CTX-celice

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) je zelo vsestransko in široko uporabljeno osnovno gojišče, zasnovano za podporo rasti različnih celic sesalcev v bioloških raziskavah. Je idealno gojišče za gojenje primarnih fibroblastov, nevronov, glialnih celic, HUVEC, gladkih mišičnih celic ter priljubljenih celičnih linij, kot so HeLa, 293, Cos-7 in PC-12.
DMEM se od drugih gojišč razlikuje po svoji edinstveni sestavi. V primerjavi z originalnim Eagle's Minimal Essential Medium vsebuje štirikrat večjo koncentracijo aminokislin in vitaminov. DMEM je bil sprva razvit z nizko vsebnostjo glukoze (1 g/L) in natrijevega piruvata, zdaj pa se pogosto uporablja z višjo vsebnostjo glukoze, z natrijevim piruvaatom ali brez njega. DMEM ne vsebuje beljakovin, lipidov ali rastnih dejavnikov, zato ga je treba dopolnjevati. Za doseganje optimalne rasti je običajen pristop dodajanje 10 % fetalnega govejega seruma (FBS) v DMEM. Poleg tega DMEM uporablja pufrski sistem natrijevega bikarbonata, ki za vzdrževanje fiziološkega pH zahteva 5-10 % CO2.
Dulbeccovo modificirano orlovo gojišče (DMEM) je zelo cenjeno med določenimi gojišči za celične in tkivne kulture, saj zadovoljuje potrebe po rasti različnih fenotipov adherentnih celic. Z izboljšano dopolnilno formulacijo, znano kot Dulbeccova modifikacija, prekaša izvirno Eaglovo gojišče, razvito v 50. letih prejšnjega stoletja za gojenje piščančjih celic. Ta modifikacija znatno poveča vsebnost izbranih aminokislin in vitaminov do štirikrat v primerjavi z originalnim gojiščem.
Na področju celičnih kultur ima DMEM ključno vlogo kot gojišče za različne vrste celic, vključno s primarnimi celicami, matičnimi celicami in transformiranimi celicami. Raziskovalci uporabljajo modificirano različico DMEM tudi za številne raziskovalne namene, kot so odkrivanje zdravil, tkivno inženirstvo in preučevanje celičnih signalnih poti.

Nadzor kakovosti

Sterilno filtriran


Shranjevanje in rok uporabnosti

Shranjujte pri temperaturi od +2 °C do +8 °C, zaščiteni pred svetlobo.
Po odprtju hranite pri 4 °C in uporabite v 6-8 tednih.


Pogoji pošiljanja

Temperatura okolja


Vzdrževanje

Hranite v hladilniku pri temperaturi od +2 °C do +8 °C v temi. Izogibajte se zamrzovanju in pogostemu segrevanju na +37 °C, saj to zmanjša kakovost izdelka.
Medija ne segrevajte nad 37 °C in ne uporabljajte nenadzorovanih virov toplote, kot so mikrovalovne naprave.
Če želite uporabiti le del medija, pred uporabo odstranite potrebno količino in jo segrejte na sobno temperaturo.


Sestava



Kategorija
Sestavine
Koncentracija (mg/L)


Aminokisline
Glicin
30.00



L-arginin HCl
84.00



L-cistin 2 HCl
62.57



L-glutamin
584.00



L-histidin HClH2O
42.00



L-izolevcin
105.00



L-levcin
105.00



L-lizin HCl
146.00



L-metionin
30.00



L-fenilalanin
66.00



L-serin
42.00



L-treonin
95.00



L-triptofan
16.00



L-tirozin 2 Na 2H2O
103.79



L-valin
94.00


Vitamini
Holin klorid
4.00



D-kalcijev pantotenat
4.00



Folna kislina
4.00



mio-nizitol
7.20



Nikotinamid
4.00



Piridoksal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Tiamin HCl
4.00


Anorganske soli
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Druge sestavine
D-glukoza
4500.00



Natrijeva sol fenol rdečega
15.90



Natrijev piruvat
110.00

Raztopina za ločevanje celic Accutase z EDTA in fenol rdečim – 100 ml

Accutase je sterilno filtrirana raztopina za ločevanje celic, pripravljena za takojšnjo uporabo, zasnovana kot nežna alternativa tripsinu/EDTA za ločevanje adhezivnih sesalskih celic s standardne plastične posode za tkivno kulturo in površin, prevlečenih z adhezivnim premazom. Združuje proteolitično in kolagenolitično encimsko aktivnost v uravnoteženi solni raztopini, da zagotovi učinkovito, a nadzorovano ločevanje, ohranja proteine na površini celic ter podpira visoko preživetje po prehodu in hitro ponovno pritrditev.

