaba pripomočka Mr. Frosty
Priročna naprava, ki omogoča nadzorovano hitrost zamrzovanja brez električne energije
1️⃣ Pripravite celice v kriovile z gojiščem za zamrzovanje.
2️⃣ Kriovile postavite v posodo Mr. Frosty.
3️⃣ Pred prenosom v tekoči dušik jih 24 ur hranite pri -80 °C
❄️
Zamrzovalnik z nadzorovano hitrostjo
Zelo natančen zamrzovalnik Thermo Fisher ali drugih proizvajalcev, namenjen nadzorovanemu zniževanju temperature
1️⃣ Napravo sprogramirajte tako, da postopoma znižuje temperaturo.
2️⃣ Pripravljene celice postavite v zamrzovalnik.
3️⃣ Po ciklu zamrzovanja prenesite celice v tekoči dušik
Kriovile shranite pri temperaturi pod -130 °C ali v tekočem dušiku za dolgoročno shranjevanje.
Sestavine
Vsebuje FBS, DMSO, glukozo, soli
Pufrirna sposobnost: pH = 7,2 do 7,6
Sredstvo za zamrzovanje CM-1 podjetja Cytion ponuja zanesljivo rešitev za kriokonzervacijo, ki zagotavlja visoko vitalnost in funkcionalnost celic po odmrznitvi za širok spekter raziskovalnih aplikacij.59,00 €*Raztopina za ločevanje celic Accutase – 100 mlVariante: 100 mlRaztopina za ločevanje celic Accutase z EDTA in fenol rdečim – 100 ml
Accutase je sterilno filtrirana raztopina za ločevanje celic, pripravljena za takojšnjo uporabo, zasnovana kot nežna alternativa tripsinu/EDTA za ločevanje adhezivnih sesalskih celic s standardne plastične posode za tkivno kulturo in površin, prevlečenih z adhezivnim premazom. Združuje proteolitično in kolagenolitično encimsko aktivnost v uravnoteženi solni raztopini, da zagotovi učinkovito, a nadzorovano ločevanje, ohranja proteine na površini celic ter podpira visoko preživetje po prehodu in hitro ponovno pritrditev.
Formulacija Accutase temelji na Dulbeccovem fosfatnem pufru (DPBS) z EDTA in fenol rdečim kot vizualnim indikatorjem pH. Encimi niso živalskega ali bakterijskega izvora, zaradi česar je Accutase še posebej primeren za raziskave matičnih celic, postopke pri razvoju cepiv in vse aplikacije, kjer je treba zmanjšati onesnaževala živalskega ali mikrobiološkega izvora. Raztopina se pri 37 °C samodejno inhibira, zato po ločitvi ni potrebno nevtralizacijsko reagens ali medij, ki vsebuje serum – celice se lahko prenesejo neposredno v svež medij.
Ključne lastnosti
Pripravljena za uporabo 1x sterilno filtrirana tekočina – ni potrebno redčenje ali rekonstitucija
Kombinirana proteolitična in kolagenolitična encimska aktivnost za nežno disociacijo
Vsaka serija je standardizirana na določeno disociacijsko aktivnost za doslednost med serijami
Encimi niso živalskega ali bakterijskega izvora
Samodejna inhibicija pri 37 °C – ni potrebna nevtralizacijska raztopina
Formulirano v Dulbeccovem PBS z EDTA
Vključena fenol rdeča kot vizualni indikator pH
pH 6,8 – 7,8
Tipične uporabe
Accutase nežno razkroji široko paleto adhezivnih in občutljivih celic, vključno s človeškimi embrionalnimi izvorniškimi celicami (hESCs), človeškimi indukiranimi pluripotentnimi izvorniškimi celicami (iPSCs), nevralnimi izvorniškimi celicami, primarnimi nevroni in rutinsko gojenimi adhezivnimi linijami, kot so HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 in A549. Tipični primeri uporabe vključujejo:
Rutinsko subkultiviranje in pasiranje adhezivnih sesalskih celic
Nežno razcepjanje posameznih celic hESCs, iPSCs in drugih občutljivih linij
Priprava vzorcev za pretočno citometrijo in analizo FACS
Analizo markerjev na celični površini, kjer je pomembna integriteta epitopa
Testi migracije, proliferacije in apoptoze celic
Testi mirovanja s pomočjo pomanjkanja seruma in študije transfekcije onkogenov
Testi migracije tumorskih celic in celic nevralnega grebena
Povečanje proizvodnje v delovnih tokovih bioreaktorjev
Za rutinsko delo nanesite približno 10 ml Accutase na 75 cm2 površine kulture in inkubirajte 5–10 minut pri sobni temperaturi. Optimalni čas inkubacije je treba določiti za vsako celično linijo in ne sme presegati ene ure. Pred dodajanjem sperite celični sloj z raztopino soli brez Ca2+/Mg2+, kot je DPBS brez kalcija in magnezija, da odstranite ostanke seruma in dvovalentne katione.
