Du-te la pagina de pornire

Celulele Hep2 și rolul lor în cercetarea cancerului laringian

Celulele Hep 2 reprezintă un model in vitro esențial, utilizat pe scară largă în diverse domenii ale cercetării biomedicale, precum reumatologia, cercetarea cancerului și imunologia. Provenind din carcinomul laringian, aceste celule umane au jucat un rol fundamental în elucidarea țesutului de origine și a trăsăturilor specifice ale neoplasmelor laringiene. Importanța lor este bine recunoscută în cercetarea translațională a cancerului, unde au contribuit în mare măsură la înțelegerea naturii laringiene și a originii cancerelor, marcând o prezență substanțială în publicațiile de cercetare privind cancerul laringian [1].

📋 Linia celulară Hep2 — Informații succinte
Mediu de creștere
EMEM sau mediul esențial minim Eagle este utilizat pentru cultivarea celulelor Hep 2. Acest mediu este suplimentat cu 10% FBS, 1,0 g/L glucoză, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamină, 1% NEAA și 1 mM piruvat de sodiu pentru o creștere celulară ideală. Mediul trebuie reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.
Timp de dublare
Timpul de dublare raportat pentru celulele Hep 2 este de aproximativ 40 de ore.
Tipul de creștere
Celulele Hep 2 sunt aderente și cresc în monostraturi.
Nivel de biosecuritate
BSL-1
Disponibil de la
Cytion — Comandați Hep2

Originea și caracteristicile generale ale celulelor Hep 2

Originea și caracteristicile generale ale unei linii celulare definesc aplicabilitatea acesteia în cercetare. Această secțiune vă va ajuta să aflați mai multe despre originea și unele caracteristici importante ale celulelor Hep 2. De exemplu, veți afla: Ce este linia celulară HEp-2? Care este sursa celulelor Hep 2? Și care este morfologia Hep 2?

  • Hep 2, o linie celulară epitelială umană imortală, a fost descrisă pentru prima dată de H.W. Toolan ca celule de carcinom laringian în 1954. Cu toate acestea, recent s-a raportat că linia celulară Hep 2 este compusă din celule de adenocarcinom cervical și provine din contaminarea liniei celulare Hela [2].
  • Celulele Hep 2 conțin cromozomi marcatori Hela și sunt pozitive pentru keratină și secvențe de ADN ale virusului papiloma uman, așa cum s-a confirmat prin colorarea cu imunoperoxidază și, respectiv, prin PCR.
  • Derivatul liniei celulare Hela, Hep 2, are o morfologie de tip epitelial.
  • Linia celulară Hep 2 prezintă atât aberații cromozomiale structurale, cât și numerice, cu un cariotip aproape triploid [3].

Diviziunea celulelor HeLa de cancer cervical la microscop.

Linia celulară Hep 2: Informații privind cultivarea

Înainte de a lucra cu o linie celulară, trebuie să cunoaștem următoarele puncte cheie pentru cultivarea acesteia. Aceste informații pot fi utile pentru cultivarea și menținerea eficientă a liniei celulare. Trebuie să știți: Care este timpul de dublare al celulelor HEp-2? Celulele Hep 2 sunt aderente? Care este densitatea de însămânțare a celulelor Hep2?

 

Timpul de dublare a populației:

Timpul de dublare raportat pentru celulele Hep 2 este de aproximativ 40 de ore.

Aderente sau în suspensie:

Celulele Hep 2 sunt aderente și cresc în monostraturi.

Densitatea de însămânțare:

O densitate de însămânțare de 1 x 104 celule/cm2 este ideală pentru cultura de celule Hep 2. Pentru însămânțare, celulele Hep 2 aderente sunt clătite cu soluție 1 x PBS, urmată de incubare cu soluție de disociere Accutase. După o incubare de 8–10 minute la temperatura camerei, celulele sunt resuspendate în mediu și centrifugate. Celulele colectate sunt apoi distribuite în mediu proaspăt și turnate în flacoane noi pentru cultivare.

Mediu de creștere:

EMEM sau mediul esențial minim Eagle este utilizat pentru cultivarea celulelor Hep 2. Acest mediu este suplimentat cu 10% FBS, 1,0 g/L glucoză, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamină, 1% NEAA și 1 mM piruvat de sodiu pentru o creștere celulară ideală. Mediul trebuie reînnoit de 2-3 ori pe săptămână.