Formulacija Accutase temelji na Dulbeccovem fosfatnem pufru (DPBS) z EDTA in fenol rdečim kot vizualnim indikatorjem pH. Encimi niso živalskega ali bakterijskega izvora, zaradi česar je Accutase še posebej primeren za raziskave matičnih celic, postopke pri razvoju cepiv in vse aplikacije, kjer je treba zmanjšati onesnaževala živalskega ali mikrobiološkega izvora. Raztopina se pri 37 °C samodejno inhibira, zato po ločitvi ni potrebno nevtralizacijsko reagens ali medij, ki vsebuje serum – celice se lahko prenesejo neposredno v svež medij.

Ključne lastnosti

Pripravljena za uporabo 1x sterilno filtrirana tekočina – ni potrebno redčenje ali rekonstitucija
Kombinirana proteolitična in kolagenolitična encimska aktivnost za nežno disociacijo
Vsaka serija je standardizirana na določeno disociacijsko aktivnost za doslednost med serijami
Encimi niso živalskega ali bakterijskega izvora
Samodejna inhibicija pri 37 °C – ni potrebna nevtralizacijska raztopina
Formulirano v Dulbeccovem PBS z EDTA
Vključena fenol rdeča kot vizualni indikator pH
pH 6,8 – 7,8


Tipične uporabe
Accutase nežno razkroji široko paleto adhezivnih in občutljivih celic, vključno s človeškimi embrionalnimi izvorniškimi celicami (hESCs), človeškimi indukiranimi pluripotentnimi izvorniškimi celicami (iPSCs), nevralnimi izvorniškimi celicami, primarnimi nevroni in rutinsko gojenimi adhezivnimi linijami, kot so HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 in A549. Tipični primeri uporabe vključujejo:

Rutinsko subkultiviranje in pasiranje adhezivnih sesalskih celic
Nežno razcepjanje posameznih celic hESCs, iPSCs in drugih občutljivih linij
Priprava vzorcev za pretočno citometrijo in analizo FACS
Analizo markerjev na celični površini, kjer je pomembna integriteta epitopa
Testi migracije, proliferacije in apoptoze celic
Testi mirovanja s pomočjo pomanjkanja seruma in študije transfekcije onkogenov
Testi migracije tumorskih celic in celic nevralnega grebena
Povečanje proizvodnje v delovnih tokovih bioreaktorjev

Za rutinsko delo nanesite približno 10 ml Accutase na 75 cm2 površine kulture in inkubirajte 5–10 minut pri sobni temperaturi. Optimalni čas inkubacije je treba določiti za vsako celično linijo in ne sme presegati ene ure. Pred dodajanjem sperite celični sloj z raztopino soli brez Ca2+/Mg2+, kot je DPBS brez kalcija in magnezija, da odstranite ostanke seruma in dvovalentne katione.

Ravnanje in shranjevanje
Neodprto stekleničko shranjujte zamrznjeno pri -15 °C ali nižji temperaturi. Odtalite pri sobni temperaturi ali čez noč pri +2 °C do +8 °C. Accutase ne odtaljujte v vodni kopeli pri 37 °C, saj višje temperature zmanjšujejo encimsko aktivnost. Po odtalitvi se raztopina lahko shranjuje do 2 mesecev pri +2 °C do +8 °C; ne shranjujte pri sobni temperaturi. Reagenta pred uporabo ne segrevajte na 37 °C – dodajte ga neposredno na oprane celice pri sobni temperaturi. Za daljšo rok uporabnosti priporočamo razdelitev v enkratne odmerke, da se izognete ponavljajočim se ciklom odmrzovanja. Vedno delajte v aseptičnih pogojih.

