Celulele Hep2 și rolul lor în cercetarea cancerului laringian
Celulele Hep 2 reprezintă un model in vitro esențial, utilizat pe scară largă în diverse domenii ale cercetării biomedicale, precum reumatologia, cercetarea cancerului și imunologia. Provenind din carcinomul laringian, aceste celule umane au jucat un rol fundamental în elucidarea țesutului de origine și a trăsăturilor specifice ale neoplasmelor laringiene. Importanța lor este bine recunoscută în cercetarea translațională a cancerului, unde au contribuit în mare măsură la înțelegerea naturii laringiene și a originii cancerelor, marcând o prezență substanțială în publicațiile de cercetare privind cancerul laringian [1].
- Mediu de creștere
- EMEM sau mediul esențial minim Eagle este utilizat pentru cultivarea celulelor Hep 2. Acest mediu este suplimentat cu 10% FBS, 1,0 g/L glucoză, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamină, 1% NEAA și 1 mM piruvat de sodiu pentru o creștere celulară ideală. Mediul trebuie reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.
- Timp de dublare
- Timpul de dublare raportat pentru celulele Hep 2 este de aproximativ 40 de ore.
- Tipul de creștere
- Celulele Hep 2 sunt aderente și cresc în monostraturi.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați Hep2
Originea și caracteristicile generale ale celulelor Hep 2
Originea și caracteristicile generale ale unei linii celulare definesc aplicabilitatea acesteia în cercetare. Această secțiune vă va ajuta să aflați mai multe despre originea și unele caracteristici importante ale celulelor Hep 2. De exemplu, veți afla: Ce este linia celulară HEp-2? Care este sursa celulelor Hep 2? Și care este morfologia Hep 2?
- Hep 2, o linie celulară epitelială umană imortală, a fost descrisă pentru prima dată de H.W. Toolan ca celule de carcinom laringian în 1954. Cu toate acestea, recent s-a raportat că linia celulară Hep 2 este compusă din celule de adenocarcinom cervical și provine din contaminarea liniei celulare Hela [2].
- Celulele Hep 2 conțin cromozomi marcatori Hela și sunt pozitive pentru keratină și secvențe de ADN ale virusului papiloma uman, așa cum s-a confirmat prin colorarea cu imunoperoxidază și, respectiv, prin PCR.
- Derivatul liniei celulare Hela, Hep 2, are o morfologie de tip epitelial.
- Linia celulară Hep 2 prezintă atât aberații cromozomiale structurale, cât și numerice, cu un cariotip aproape triploid [3].
Linia celulară Hep 2: Informații privind cultivarea
Înainte de a lucra cu o linie celulară, trebuie să cunoaștem următoarele puncte cheie pentru cultivarea acesteia. Aceste informații pot fi utile pentru cultivarea și menținerea eficientă a liniei celulare. Trebuie să știți: Care este timpul de dublare al celulelor HEp-2? Celulele Hep 2 sunt aderente? Care este densitatea de însămânțare a celulelor Hep2?
Timpul de dublare a populației:
Timpul de dublare raportat pentru celulele Hep 2 este de aproximativ 40 de ore.
Aderente sau în suspensie:
Celulele Hep 2 sunt aderente și cresc în monostraturi.
Densitatea de însămânțare:
O densitate de însămânțare de 1 x 104 celule/cm2 este ideală pentru cultura de celule Hep 2. Pentru însămânțare, celulele Hep 2 aderente sunt clătite cu soluție 1 x PBS, urmată de incubare cu soluție de disociere Accutase. După o incubare de 8–10 minute la temperatura camerei, celulele sunt resuspendate în mediu și centrifugate. Celulele colectate sunt apoi distribuite în mediu proaspăt și turnate în flacoane noi pentru cultivare.
Mediu de creștere:
EMEM sau mediul esențial minim Eagle este utilizat pentru cultivarea celulelor Hep 2. Acest mediu este suplimentat cu 10% FBS, 1,0 g/L glucoză, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamină, 1% NEAA și 1 mM piruvat de sodiu pentru o creștere celulară ideală. Mediul trebuie reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:
La fel ca alte linii celulare de mamifere, Hep 2 este, de asemenea, cultivată într-un incubator umidificat, setat la o temperatură de 37 °C și cu o alimentare continuă cu 5% CO2.
Depozitare:
Celulele Hep 2 pot fi depozitate în congelatoare electrice la temperaturi extrem de scăzute (sub -150 °C) sau în fază de vapori de azot lichid pentru depozitare pe termen lung.
Procesul de congelare și mediul:
Mediile de congelare recomandate pentru celulele Hep 2 sunt CM-1 sau CM-ACF. Celulele trebuie congelate folosind un proces de congelare lentă care permite o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C și protejează viabilitatea celulară.
Procesul de decongelare:
Flaconul cu celule congelate se decongelează rapid prin agitare într-o baie de apă la 37 °C până când rămâne doar un mic bulgăre de gheață. Celulele sunt apoi adăugate în mediu proaspăt și centrifugate pentru a îndepărta componentele mediului de congelare. Ulterior, peleta celulară este resuspendată în mediu, iar celulele sunt distribuite în flacoane de cultură. Celulele trebuie să se odihnească aproape 24 de ore pentru a adera.
