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Células SW-620 — Influência na investigação e na experimentação sobre o cancro do cólon

As células SW-620 constituem a linha celular de cancro colorretal humano no estágio C de Dukes. Possuem elevado potencial tumorigénico e metastático. Por conseguinte, são amplamente utilizadas em estudos sobre o cancro e em toxicologia. Este artigo irá explorar os aspetos fundamentais da linha celular de cancro do cólon SW-620.

📋 Linha celular SW-620 — Factos rápidos
Meio de crescimento
Para o crescimento ideal das células SW-620, utiliza-se meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino, 4,5 g/L de glicose, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃ e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio deve ser renovado duas vezes por semana.
Tempo de duplicação
O tempo de duplicação das células SW-620 varia entre 20 e 26 horas.
Tipo de crescimento
A linha celular SW-620 é aderente. As células formam monocamadas na superfície do recipiente de cultura.
Nível de biossegurança
BSL-1

Origem e características gerais das células SW-620

A origem e as características gerais constituem a informação fundamental sobre uma linha celular. O conhecimento prévio destes aspetos é essencial para os investigadores que pretendam utilizá-la nos seus estudos de investigação. Esta secção do artigo irá explicar as principais características e a origem da linha celular SW-620. Em particular, irá aprender: O que é a linha celular SW-620? Quais são as características da linha celular SW-620? Qual é a origem da SW-620? Qual é o tamanho das células SW-640? E qual é a diferença entre a SW-620 e a SW-480?

  • A SW-620, uma linha celular de carcinoma colorretal, teve origem numa lesão linfonodal mediatizada de um homem caucasiano de 51 anos com adenocarcinoma do cólon [1]. Esta linha celular foi depositada por A. Leibovitz e colegas.
  • As células SW-620 apresentam uma morfologia epitelial. São constituídas por pequenas células redondas e bipolares que se assemelham a microvilosidades.
  • O diâmetro das células SW-620 é de 14,4 ± 0,3 μm.
  • Estas células de cancro do cólon apresentam um cariótipo hiperdiplóide. O número modal de cromossomas das células SW-620 é 50, podendo variar entre 45 e 53.

SW-480 vs. SW-620

As linhas celulares SW-480 e SW-620 são de cancro colorretal. A SW-480 foi derivada de um tumor primário, enquanto a SW-620 foi estabelecida a partir de um nódulo linfático metastático. Além disso, os xenoenxertos desenvolvidos a partir destas linhas celulares diferem entre si. Os xenoenxertos da SW-620 produzem camadas de células tumorais, enquanto os da SW-480 formam estruturas semelhantes a glândulas [2]. Ambas as linhas celulares partilham perfis de mutação idênticos.

Pólipo identificado e removido durante um exame do cólon ou do reto, caracterizado por uma protuberância carnuda que se projeta do revestimento interno.

Células SW-620: Informações sobre a cultura

É fundamental compreender os conceitos básicos da cultura celular de uma linha celular, uma vez que isso permite o seu manuseamento e manutenção adequados. Nesta secção, são mencionados alguns pontos-chave para a cultura das células SW-620 que o podem ajudar a saber: O que é o meio de cultura das células SW-620? Qual é o tempo de duplicação das células SW-620? Como se cultivam as células SW-620?

Pontos-chave para a cultura de células SW-620

Tempo de duplicação:

O tempo de duplicação da SW-620 varia entre 20 e 26 horas.

Adesivas ou em suspensão:

A linha celular SW-620 é aderente. As células formam monocamadas na superfície do recipiente de cultura.

Rácio de subcultura:

As células SW-620 são subcultivadas com uma proporção de divisão de 1:3. As células aderentes são lavadas com tampão salino fosfato (1X) sem magnésio nem cálcio. Em seguida, adiciona-se a solução de passagem, Accutase, e as células são incubadas à temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos. Adiciona-se meio fresco e as células são centrifugadas. Posteriormente, as células colhidas são cuidadosamente ressuspensas num meio de crescimento e distribuídas por novos frascos para crescimento.

Meio de crescimento:

Para o crescimento ideal das células SW-620, utiliza-se meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino, 4,5 g/L de glicose, 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃ e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio deve ser renovado duas vezes por semana.

Condições de crescimento:

As células de carcinoma do cólon SW-620 são cultivadas numa incubadora humidificada a uma temperatura de 37 °C e com 5 % de CO.

Armazenamento:

Após a congelação, as células SW-620 são armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C em congeladores de temperatura ultrabaixa ou na fase de vapor de azoto líquido.

Processo de congelação e meio:

O CM-1 ou o CM-ACF são meios de congelação ideais para as células SW-620. É utilizado um processo de congelação lenta para congelar as células SW-620. Este processo permite apenas uma descida de 1 °C na temperatura por minuto, protegendo assim a viabilidade celular.