Condiții de creștere:

La fel ca alte linii celulare de mamifere, Hep 2 este, de asemenea, cultivată într-un incubator umidificat, setat la o temperatură de 37 °C și cu o alimentare continuă cu 5% CO2.

Depozitare:

Celulele Hep 2 pot fi depozitate în congelatoare electrice la temperaturi extrem de scăzute (sub -150 °C) sau în fază de vapori de azot lichid pentru depozitare pe termen lung.

Procesul de congelare și mediul:

Mediile de congelare recomandate pentru celulele Hep 2 sunt CM-1 sau CM-ACF. Celulele trebuie congelate folosind un proces de congelare lentă care permite o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C și protejează viabilitatea celulară.

Procesul de decongelare:

Flaconul cu celule congelate se decongelează rapid prin agitare într-o baie de apă la 37 °C până când rămâne doar un mic bulgăre de gheață. Celulele sunt apoi adăugate în mediu proaspăt și centrifugate pentru a îndepărta componentele mediului de congelare. Ulterior, peleta celulară este resuspendată în mediu, iar celulele sunt distribuite în flacoane de cultură. Celulele trebuie să se odihnească aproape 24 de ore pentru a adera.

Nivel de biosecuritate

Se recomandă un laborator de nivel 1 de biosecuritate pentru manipularea și întreținerea culturilor de celule Hep 2.

Hep2 cells

Celule Hep 2 înainte și după atingerea confluenței.

Avantajele și limitările liniilor celulare Hep 2

Aproape toate liniile celulare prezintă o combinație unică de avantaje și limitări care contribuie la utilizarea lor în domeniul cercetării. Această secțiune va descrie câteva dintre principalele avantaje și dezavantaje asociate cu linia celulară Hep 2.

Avantaje

Principalele avantaje ale liniei celulare Hep 2 sunt:

  • Origine umană: Hep 2 este derivată din celule epiteliale umane, ceea ce o face un model in vitro valoros pentru studierea bolilor umane și a infecțiilor virale.
  • Detectarea ANA: Linia celulară Hep 2 posedă o matrice proteică nativă care prezintă numeroși antigeni, ceea ce o face un substrat excelent pentru detectarea anticorpilor antinucleari (ANA). Această caracteristică permite screeningul specific și extrem de sensibil al ANA în ser, făcând-o un instrument de diagnostic crucial pentru identificarea bolilor țesutului conjunctiv.

Limitări

  • Anomalii cromozomiale: Celulele Hep 2 prezintă multiple anomalii cromozomiale numerice și structurale. Aceste anomalii pot afecta comportamentul celular și pot limita aplicabilitatea lor în anumite experimente de laborator.
  • Tumorigeneitate: Hep 2, o linie celulară epitelială umană derivată din tumoră, poate prezenta anomalii genetice care, de obicei, sunt absente în celulele epiteliale. În consecință, utilizarea celulelor Hep 2 ar putea fi limitată în anumite studii care se concentrează pe fiziologia celulară normală.

Extinderea aplicațiilor liniei celulare Hep 2 în cercetarea biomedicală

Linia celulară Hep 2 se remarcă ca un model exemplar pentru o multitudine de aplicații în cadrul cercetării biomedicale. Renumite pentru versatilitatea lor, aceste celule joacă un rol esențial în experimentele in vitro, de la analiza receptorilor până la studiul bolilor complexe.

Explorarea mecanismelor tumorigene și a țintelor terapeutice cu celule Hep 2

Celulele Hep 2, fiind tumorigene, sunt esențiale pentru aprofundarea complexității biologiei cancerului. Ele oferă informații despre căile de semnalizare ale cancerului, studii mecaniciste și constituie un pilon în screeningul și evaluarea medicamentelor anticanceroase. De exemplu, un studiu revelator a utilizat Hep 2 pentru a delimita influența miRNA-33a asupra proliferării celulelor canceroase. Rezultatele au evidențiat efectele antiproliferative ale miRNA-33a prin interacțiunea sa cu PIM1, un oncogen cunoscut, sugerând o nouă țintă terapeutică [4]. Într-un alt caz, Hep 2 a fost utilizat pentru evaluarea potențialului terapeutic al nanoparticulelor de oxid de zinc Marsdenia tenacissima, evidențiind eficacitatea lor antiproliferativă și apoptotică [5].

