Células RBL-2H3 - Importância das células RBL-2H3 na resposta alérgica e nos estudos imunológicos
A linha celular RBL-2H3 é uma linha celular de leucemia basofílica derivada de ratos, utilizada na investigação imunológica. Serve como sistema modelo para o estudo da fisiologia, do comportamento e das funções dos mastócitos. Estas células são também utilizadas para estudar reações alérgicas, processos imunológicos, bem como para ensaios e desenvolvimento de medicamentos.
- Meio de crescimento
- Para a cultura das células RBL-2H3, utiliza-se meio EMEM contendo 10% de FBS, 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e sal EBSS. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação dos mastócitos RBL-2H3 é de aproximadamente 50 a 60 horas.
- Tipo de crescimento
- A RBL-2H3 é uma linha celular aderente.
- Nível de biossegurança
- BSL-2
- Disponível na
- Cytion — Encomendar RBL-2H3
- Células RBL-2H3: Origem e características gerais
- Células RBL-2H3: Informações sobre a cultura
- Vantagens e limitações da linha celular de basófilos RBL-2H3
- Linha celular RBL-2H3: Um pilar da investigação imunológica
- Linha celular RBL-2H3: Perguntas frequentes essenciais para investigadores
- Referências
- Linha celular RBL-2H3 para investigação imunológica avançada
- Células RBL-2H3: Publicações de investigação
- Recursos para a linha celular RBL-2H3: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Células RBL-2H3: Origem e características gerais
Antes de utilizar uma linha celular de basófilos na sua investigação, deve conhecer a sua origem e características gerais. Esta secção do artigo irá informá-lo sobre os aspetos básicos das células RBL-2H3. Por exemplo: O que são os mastócitos RBL-2H3? Por que razão utilizar células RBL-2H3? O que são as células RBL-2H3 na leucemia basofílica de ratos? Qual é a morfologia das células RBL-2H3? As células RBL-2H3 são imortais?
- As células RBL-2H3 são células de leucemia basofílica derivadas de células basofílicas de ratos Wistar, isoladas em 1978 no Laboratório de Imunologia do Instituto Nacional de Investigação Dentária.
- As células RBL-2H3 possuem o receptor de tirosina quinase c-kit e o receptor da protease II dos mastócitos (RMCP-II), o que as torna um potencial modelo de mastócitos. Por conseguinte, são comummente designadas por mastócitos, apesar de a sua origem ser nos basófilos de ratos [1].
- Ao serem ativadas, libertam histamina e outros mediadores e expressam recetores de IgE de alta afinidade.
- As células RBL-2H3 apresentam uma morfologia semelhante à dos fibroblastos.
Células RBL-2H3: Informações sobre a cultura
Esta secção irá ajudá-lo a conhecer alguns aspetos fundamentais para a cultura da linha celular RBL-2H3. Irá saber: Qual é o tempo de duplicação das células RBL-2H3? Qual é a densidade de sementeira das células RBL-2H3? Qual é o protocolo de cultura das células RBL-2H3? Qual é o meio de congelação da linha celular RBL-2H3?
Pontos-chave para a cultura de células RBL-2H3
Tempo de duplicação da população:
O tempo de duplicação dos mastócitos RBL-2H3 é de aproximadamente 50 a 60 horas.
Adesiva ou em suspensão:
A RBL-2H3 é uma linha celular aderente.
Rácio de subcultura:
Para as células RBL-2H3, a proporção de divisão é mantida entre 1:2 e 1:4. As células aderentes são lavadas com uma solução 1x PBS isenta de magnésio e cálcio. Adiciona-se a solução de passagem Accutase e as células são mantidas à temperatura ambiente durante 10 minutos para se desprendirem do fundo do recipiente de cultura. Adiciona-se meio fresco e as células são centrifugadas. As células colhidas são cuidadosamente ressuspensas em meio fresco e transferidas para novos frascos contendo meio de crescimento.
Meio de crescimento:
Para a cultura das células RBL-2H3, utiliza-se meio EMEM contendo 10% de FBS, 2 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO₃ e sal EBSS. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células RBL-2H3 são cultivadas numa incubadora humidificada, regulada para uma temperatura de 37 °C e ligada a uma fonte de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células são armazenadas na fase de vapor de azoto líquido ou a uma temperatura inferior a -150 °C num congelador elétrico, para preservar a viabilidade celular a longo prazo.