Processo de descongelação:

As células SW-620 congeladas são descongeladas num banho-maria pré-ajustado a 37 °C durante 40 a 60 segundos. Após a descongelação, adiciona-se meio de cultura e as células são centrifugadas para remover os componentes do meio de congelação. Em seguida, o sedimento celular obtido é ressuspenso num meio de crescimento e as células são transferidas para um novo frasco para crescimento.

Nível de biossegurança:

É necessário um laboratório de nível de biossegurança 1 (BSL-1) para o manuseamento das culturas de SW-620.

Sw620 cells

Esferóide em desenvolvimento formado a partir de células SW-620, com ampliação de 10x e 20x.

Vantagens das células SW-620

Vantagens

  • Modelação do carcinoma do cólon: As células SW-620 servem como um modelo fundamental para o carcinoma do cólon, permitindo um estudo aprofundado dos mecanismos tumorais e de metástase, particularmente em modelos de xenoenxertos.
  • Investigação e terapêutica do cancro: Estas células facilitam a exploração da biologia do cancro, da eficácia da quimioterapia e dos mecanismos de morte celular, incluindo a anoikis.
  • Expressão de CD133: A expressão de CD133 nas células SW-620 fornece informações sobre a biologia das células estaminais cancerígenas e as suas implicações na tumorigénese e na resistência à terapia.
  • Aplicações da citometria de fluxo: A análise por citometria de fluxo destas células permite a avaliação de populações celulares, níveis de apoptose e proliferação.

Aplicações de investigação da linha celular SW-620

As áreas de investigação em que as células SW-620 se revelam promissoras são discutidas a seguir:

  • Investigação oncológica: A SW-620 é um modelo celular inestimável para estudar a biologia do cancro colorretal. Os investigadores utilizam este modelo in vitro para explorar os mecanismos moleculares que impulsionam o crescimento, a invasão e a migração das células cancerosas. Além disso, pode ser utilizada para estudar mutações na linha celular SW-620, nomeadamente nas proteínas p53, APC e KRAS. Uma investigação realizada em 2021 analisou o efeito da mutação KRAS na linha celular SW-620 sobre a sensibilidade a um novo fármaco, o FL118. Observou-se que a sobreexpressão de KRAS aumenta a apoptose das células colorretais induzida pelo FL118, enquanto o seu silenciamento a diminui. Estes resultados podem ajudar a prever a utilização do FL118 em doentes com carcinoma do cólon portadores da mutação KRAS [3].
  • Triagem e desenvolvimento de fármacos: A linha celular SW-620 é amplamente utilizada para triagem e teste de potenciais candidatos a fármacos contra o cancro do cólon. Os investigadores utilizam estas células para avaliar a citotoxicidade e a eficácia de fármacos, o que pode conduzir ao desenvolvimento de abordagens terapêuticas direcionadas. Por exemplo, um estudo explorou as atividades anticancerígenas colorretais de compostos individuais de óleos essenciais de canela e cravo, utilizando a linha celular SW-620 [4].
  • Estudos sobre metástases: Devido ao elevado potencial metastático, as células SW-620 podem ser utilizadas para investigar as vias moleculares subjacentes à metástase das células cancerosas. Por exemplo, Zhou Yang e os seus colegas descobriram o papel do gene Grainy-head-like 2 (GRHL2) na progressão e metástase do cancro do cólon. Propuseram que a expressão do gene GRHL2 inibe a progressão e a metástase do cancro colorretal através da supressão da transição epitelial-mesenquimal (EMT) [5].

Proteja a sua linha celular SW620

Células SW-620: Publicações

Esta secção irá destacar algumas publicações de investigação interessantes e mais citadas sobre as células SW-620.

A urolitina A, um metabolito dos elagitaninos, induz a autofagia e inibe a metástase nas células SW620 de cancro colorretal humano

Este estudo, publicado na revista «Molecular Carcinogenesis» (2017), propôs que o tratamento com a urolitina A, um polifenol, induz a autofagia na linha celular de cancro colorretal SW620. Além disso, suprimiu a metástase das células cancerígenas.

A tetrandrina suprime a adesão, a migração e a invasão das células SW620 de cancro do cólon humano através da inibição das vias de sinalização do fator nuclear-κB, da metaloproteinase da matriz-2 e da metaloproteinase da matriz-9

Este artigo publicado na revista Oncology Letters (2018) explorou o potencial antimetastático da tetrandrina, um alcalóide bis-benzilisoquinolínico, utilizando células SW-620.