Avansarea cercetării în virologie cu ajutorul informațiilor obținute din celulele Hep 2

Susceptibilitatea celulelor Hep 2 la diverse virusuri umane le face o resursă neprețuită în cercetarea virologică. Acestea au fost utilizate în mod eficient în expresia genelor virale SARS-CoV-2 pentru a dezvălui interacțiunea complexă dintre virus și mecanismele celulare gazdă [6]. Această aplicație este deosebit de importantă în era actuală, în care înțelegerea și combaterea infecțiilor virale precum COVID-19 reprezintă o prioritate globală.

Descifrarea funcțiilor celulare: manipularea genelor în celulele Hep 2

Adaptabilitatea liniei celulare Hep 2 la manipularea genetică subliniază utilitatea acesteia în studiile mecaniciste. Cercetătorii profită de această caracteristică pentru a modula expresia genică și a elucida rolurile genelor specifice în funcțiile celulare. Un studiu notabil a implicat supraexpresia proteinei de legare a ARN-ului RBM6 în celulele Hep 2, ceea ce a facilitat investigarea potențialului său de supresor tumoral, oferind informații valoroase despre bazele moleculare ale cancerului [7].

Îmbunătățirea diagnosticării bolilor prin aplicațiile liniei celulare Hep 2

Dincolo de aceste domenii de cercetare, celulele Hep 2 sunt apreciate pentru capacitățile lor de diagnostic, în special în detectarea ANA, care sunt esențiale în diagnosticul bolilor autoimune, cum ar fi lupusul eritematos sistemic. Precizia cu care celulele Hep 2 pot prezenta ANA susține diagnosticul și dezvoltarea tratamentelor țintite, îmbunătățind înțelegerea noastră asupra patologiilor autoimune și îmbunătățind îngrijirea pacienților.

Prin aceste diverse aplicații, celulele Hep 2 au contribuit semnificativ la progresele înregistrate în cercetarea translațională a cancerului, studiul infecțiilor virale și explorarea mecanismelor celulare. Contribuția lor la generarea de date relevante din punct de vedere clinic este de neprețuit, confirmând rolul lor indispensabil atât în laborator, cât și în clinică. Pe măsură ce cercetarea continuă să evolueze, linia celulară Hep 2 va rămâne cu siguranță în prim-plan, contribuind la descoperirea de noi tratamente și la extinderea cunoștințelor noastre despre sănătatea și bolile umane.

Asigurați-vă astăzi linia celulară HEp-2

Celulele Hep 2: Publicații de cercetare

Următoarele sunt câteva publicații de cercetare interesante și cele mai citate privind celulele Hep 2.

Resurse pentru linia celulară Hep2: protocoale, videoclipuri și multe altele

Hep 2 este o linie celulară binecunoscută. Există mai multe resurse disponibile care prezintă linia celulară Hep 2.