Nivel de biosecuritate
Se recomandă un laborator de nivel 1 de biosecuritate pentru manipularea și întreținerea culturilor de celule Hep 2.
Avantajele și limitările liniilor celulare Hep 2
Aproape toate liniile celulare prezintă o combinație unică de avantaje și limitări care contribuie la utilizarea lor în domeniul cercetării. Această secțiune va descrie câteva dintre principalele avantaje și dezavantaje asociate cu linia celulară Hep 2.
Avantaje
Principalele avantaje ale liniei celulare Hep 2 sunt:
- Origine umană: Hep 2 este derivată din celule epiteliale umane, ceea ce o face un model in vitro valoros pentru studierea bolilor umane și a infecțiilor virale.
- Detectarea ANA: Linia celulară Hep 2 posedă o matrice proteică nativă care prezintă numeroși antigeni, ceea ce o face un substrat excelent pentru detectarea anticorpilor antinucleari (ANA). Această caracteristică permite screeningul specific și extrem de sensibil al ANA în ser, făcând-o un instrument de diagnostic crucial pentru identificarea bolilor țesutului conjunctiv.
Limitări
- Anomalii cromozomiale: Celulele Hep 2 prezintă multiple anomalii cromozomiale numerice și structurale. Aceste anomalii pot afecta comportamentul celular și pot limita aplicabilitatea lor în anumite experimente de laborator.
- Tumorigeneitate: Hep 2, o linie celulară epitelială umană derivată din tumoră, poate prezenta anomalii genetice care, de obicei, sunt absente în celulele epiteliale. În consecință, utilizarea celulelor Hep 2 ar putea fi limitată în anumite studii care se concentrează pe fiziologia celulară normală.
Extinderea aplicațiilor liniei celulare Hep 2 în cercetarea biomedicală
Linia celulară Hep 2 se remarcă ca un model exemplar pentru o multitudine de aplicații în cadrul cercetării biomedicale. Renumite pentru versatilitatea lor, aceste celule joacă un rol esențial în experimentele in vitro, de la analiza receptorilor până la studiul bolilor complexe.
Explorarea mecanismelor tumorigene și a țintelor terapeutice cu celule Hep 2
Celulele Hep 2, fiind tumorigene, sunt esențiale pentru aprofundarea complexității biologiei cancerului. Ele oferă informații despre căile de semnalizare ale cancerului, studii mecaniciste și constituie un pilon în screeningul și evaluarea medicamentelor anticanceroase. De exemplu, un studiu revelator a utilizat Hep 2 pentru a delimita influența miRNA-33a asupra proliferării celulelor canceroase. Rezultatele au evidențiat efectele antiproliferative ale miRNA-33a prin interacțiunea sa cu PIM1, un oncogen cunoscut, sugerând o nouă țintă terapeutică [4]. Într-un alt caz, Hep 2 a fost utilizat pentru evaluarea potențialului terapeutic al nanoparticulelor de oxid de zinc Marsdenia tenacissima, evidențiind eficacitatea lor antiproliferativă și apoptotică [5].
Avansarea cercetării în virologie cu ajutorul informațiilor obținute din celulele Hep 2
Susceptibilitatea celulelor Hep 2 la diverse virusuri umane le face o resursă neprețuită în cercetarea virologică. Acestea au fost utilizate în mod eficient în expresia genelor virale SARS-CoV-2 pentru a dezvălui interacțiunea complexă dintre virus și mecanismele celulare gazdă [6]. Această aplicație este deosebit de importantă în era actuală, în care înțelegerea și combaterea infecțiilor virale precum COVID-19 reprezintă o prioritate globală.
Descifrarea funcțiilor celulare: manipularea genelor în celulele Hep 2
Adaptabilitatea liniei celulare Hep 2 la manipularea genetică subliniază utilitatea acesteia în studiile mecaniciste. Cercetătorii profită de această caracteristică pentru a modula expresia genică și a elucida rolurile genelor specifice în funcțiile celulare. Un studiu notabil a implicat supraexpresia proteinei de legare a ARN-ului RBM6 în celulele Hep 2, ceea ce a facilitat investigarea potențialului său de supresor tumoral, oferind informații valoroase despre bazele moleculare ale cancerului [7].
Îmbunătățirea diagnosticării bolilor prin aplicațiile liniei celulare Hep 2
Dincolo de aceste domenii de cercetare, celulele Hep 2 sunt apreciate pentru capacitățile lor de diagnostic, în special în detectarea ANA, care sunt esențiale în diagnosticul bolilor autoimune, cum ar fi lupusul eritematos sistemic. Precizia cu care celulele Hep 2 pot prezenta ANA susține diagnosticul și dezvoltarea tratamentelor țintite, îmbunătățind înțelegerea noastră asupra patologiilor autoimune și îmbunătățind îngrijirea pacienților.