O CDCA3 promove a proliferação celular através da ativação da via de sinalização NF-κB/ciclina D1 no cancro colorretal

Este artigo foi publicado na revista «Biochemical and Biophysical Research Communications» (2018). Propôs que o gene CDCA3 (Cell division cycle associated 3) está sobreexpresso nas células do cancro colorretal e promove a sua proliferação através da ativação da sinalização do NF-κB.

O ABL001, um anticorpo bispecífico direcionado contra o VEGF e o DLL4, em combinação com quimioterapia, inibe de forma sinérgica a progressão tumoral em modelos de xenoenxertos

O estudo publicado na revista *International Journal of Molecular Sciences* (2021) investigou o efeito sinérgico de um anticorpo bispecífico (ABL001) e de fármacos quimioterapêuticos na progressão tumoral num xenoenxerto SW620.

O extrato purificado da planta medicinal Bacopa monnieri, a bacopasida II, inibe o crescimento de células cancerígenas do cólon in vitro, induzindo a paragem do ciclo celular e a apoptose

Este artigo foi publicado na revista Cells (2018). Neste estudo, o extrato de Bacopa monnieri, a bacopasida II, foi analisado quanto às suas atividades antitumorais em células SW-620 e outras células de cancro colorretal.

Recursos para a linha celular SW-620: protocolos, vídeos e muito mais

Seguem-se alguns recursos online sobre as células de carcinoma do cólon SW-620.

  • Transfecção da SW-620: Este artigo descreve sucintamente o protocolo para a transfecção estável da linha celular SW-620.

A ligação seguinte contém o protocolo de cultura celular da SW-620.

  • Protocolo de cultura celular da SW-620: Esta ligação fornece informações básicas sobre a linha celular SW-620. Também o ajudará a aprender o protocolo para a subcultura de células SW-620 e o manuseamento de culturas SW-620 criopreservadas e em proliferação.
  • Protocolos de cultura celular: Este vídeo é uma excelente fonte para aprender os protocolos de passagem, congelação e descongelação de células aderentes.

Perguntas frequentes sobre as células SW620

As células SW620 são células de adenocarcinoma colorrectal humano obtidas a partir de metástases de nódulos linfáticos de um doente com cancro do cólon, o que as torna importantes para a investigação do cancro.

As células SW620 têm geralmente um diâmetro que varia entre 15 e 30 micrómetros, embora este possa variar com base nas condições de cultura.

As células SW620 apresentam várias mutações, incluindo no gene TP53. Estas mutações podem afetar a morfologia das células, conduzindo a diferentes formas e tamanhos dentro da população.

As células SW620 e SW480 são ambas derivadas de adenocarcinomas do cólon, mas as células SW620 provêm de um local metastático, enquanto as células SW480 têm origem no tumor primário. Esta diferença pode afetar a sua composição genética, o seu comportamento em cultura e a sua resposta aos tratamentos.

As células SW620 são fundamentais no estudo da tumorigénese, especialmente devido à sua capacidade de formar tumores em modelos de ratinhos xenoenxertados e à sua expressão de marcadores de células estaminais cancerígenas como o CD133.

Sim, as células SW620 são utilizadas para estudar as vias de morte celular, incluindo apoptose e anoikis, à medida que respondem a várias terapêuticas contra o cancro e condições ambientais.

O elevado potencial metastático das células SW620 e a sua origem num nódulo linfático metastático fazem delas um modelo relevante para o estudo da disseminação do cancro do cólon.

A citometria de fluxo permite aos investigadores analisar as propriedades das células SW620, incluindo os padrões de expressão de CD133 e a extensão da apoptose ou a sensibilidade ao anoikis.

As células SW620 têm um elevado potencial tumorigénico quando introduzidas em modelos de ratinhos xenoenxertados imunodeficientes, o que as torna valiosas para estudos in vivo da progressão do cancro.

Referências

  1. Siekmann, W., et al., Efeito da lidocaína e da ropivacaína em linhas celulares de cancro do cólon primário (SW480) e metastático (SW620). Oncol Lett, 2019. 18(1): p. 395-401.
  2. Hewitt, R.E., et al., Validação de um modelo de progressão do cancro do cólon. J Pathol, 2000. 192(4): p. 446-54.
  3. Thangaiyan, R., et al., Os subtipos de mutação do gene Kras afetam de forma distinta a sensibilidade das células cancerígenas colorretais ao FL118, um novo inibidor da survivina, Mcl-1, XIAP, cIAP2 e MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): p. 7458.
  4. Petrocelli, G., et al., Moléculas presentes em óleos essenciais vegetais para a prevenção e o tratamento do cancro colorretal (CRC). *Molecules*, 2021. 26(4): p. 885.
  5. Yang, Z., et al., O GRHL2 inibe a progressão e a metástase do cancro colorretal através da supressão da transição epitelial-mesenquimal. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): p. 1195-1205.