Celulele Hep2 și rolul lor în cercetarea cancerului laringian

Celulele Hep 2 sunt un model in vitro esențial, utilizat pe scară largă în domenii de cercetare biomedicală, cum ar fi reumatologia, cercetarea cancerului și imunologia. Provenind din carcinomul laringian, aceste celule umane au fost esențiale pentru elucidarea țesutului de origine și a trăsăturilor specifice ale neoplasmelor laringiene. Importanța lor este bine recunoscută în cercetarea translațională a cancerului, unde au contribuit foarte mult la înțelegerea naturii laringiene și a originii cancerelor, marcând o prezență substanțială în publicațiile de cercetare a cancerului laringian [1].

Originea și caracteristicile generale ale celulelor Hep 2

Originea și caracteristicile generale ale unei linii celulare definesc aplicabilitatea acesteia în cercetare. Această secțiune vă va ajuta să aflați despre originea și unele caracteristici remarcabile ale celulelor Hep 2. De exemplu, veți afla: Ce este linia celulară HEp-2? Care este sursa celulelor Hep 2? Și care este morfologia celulelor Hep 2?

  • Hep 2, o linie celulară epitelială umană nemuritoare, a fost descrisă pentru prima dată de H.W. Toolan ca celule de carcinom laringian în 1954. Cu toate acestea, în ultimul timp, s-a raportat că linia celulară Hep 2 este compusă din celule de adenocarcinom cervical și provine din contaminarea liniei celulare Hela [2].
  • Celulele Hep 2 conțin cromozomi markeri Hela și sunt pozitive pentru secvențele ADN de keratină și papilomavirus uman, așa cum s-a confirmat prin colorare cu imunoperoxidază și, respectiv, PCR.
  • Derivatul liniei celulare Hela Hep 2 posedă o morfologie de tip epitelial.
  • Linia celulară Hep 2 prezintă abraziuni cromozomiale atât structurale, cât și numerice, cu un cariotip aproape triploid [3].

Diviziunea la microscop a celulelor canceroase de col uterin HeLa.

Linia celulară Hep 2: Informații privind cultivarea

Înainte de a lucra cu o linie celulară, trebuie să cunoaștem următoarele puncte-cheie pentru cultivarea acesteia. Aceste informații pot fi utile pentru cultivarea și întreținerea eficientă a liniei celulare. Trebuie să știți: Care este timpul de dublare al celulelor HEp-2? Sunt celulele Hep 2 aderente? Care este densitatea de însămânțare a celulelor Hep2?

Timpul de dublare a populației:

Timpul de dublare raportat pentru celulele Hep 2 este de aproximativ 40 de ore.

Aderente sau în suspensie:

Celulele Hep 2 sunt aderente și se dezvoltă în straturi monolaterale.

Densitate de însămânțare:

O densitate de însămânțare de 1 x104 celule/cm2 este ideală pentru cultivarea celulelor Hep 2. Pentru însămânțare, celulele Hep 2 aderente sunt clătite cu soluție 1 x PBS, urmată de incubarea cu soluție de disociere Accutase. După 8-10 minute de incubare la temperatura ambiantă, celulele sunt resuspendate în mediu și centrifugate. Celulele colectate sunt apoi distribuite în mediu proaspăt și turnate în flacoane noi pentru cultivare.

Mediu de creștere:

Pentru cultivarea celulelor Hep 2 se utilizează EMEM sau Eagle's minimal essential medium. Acest mediu este suplimentat cu 10% FBS, 1,0 g/L glucoză, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamină, 1% NEAA și 1 mM piruvat de sodiu pentru creșterea ideală a celulelor. Mediul trebuie reînnoit de 2 până la 3 ori pe săptămână.

Condiții de creștere:

Ca și alte linii celulare de mamifere, Hep 2 se cultivă, de asemenea, într-un incubator umidificat setat la o temperatură de 37°C și cu un aport continuu de 5% CO2.

Stocare:

Celulele Hep 2 pot fi depozitate în congelatoare electrice la temperaturi foarte scăzute (sub -150 °C) sau în faza de vapori de azot lichid pentru depozitare pe termen lung.