Processo de congelação e meio:
Utilizam-se os meios de congelação CM-1 ou CM-ACF para congelar as células RBL-2H3 através de um processo de congelação lenta. Resumidamente, este método permite uma diminuição de 1 °C na temperatura por minuto e protege as células contra o choque térmico.
Processo de descongelação:
As células RBL-2H3 são descongeladas num banho-maria pré-ajustado (37 °C) durante aproximadamente 60 segundos. Posteriormente, as células são adicionadas a um meio de cultura fresco e centrifugadas. Esta etapa é essencial para remover os componentes do meio de congelação. Em seguida, o sedimento celular é ressuspenso num meio de crescimento e as células são transferidas para um frasco de cultura.
Nível de biossegurança:
As células RBL-2H3 devem ser mantidas em laboratórios de biossegurança de nível 1.
Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
Vantagens e limitações da linha celular de basófilos RBL-2H3
As células RBL-2H3 são frequentemente utilizadas na investigação imunológica. Esta secção descreve as suas principais vantagens e limitações.
Vantagens
- Fácil de cultivar: As células RBL-2H3 podem ser facilmente cultivadas e mantidas em ambiente laboratorial. Isto facilita a realização de experiências económicas e reprodutíveis, tornando-as uma escolha popular para estudos iniciais em imunologia.
Limitações
- Origem não humana: Originárias de basófilos de rato, as células RBL-2H3 podem não imitar com precisão os processos biológicos humanos, o que pode limitar a sua aplicabilidade em estudos de investigação específicos para o ser humano. Isto exige uma interpretação cautelosa dos dados ao extrapolar resultados para os sistemas humanos.
- Modelo simplificado de mastócitos: Embora estas células forneçam um modelo básico para o estudo das funções dos mastócitos, não representam na totalidade a natureza complexa das interações dos mastócitos no sistema imunitário humano. Consequentemente, podem não modelar adequadamente os papéis multifacetados dos mastócitos nas respostas imunitárias ou em condições patológicas in vivo.
Linha celular RBL-2H3: Um pilar da investigação imunológica
Investigação sobre basófilos e mastócitos utilizando a linha celular RBL-2H3
A linha celular RBL-2H3, derivada de Rattus norvegicus, serve como um modelo fundamental para o estudo da biologia dos basófilos e dos mastócitos. Estes mastócitos de rato fornecem informações essenciais sobre a libertação de mediadores pelos mastócitos, crucial para a compreensão de condições alérgicas, tais como a rinite alérgica. Através destas células, os investigadores exploram a dinâmica dos recetores celulares e o estabelecimento de sinapses imunológicas, que são fundamentais para a resposta do sistema imunitário aos alérgenos. Um estudo interessante publicado em 2019 utilizou a linha celular RBL-2H3 e investigou os mecanismos subjacentes às reações pseudoalérgicas produzidas pela injeção de Qingkailing. O estudo constatou que a cascata de sinalização PI3K-RAC1 desencadeia parcialmente esta resposta alérgica nas células [2].
Dinâmica das sinapses imunológicas na investigação sobre alergias
Amplamente utilizadas na investigação em imunologia, as células RBL-2H3 são particularmente eficazes para investigar a dinâmica das sinapses imunológicas. Isto ajuda a elucidar os processos de comunicação do sistema imunitário, com aplicações no estudo tanto dos mastócitos do sangue periférico como dos mastócitos peritoneais. Esta investigação é vital para uma compreensão abrangente da resposta imunitária, tanto em contextos sistémicos como localizados.