Ravnanje in shranjevanje
Neodprto stekleničko shranjujte zamrznjeno pri -15 °C ali nižji temperaturi. Odtalite pri sobni temperaturi ali čez noč pri +2 °C do +8 °C. Accutase ne odtaljujte v vodni kopeli pri 37 °C, saj višje temperature zmanjšujejo encimsko aktivnost. Po odtalitvi se raztopina lahko shranjuje do 2 mesecev pri +2 °C do +8 °C; ne shranjujte pri sobni temperaturi. Reagenta pred uporabo ne segrevajte na 37 °C – dodajte ga neposredno na oprane celice pri sobni temperaturi. Za daljšo rok uporabnosti priporočamo razdelitev v enkratne odmerke, da se izognete ponavljajočim se ciklom odmrzovanja. Vedno delajte v aseptičnih pogojih.
Kakovost
Izdelano v skladu s strogimi standardi kakovosti. Vsaka serija Accutase je sterilno filtrirana in testirana na sterilnost, pH, videz in disociacijsko aktivnost, da se zagotovi dosledna, ponovljiva učinkovitost med serijami.
Specifikacije izdelka
Specifikacija
Podrobnosti
Vrsta izdelkaReagent za ločevanje/disociacijo celic
OblikaSterilno filtrirana tekočina, pripravljena za uporabo
Količina100 ml
Delovna koncentracija1x (pripravljeno za uporabo)
Encimska aktivnostKombinirana proteolitična in kolagenolitična
Izvor encimovNesestavljen iz sesalcev in bakterij
Puferski sistemDulbeccov PBS z EDTA
Indikator pHFenol rdeča
Območje pH6,8 – 7,8
VidezBistra, bledo rdeča do oranžna raztopina
Temperatura shranjevanja-15 °C ali manj
Stabilnost po odmrzovanjuDo 2 mesecev pri temperaturi od +2 °C do +8 °C
Priporočena količina za uporabo~10 ml na 75 cm2 površine kulture
Tipični čas inkubacije5–10 minut pri sobni temperaturi
Pogoji za pošiljanjeZamrznjeno na suhem ledu
Namen uporabeSamo za raziskovalne namene in nadaljnjo proizvodnjo
Formulacija (sestava na liter)
Sestavina
Koncentracija (mg/l)
Anorganske soli
Natrijev klorid (NaCl)8000,00
Dinatrijev hidrogenfosfat (Na2HPO4)1150,00
Kalijev klorid (KCl)200,00
Kalijev dihidrogenfosfat (KH2PO4)200,00
Druge sestavine
EDTA · 4Na (tetranatrijev EDTA)220,00
Fenol rdeča3,00
Lastniška mešanica encimov (proteolitična in kolagenolitična aktivnost)1x
Accutase je registrirana blagovna znamka podjetja Innovative Cell Technologies, Inc.75,00 €*Raztopina antibiotika/antimikotika (100x)Pregled izdelka
Prostornina: 100 ml Shranjevanje: ≤-15 °C Sterilnost: Sterilnost: Sterilno filtrirano
Antibiotična/antimikotična raztopina (100x ) je sterilen koncentrat, pripravljen za uporabo, namenjen zmanjšanju tveganja mikrobne kontaminacije v celičnih kulturah in sorodnih laboratorijskih aplikacijah. Ta raztopina 100x vsebuje uveljavljeno kombinacijo penicilina, streptomicina in amfotericina B, ki zagotavlja širok spekter protimikrobnega delovanja proti grampozitivnim in gramnegativnim bakterijam, kvasovkam in nitastim glivicam. Formulacija je primerna za uporabo v evkariontskih celičnih kulturah, bakterijskih gojiščih in drugih sistemih, občutljivih na kontaminacijo, ter podpira čiste in dosledne laboratorijske postopke.
Uporaba in prednosti Ta raztopina, optimizirana za rutinske raziskovalne protokole, se pogosto uporablja za vzdrževanje aseptičnih pogojev v delovnih postopkih celičnih kultur. Zagotavlja zanesljivo delovanje v okoljih, občutljivih na kontaminacijo, in raziskovalcem pomaga zmanjšati tveganje za prekomerno rast mikrobov, ne da bi pri tem ogrozili zdravje celic ali ponovljivost poskusov. Sterilno filtrirana formulacija odpravlja potrebo po dodatnih korakih solubilizacije, kar podpira poenostavljeno pripravo gojišč in zmanjšuje variabilnost vsakodnevnih laboratorijskih postopkov.
Uporaba in združljivost Za doseganje standardnih delovnih koncentracij raztopino razredčite v razmerju 1 : 100 v celotnem gojišču. Izdelek je združljiv s številnimi celičnimi linijami sesalcev in osnovnimi gojišči. Zaradi stalne razpoložljivosti zalog imajo raziskovalci koristi od zanesljive neprekinjene oskrbe in poenostavljenega načrtovanja logistike. Raztopino je treba hraniti pri ≤ -15 °C in jo zaščititi pred ponavljajočimi se cikli zamrzovanja in odmrzovanja, da se ohrani stabilnost. Samo za raziskovalno uporabo. Ni za uporabo v diagnostičnih ali terapevtskih postopkih. Ni za uporabo pri ljudeh ali živalih.45,00 €*