Întrebări frecvente despre celulele HEp-2 în cercetarea biomedicală

Celulele HEp-2 sunt o linie celulară nemuritoare despre care se credea inițial că provine din carcinomul laringian, dar care a fost identificată ulterior ca fiind celule de adenocarcinom cervical contaminate cu celule HeLa. Originea lor epitelială umană le transformă într-un instrument-cheie în studiul diferitelor boli, în special în cercetarea cancerului, imunologie și virusologie, oferind informații despre mecanismele bolilor și tratamente potențiale
Modelele de colorare în celulele HEp-2 în timpul testării anticorpilor antinucleari (ANA) sunt esențiale pentru diagnosticarea bolilor autoimune. Aceste modele ajută la identificarea autoanticorpilor specifici, ajutând la diagnosticarea unor afecțiuni precum lupusul eritematos sistemic, și sunt o piatră de temelie în imunologia clinică pentru rolul lor în înțelegerea patologiilor autoimune
Celulele HEp-2 sunt utilizate pe scară largă pentru detectarea ANA datorită capacității lor de a prezenta o gamă largă de antigene, permițând screening-ul sensibil și specific al ANA în probele de ser. Acest lucru le face inestimabile în diagnosticarea bolilor autoimune, subliniind rolul lor esențial în avansarea metodelor de diagnostic în imunologie
Titlurile ANA în celulele HEp-2 indică cea mai mare diluție serică la care autoanticorpii rămân detectabili, servind drept măsură esențială în evaluarea severității și progresiei bolii autoimune. Titlurile ridicate sugerează adesea o boală mai activă, orientând medicii în ceea ce privește deciziile de tratament și monitorizarea bolii
Provenind din carcinomul laringian, celulele HEp-2 sunt esențiale în explorarea originilor și trăsăturilor cancerului laringian. Utilizarea lor în cercetarea translațională în domeniul cancerului a condus la progrese semnificative în înțelegerea cancerului laringian, ajutând la dezvoltarea de terapii țintite și îmbogățind literatura privind cancerul laringian
Inițial considerate a proveni de la carcinomul laringian, celulele HEp-2 au fost ulterior identificate ca fiind celule de adenocarcinom cervical, o revelație care a evidențiat complexitatea originii liniilor celulare, dar nu a diminuat valoarea lor în cercetare datorită caracteristicilor și aplicațiilor lor unice în studiul comportamentelor și patologiilor celulelor epiteliale
În ciuda originii lor comune din celulele canceroase cervicale umane, celulele HeLa și HEp-2 prezintă proprietăți distincte. Proliferarea rapidă a celulelor HeLa le face potrivite pentru o gamă largă de studii, în timp ce caracteristicile unice ale HEp-2, în special în cercetarea celulelor epiteliale, oferă avantaje specifice în studierea patologiilor și mecanismelor celulelor epiteliale
Cultivarea cu succes a celulelor HEp-2 implică condiții specifice, cum ar fi utilizarea EMEM suplimentat cu FBS și menținerea unui mediu controlat la 37°C cu 5% CO2. Cunoașterea cerințelor de cultivare a acestora, inclusiv densitatea de însămânțare și compoziția mediului, este esențială pentru utilizarea lor eficientă în cercetare
Celulele HEp-2 oferă numeroase avantaje, inclusiv relevanța lor în studiul bolilor umane și utilitatea în detectarea ANA. Cu toate acestea, anomaliile lor cromozomiale și natura tumorigenă pot limita aplicabilitatea lor în anumite domenii de cercetare, necesitând o analiză atentă a utilizării lor
Celulele HEp-2 au lărgit orizonturile de cercetare în diverse domenii biomedicale, de la depistarea medicamentelor la studiul mecanismelor bolilor. Versatilitatea lor și contribuțiile la înțelegerea și tratarea bolilor subliniază rolul lor inestimabil atât în cercetarea fundamentală, cât și în cea translațională, promițând o relevanță continuă în viitoarele eforturi științifice

Referințe

  1. Fusi, M. și S. Dotti, Adaptarea liniei celulare HEp-2 la sisteme de cultură complet fără componente de origine animală și analiza în timp real a creșterii celulare. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
  2. Gorphe, P., O analiză cuprinzătoare a liniei celulare Hep-2 în cercetarea translațională pentru cancerul laringian. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
  3. Wang, M., et al., Fibroblastele asociate cancerului dintr-o tumoare laringiană xenotransplantată stabilită pe linia celulară umană HEp-2 nu sunt derivate din celule canceroase prin tranziție epitelial-mezenchimală, fiind activate fenotipic, dar normale din punct de vedere cariotipic. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
  4. Karatas, O.F., Potențialul antiproliferativ al miR-33a în celulele Hep-2 ale cancerului laringian prin țintirea PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
  5. Wang, Y., et al., Sinteza nanoparticulelor de oxid de zinc din Marsdenia tenacissima inhibă proliferarea celulară și induce apoptoza în celulele canceroase laringiene (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: p. 111624.
  6. Zhang, J., et al., Un studiu sistemic și molecular al localizării subcelulare a proteinelor SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
  7. Wang, Q., et al., Proteina de legare a ARN-ului RBM6, ca gen supresor tumoral, reprimă creșterea și progresia carcinomului laringian. Gene, 2019. 697: p. 26-34.

Am detectat că vă aflați într-o altă țară sau că utilizați o altă limbă de browser decât cea selectată în prezent. Doriți să acceptați setările sugerate?

Închidere