Triagem de fármacos e testes de toxicidade
Na triagem e nos testes de medicamentos, aproveita-se a capacidade de resposta das células RBL a vários estímulos, incluindo o estudo de como o H₂O₂ inibe as respostas mediadas pela IgE. Estas células desempenham um papel essencial no desenvolvimento de tratamentos para doenças como as infeções estreptocócicas, nas quais os estreptococos do grupo mitis inibem a ativação dos mastócitos. Além disso, os investigadores avaliam os efeitos tóxicos de várias substâncias, incluindo produtos químicos, fármacos e nanopartículas, utilizando este modelo de mastócitos RBL 2H3. Por exemplo, um estudo recente (2022) avaliou a citotoxicidade dos microplásticos de poliestireno nas células RBL-2H3. Verificou-se que os microplásticos danificam as organelas das células RBL-2H3 e promovem a morte celular [3]. Outro estudo de 2021 avaliou o potencial antialérgico e anti-inflamatório de um produto natural, a neferina, utilizando o modelo RBL 2H3 mc. O estudo revelou as boas propriedades antialérgicas e anti-inflamatórias do composto [4].
Metodologias avançadas na medição imunológica
A libertação consistente e mensurável de mediadores pelas células RBL-2H3 torna-as ideais para a fluorimetria, facilitando medições precisas e exatas, cruciais para o estudo de doenças e a avaliação de agentes terapêuticos.
A linha celular RBL-2H3, com origem em Rattus norvegicus, é um recurso inestimável tanto na investigação fundamental como na aplicada no campo da imunologia. Oferece oportunidades significativas para o avanço do nosso conhecimento e do tratamento de doenças imunológicas.
Linha celular RBL-2H3 para investigação imunológica avançada
Células RBL-2H3: Publicações de investigação
Seguem-se algumas publicações de investigação interessantes que abordam os mastócitos RBL-2H3:
Atividade inibidora da narirutina na desgranulação das células RBL-2H3
Este artigo de investigação foi publicado na revista «Immunopharmacology and Immunotoxicology» (2021). O estudo propôs que a narirutina, um composto natural, exerce efeitos inibidores na desgranulação das células RBL-2H3 através da regulação das vias de sinalização do NF-κB, da MAPK e da tirosina quinase.
Esta investigação, publicada no International Journal of Molecular Sciences (2020), propôs que o composto apigenina suprime significativamente as respostas alérgicas e inflamatórias das células RBL-2H3 e RAW264.7. Por conseguinte, pode servir como um potencial agente no combate a doenças relacionadas com o sistema imunitário.
Este artigo de investigação publicado no International Journal of Molecular Sciences (2021) avaliou os efeitos antialérgicos e anti-inflamatórios de um produto natural, a saponarina, utilizando diferentes linhas celulares, incluindo a RBL-2H3.
Este estudo publicado na revista «Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine» (2014) constatou que os extratos de Benchalokawichian e alguns dos seus constituintes ativos exercem potenciais efeitos inibidores sobre a libertação de β-hexosaminidase pelas células RBL-2H3.
Este artigo foi publicado em 2018 no International Journal of Biological Macromolecules. O estudo indicou que a Spirulina maxima, um produto natural, inibe a desgranulação das células RBL 2H3 ao impedir a fosforilação das MAPKs e da AKT.
Recursos para a linha celular RBL-2H3: protocolos, vídeos e muito mais
A RBL-2H3 é uma linha celular de mastócitos amplamente utilizada. Os recursos disponíveis relativos aos protocolos de cultura e transfecção da RBL-2H3 são aqui mencionados:
- Modelo de mastócitos RBL 2H3: Este artigo de investigação inclui protocolos para a manutenção de culturas de RBL-2H3 e para a transfecção de RBL-2H3.
Eis alguns recursos que explicam o protocolo de cultura celular da RBL-2H3:
- Células RBL-2H3: Este site é útil para aprender os protocolos de cultura celular da linha celular RBL-2H3. Além disso, inclui informações sobre os meios de cultura e as condições de cultura das células RBL-2H3.
Linha celular RBL-2H3: Perguntas frequentes essenciais para investigadores
Referências
- Passante, E. e N. Frankish, «A linha celular RBL-2H3: a sua proveniência e adequação como modelo para o mastócito». Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Reação pseudoalérgica causada pela injeção de Qingkailing, parcialmente através da via de sinalização PI3K-Rac1 nas células RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Os microplásticos (nanoplásticos) de poliestireno danificam as organelas das células RBL-2H3 e promovem a ativação da MOAP-1 para induzir a apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Efeitos antialérgicos e anti-inflamatórios da neferina nas células RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.