Procesul și mediul de congelare:

Mediile de congelare recomandate pentru celulele Hep 2 sunt CM-1 sau CM-ACF. Celulele trebuie congelate folosind un proces lent de congelare care permite o scădere treptată a temperaturii cu 1 °C și protejează viabilitatea celulelor.

Procesul de decongelare:

Flaconul cu celule congelate se dezgheață rapid prin agitare în baie de apăla 37 °Cpână când rămâne o mică aglomerare de gheață. Celulele se adaugă apoi în mediu proaspăt și se centrifughează pentru a elimina componentele mediului înghețat. Ulterior, peletul celular este resuspendat în mediu, iar celulele sunt distribuite în flacoane de cultură. Celulele trebuie să se odihnească timp de aproape 24 de ore pentru a adera.

Nivelul de biosecuritate

Pentru manipularea și întreținerea culturilor de celule Hep 2 se recomandă un laborator cu nivel de biosecuritate 1.

Celule Hep 2 înainte și după atingerea confluenței.

Avantaje și limitări ale celulelor Hep 2

Aproape toate liniile celulare prezintă o combinație unică de avantaje și limitări care contribuie la utilizarea lor în domeniul cercetării. Această secțiune va descrie câteva avantaje și dezavantaje principale asociate cu linia celulară Hep 2.

Avantaje

Principalele avantaje ale liniei celulare Hep 2 sunt:

  • Origine umană: Hep 2 este derivată din celule epiteliale umane, ceea ce o face un model in vitro valoros pentru studiul bolilor umane și al infecțiilor virale
  • Detectarea ANA: Linia celulară Hep 2 posedă o matrice de proteine native care prezintă numeroase antigene, ceea ce o face un substrat excelent pentru detectarea anticorpilor antinucleari (ANA). Această caracteristică permite depistarea specifică și foarte sensibilă a ANA în ser, devenind un instrument de diagnostic esențial pentru identificarea bolilor țesutului conjunctiv

Limitări

  • Anomalii cromozomiale: Celulele Hep 2 prezintă multiple anomalii cromozomiale numerice și structurale. Aceste anomalii pot afecta comportamentul celular și pot limita aplicabilitatea lor în anumite experimente de laborator
  • Tumorigenicitate: Hep 2, o linie celulară epitelială umană derivată din tumori, poate prezenta anomalii genetice absente de obicei în celulele epiteliale. În consecință, utilizarea celulelor Hep 2 ar putea fi restricționată în studii specifice axate pe fiziologia celulară normală.

Extinderea aplicațiilor liniei celulare Hep 2 în cercetarea biomedicală

Linia celulară Hep 2 se remarcă ca un model exemplar pentru o multitudine de aplicații în cadrul cercetării biomedicale. Recunoscute pentru versatilitatea lor, aceste celule îndeplinesc roluri esențiale în experimentele in vitro, de la analiza receptorilor la studiul bolilor complexe.

Explorarea mecanismelor tumorigene și a țintelor terapeutice cu ajutorul celulelor Hep 2

Celulele Hep 2, fiind tumorigene, sunt esențiale pentru aprofundarea complexităților biologiei cancerului. Ele oferă perspective asupra căilor de semnalizare a cancerului, studii mecaniciste și sunt un pilon de bază în screeningul și evaluarea medicamentelor anticanceroase. De exemplu, un studiu aprofundat a utilizat Hep 2 pentru a delimita influența miARN-33a asupra proliferării celulelor canceroase. Rezultatele au evidențiat efectele antiproliferative ale miARN-33a prin interacțiunea sa cu PIM1, o oncogenă cunoscută, sugerând o nouă țintă terapeutică [4]. Într-un alt caz, Hep 2 a fost utilizat în evaluarea potențialului terapeutic al nanoparticulelor de oxid de zinc Marsdenia tenacissima, evidențiind eficacitatea lor antiproliferativă și apoptotică [5].

Avansarea cercetării virusologice cu ajutorul cunoștințelor despre celulele Hep 2

Sensibilitatea celulelor Hep 2 la diverse virusuri umane face din acestea o resursă neprețuită în cercetarea virusologică. Acestea au fost utilizate în mod eficient în exprimarea genelor virale SARS-CoV-2 pentru a desluși interacțiunea complexă dintre virus și mecanismele celulare ale gazdei [6]. Această aplicație este deosebit de importantă în epoca actuală, în care înțelegerea și combaterea infecțiilor virale precum COVID-19 reprezintă o prioritate globală.