Prin aceste diverse aplicații, celulele Hep 2 au contribuit semnificativ la progresele înregistrate în cercetarea translațională a cancerului, studiul infecțiilor virale și explorarea mecanismelor celulare. Contribuția lor la generarea de date relevante din punct de vedere clinic este de neprețuit, confirmând rolul lor indispensabil atât în laborator, cât și în clinică. Pe măsură ce cercetarea continuă să evolueze, linia celulară Hep 2 va rămâne cu siguranță în prim-plan, contribuind la descoperirea de noi tratamente și la extinderea cunoștințelor noastre despre sănătatea și bolile umane.
Asigurați-vă astăzi linia celulară HEp-2
Celulele Hep 2: Publicații de cercetare
Următoarele sunt câteva publicații de cercetare interesante și cele mai citate privind celulele Hep 2.
- Sinteza nanoparticulelor de oxid de zinc din Marsdenia tenacissima inhibă proliferarea celulară și induce apoptoza în celulele canceroase laringiene (Hep-2)
Acest articol publicat în Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019) a explorat potențialul anticancerigen al nanoparticulelor de oxid de zinc biosintetizate din Marsdenia tenacissima în linia celulară Hep 2. - Nanoparticulele PLGA încărcate cu hesperidină, formulate biologic, contracarează calea apoptotică intrinsecă mediată de mitocondrii în celulele
canceroase Acest articol a fost publicat în Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials în 2021. Acest studiu a examinat proprietățile anticanceroase ale nanoparticulelor de polilactic-co-glicolic (PLGA) încărcate cu hesperidină bioformulate în celulele Hep 2. - Activitatea antivirală a extractului de etanol din Lophatherum gracile împotriva infecției
cu virusul sincitial respirator Această publicație din Journal of Ethnopharmacology din 2019 a utilizat celule Hep 2 pentru a studia infecția cu virusul sincitial respirator și pentru a selecta medicamente antivirale împotriva acestuia. Studiul a raportat potențialul antiviral promițător al extractului de etanol dintr-o plantă medicinală, și anume Lophatherum gracile, împotriva infecției cu virusul sincitial respirator. - Evaluarea extractelor apoase din patru plante aromatice pentru activitatea lor împotriva aderenței Candida albicans la celulele
epiteliale umane HEp-2 Această cercetare este publicată în Gene Reports (2020). Acest studiu a explorat potențialul inhibitor al extractelor apoase din patru plante aromatice împotriva aderenței Candida albicans la celulele epiteliale umane Hep 2. - Proteina de semnalizare 1 inducibilă de Wnt1 reglează glicoliza și rezistența la chimioterapie a carcinomului cu celule scuamoase laringiene prin intermediul căii
YAP1/TEAD1/GLUT1. Acest studiu a fost publicat în Journal of Cellular Physiology în 2019. Studiul raportează că proteina de semnalizare 1 inducibilă de Wnt1 (WISP1) interacționează cu calea YAP1/TEAD1/GLUT1 și reglează metabolismul glucozei și rezistența la chimioterapie în linia celulară Hep 2.
Resurse pentru linia celulară Hep2: protocoale, videoclipuri și multe altele
Hep 2 este o linie celulară binecunoscută. Există mai multe resurse disponibile care prezintă linia celulară Hep 2.
- Subcultivarea liniei celulare Hep 2: Acest videoclip este un ghid pas cu pas pentru subcultivarea celulelor Hep 2.
- Screeningul ANA al celulelor Hep 2: Acest videoclip explică screeningul anticorpilor antinucleari (ANA) folosind linia celulară Hep 2.
- Cultivarea Hep 2: Acest link conține informații de bază despre cultura celulară a celulelor Hep 2. Acesta include divizarea, congelarea și decongelarea celulelor.
Întrebări frecvente despre celulele HEp-2 în cercetarea biomedicală
Referințe
- Fusi, M. și S. Dotti, Adaptarea liniei celulare HEp-2 la sisteme de cultură complet fără componente de origine animală și analiza în timp real a creșterii celulare. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
- Gorphe, P., O analiză cuprinzătoare a liniei celulare Hep-2 în cercetarea translațională pentru cancerul laringian. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
- Wang, M., et al., Fibroblastele asociate cancerului dintr-o tumoare laringiană xenotransplantată stabilită pe linia celulară umană HEp-2 nu sunt derivate din celule canceroase prin tranziție epitelial-mezenchimală, fiind activate fenotipic, dar normale din punct de vedere cariotipic. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
- Karatas, O.F., Potențialul antiproliferativ al miR-33a în celulele Hep-2 ale cancerului laringian prin țintirea PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
- Wang, Y., et al., Sinteza nanoparticulelor de oxid de zinc din Marsdenia tenacissima inhibă proliferarea celulară și induce apoptoza în celulele canceroase laringiene (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
- Zhang, J., et al., Un studiu sistemic și molecular al localizării subcelulare a proteinelor SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
- Wang, Q., et al., Proteina de legare a ARN-ului RBM6, ca gen supresor tumoral, reprimă creșterea și progresia carcinomului laringian. Gene, 2019. 697: p. 26-34.