Kakovost
Izdelano v skladu s strogimi standardi kakovosti. Vsaka serija Accutase je sterilno filtrirana in testirana na sterilnost, pH, videz in disociacijsko aktivnost, da se zagotovi dosledna, ponovljiva učinkovitost med serijami.

Specifikacije izdelka



Specifikacija
Podrobnosti



Vrsta izdelkaReagent za ločevanje/disociacijo celic
OblikaSterilno filtrirana tekočina, pripravljena za uporabo
Količina100 ml
Delovna koncentracija1x (pripravljeno za uporabo)
Encimska aktivnostKombinirana proteolitična in kolagenolitična
Izvor encimovNesestavljen iz sesalcev in bakterij
Puferski sistemDulbeccov PBS z EDTA
Indikator pHFenol rdeča
Območje pH6,8 – 7,8
VidezBistra, bledo rdeča do oranžna raztopina
Temperatura shranjevanja-15 °C ali manj
Stabilnost po odmrzovanjuDo 2 mesecev pri temperaturi od +2 °C do +8 °C
Priporočena količina za uporabo~10 ml na 75 cm2 površine kulture
Tipični čas inkubacije5–10 minut pri sobni temperaturi
Pogoji za pošiljanjeZamrznjeno na suhem ledu
Namen uporabeSamo za raziskovalne namene in nadaljnjo proizvodnjo



Formulacija (sestava na liter)



Sestavina
Koncentracija (mg/l)




Anorganske soli

Natrijev klorid (NaCl)8000,00
Dinatrijev hidrogenfosfat (Na2HPO4)1150,00
Kalijev klorid (KCl)200,00
Kalijev dihidrogenfosfat (KH2PO4)200,00

Druge sestavine

EDTA · 4Na (tetranatrijev EDTA)220,00
Fenol rdeča3,00
Lastniška mešanica encimov (proteolitična in kolagenolitična aktivnost)1x



Accutase je registrirana blagovna znamka podjetja Innovative Cell Technologies, Inc.

Pregled izdelka
Prostornina: 100 ml Shranjevanje: ≤-15 °C Sterilnost: Sterilnost: Sterilno filtrirano
Antibiotična/antimikotična raztopina (100x ) je sterilen koncentrat, pripravljen za uporabo, namenjen zmanjšanju tveganja mikrobne kontaminacije v celičnih kulturah in sorodnih laboratorijskih aplikacijah. Ta raztopina 100x vsebuje uveljavljeno kombinacijo penicilina, streptomicina in amfotericina B, ki zagotavlja širok spekter protimikrobnega delovanja proti grampozitivnim in gramnegativnim bakterijam, kvasovkam in nitastim glivicam. Formulacija je primerna za uporabo v evkariontskih celičnih kulturah, bakterijskih gojiščih in drugih sistemih, občutljivih na kontaminacijo, ter podpira čiste in dosledne laboratorijske postopke.
Uporaba in prednosti Ta raztopina, optimizirana za rutinske raziskovalne protokole, se pogosto uporablja za vzdrževanje aseptičnih pogojev v delovnih postopkih celičnih kultur. Zagotavlja zanesljivo delovanje v okoljih, občutljivih na kontaminacijo, in raziskovalcem pomaga zmanjšati tveganje za prekomerno rast mikrobov, ne da bi pri tem ogrozili zdravje celic ali ponovljivost poskusov. Sterilno filtrirana formulacija odpravlja potrebo po dodatnih korakih solubilizacije, kar podpira poenostavljeno pripravo gojišč in zmanjšuje variabilnost vsakodnevnih laboratorijskih postopkov.
Uporaba in združljivost Za doseganje standardnih delovnih koncentracij raztopino razredčite v razmerju 1 : 100 v celotnem gojišču. Izdelek je združljiv s številnimi celičnimi linijami sesalcev in osnovnimi gojišči. Zaradi stalne razpoložljivosti zalog imajo raziskovalci koristi od zanesljive neprekinjene oskrbe in poenostavljenega načrtovanja logistike. Raztopino je treba hraniti pri ≤ -15 °C in jo zaščititi pred ponavljajočimi se cikli zamrzovanja in odmrzovanja, da se ohrani stabilnost. Samo za raziskovalno uporabo. Ni za uporabo v diagnostičnih ali terapevtskih postopkih. Ni za uporabo pri ljudeh ali živalih.