Descifrarea funcțiilor celulare: Manipularea genelor în celulele Hep 2

Adaptabilitatea liniei celulare Hep 2 la manipularea genetică subliniază utilitatea acesteia în studiile mecaniciste. Cercetătorii profită de această caracteristică pentru a modula expresia genelor și pentru a elucida rolul anumitor gene în funcțiile celulare. Un studiu notabil a implicat supraexprimarea proteinei de legare a ARN RBM6 în celulele Hep 2, ceea ce a facilitat investigarea potențialului său supresor de tumori, oferind informații valoroase despre fundamentele moleculare ale cancerului [7].

Îmbunătățirea diagnosticului bolilor prin intermediul aplicațiilor liniei celulare Hep 2

Dincolo de aceste domenii de cercetare, celulele Hep 2 sunt aclamate pentru capacitățile lor de diagnostic, în special în detectarea ANAs, care sunt esențiale în diagnosticarea bolilor autoimune, cum ar fi lupusul eritematos sistemic. Precizia cu care celulele Hep 2 pot prezenta ANAs sprijină diagnosticarea și dezvoltarea de tratamente țintite, sporind înțelegerea noastră a patologiilor autoimune și îmbunătățind îngrijirea pacienților.

Prin aceste aplicații diverse, celulele Hep 2 au contribuit în mod semnificativ la progresul în cercetarea translațională a cancerului, studiul infecțiilor virale și explorarea mecanismelor celulare. Contribuția lor la generarea de date relevante din punct de vedere clinic este inestimabilă, confirmând rolul lor indispensabil atât în laborator, cât și în clinică. Pe măsură ce cercetarea continuă să evolueze, linia celulară Hep 2 va rămâne cu siguranță în prim-plan, contribuind la descoperirea de noi tratamente și la extinderea cunoștințelor noastre despre sănătatea și bolile umane.

Asigurați-vă astăzi linia celulară HEp-2

Celule Hep 2: Publicații de cercetare

Următoarele sunt câteva publicații de cercetare interesante și cele mai citate privind celulele Hep 2.

Resurse pentru linia celulară Hep2: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Hep 2 este o linie celulară bine cunoscută. Există mai multe resurse disponibile care prezintă linia celulară Hep 2.

Întrebări frecvente despre celulele HEp-2 în cercetarea biomedicală

Referințe

  1. Fusi, M. și S. Dotti, Adaptarea liniei celulare HEp-2 la sisteme de cultură total lipsite de animale și analiza în timp real a creșterii celulare. Biotechniques, 2021. 70(6): p. 319-326.
  2. Gorphe, P., O revizuire cuprinzătoare a liniei celulare Hep-2 în cercetarea translațională pentru cancerul laringian. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): p. 644-649.
  3. Wang, M., și colab., Fibroblastele asociate cancerului într-o tumoare xenografiată laringiană umană HEp-2 stabilită nu sunt derivate din celulele canceroase prin tranziție epitelială-mesenchimală, fenotipic activate, dar cariotipice normale. PLoS One, 2015. 10(2): p. e0117405.
  4. Karatas, O.F., Potențialul antiproliferativ al miR-33a în celulele Hep-2 de cancer laringian prin țintirea PIM1. Capul gâtului, 2018. 40(11): p. 2455-2461.
  5. Wang, Y., et al., Sinteza nanoparticulelor de oxid de zinc din Marsdenia tenacissima inhibă proliferarea celulară și induce apoptoza în celulele cancerului laringian (Hep-2). Jurnalul de fotochimie și fotobiologie B: Biologie, 2019. 201: p. 111624.
  6. Zhang, J., și colab., Un studiu sistemic și molecular al localizării subcelulare a proteinelor SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): p. 269.
  7. Wang, Q., et al., Proteina de legare a ARN RBM6 ca genă supresoare tumorală reprimă creșterea și progresia în laringocarcinom. Gene, 2019. 697: p. 26-34.

Am detectat că vă aflați într-o altă țară sau că utilizați o altă limbă de browser decât cea selectată în prezent. Doriți să acceptați setările sugerate?

Închidere