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Linha celular MG-63: Um guia detalhado sobre as células MG-63 na investigação do osteossarcoma

As células MG-63 são células de osteossarcoma humano do tipo fibroblasto que oferecem uma vasta gama de aplicações de investigação no domínio biomédico. Isto pode incluir o estudo de processos relacionados com os ossos, tais como o desenvolvimento ósseo, a diferenciação, etc. Além disso, a linha celular MG-63 serve como um modelo in vitro adequado para estudar a viabilidade, a proliferação e a adesão das células ósseas.

Características gerais e origem da linha celular MG-63

Esta secção do artigo abordará a origem e as características gerais da linha celular MG-63. Irá aprender: O que é a linha celular MG-63? Qual é a origem da linha celular MG-63? Qual é a morfologia das células MG-63? Qual é o tamanho das células MG-63?

  • A MG-63 é um tipo de linha celular de osteoblastos proveniente do osso de um doente do sexo masculino (caucasiano) de 14 anos com osteossarcoma. A. Billiau e colegas depositaram esta linha celular em 1977.
  • A linha celular MG-63 apresenta uma morfologia semelhante à das células fibroblásticas.
  • As células de osteossarcoma humano (MG-63) apresentam hipotriploidia. O número modal de cromossomas para estas células é 66, o que ocorre em aproximadamente 44% da população celular. Também foram relatadas ploidias mais elevadas em quase 2% da população celular. Além disso, os cromossomas marcadores 18-19 são abundantes em todas as células.

Imagem por microscopia eletrónica de vácuo (SEM) de uma cultura de células de sarcoma.

Informações sobre o cultivo da linha celular MG-63

Informações importantes sobre os requisitos de cultura da linha celular podem facilitar o seu trabalho. Esta secção do artigo enumera todos os pontos-chave essenciais para a cultura e manutenção das células MG-63. Aqui irá aprender: Qual é o tempo de duplicação das células MG-63? Que meio de crescimento é utilizado para as células MG-63? Qual é a densidade de sementeira das células MG-63?

Pontos-chave para a cultura de células MG-63

Tempo de duplicação

O tempo de duplicação populacional das células MG-63 varia entre 28 e 38 horas, dependendo das condições de cultura.

Propriedades de crescimento

A MG-63 é uma linha celular aderente.

Densidade de sementeira

Recomenda-se uma densidade celular de 1 x 10 células/cm² para as células MG-63. As células aderentes são lavadas com solução salina tamponada com fosfato (PBS) 1x, sem magnésio nem cálcio. Estas células são depois incubadas com solução de dissociação (Accutase), adiciona-se-lhes meio fresco e são centrifugadas. O sedimento celular recolhido é ressuspenso em meio fresco e transferido para um novo frasco para crescimento.

Meio de crescimento

Utilizam-se os meios DMEM ou Ham’s F12 para a cultura das células MG-63. Estes meios podem ser enriquecidos com 5% de soro fetal bovino (FBS), 3,0 g/L de glicose, 2,5 mM de L-glutamina e 1,2 g/L de NaHCO₃ para um crescimento celular ótimo. Os meios devem ser substituídos 2 a 3 vezes por semana.

Condições de crescimento

Para a cultura das células MG-63, é necessária uma incubadora humidificada a 37 °C com um fornecimento de 5% de CO₂.

Armazenamento

Estas células de tipo osteoblástico podem ser armazenadas na fase de vapor de azoto líquido ou a temperaturas inferiores a -150 °C para manter a viabilidade celular.

Processo de congelação e meio

Para o congelamento das células MG-63, utilizam-se os meios CM-1 ou CM-ACF. Recomenda-se, geralmente, um processo de congelamento lento para evitar o choque nas células e proteger a sua viabilidade.

Processo de descongelação

As células congeladas são incubadas durante 40 a 60 segundos num banho-maria pré-aquecido (37 graus Celsius). As células são ressuspensas em meios de crescimento frescos e transferidas para um novo frasco. Após 24 horas de incubação, o meio é substituído para remover os componentes do meio de congelação.  

Nível de biossegurança

São necessárias instalações laboratoriais de nível de biossegurança 1 para o manuseamento e manutenção das culturas de MG-63.

MG 63 cells

Células MG-63 antes e depois de atingirem a confluência.

Linha celular MG-63: vantagens e desvantagens

A MG-63 é uma linha celular de osteoblastos amplamente utilizada. Apresenta várias vantagens e desvantagens associadas. A seguir, iremos mencionar alguns dos principais prós e contras da linha celular MG-63.

Vantagens

As vantagens das células MG-63 são:

  • Características semelhantes às dos osteoblastos

    A linha celular MG-63 apresenta características semelhantes às dos osteoblastos, tornando-a adequada para o estudo de processos e doenças relacionados com os ossos. Pode também ser utilizada para investigar a adesão, proliferação e viabilidade celular em superfícies de titânio [1].

  • Facilidade de transfecção

    As células MG-63 são amplamente utilizadas em estudos de transfecção, permitindo a investigação da expressão e função génica, bem como de processos celulares.

  • Produção elevada de interferão

    As células MG-63 são capazes de produzir interferão em níveis elevados. Podem produzir rendimentos de interferão 3,7 vezes superiores por cm² em comparação com os fibroblastos diplóides, quando induzidas com cicloheximida, ácido poliinosínico-policitidílico e actinomicina [2].

Desvantagens

As desvantagens associadas às células B MG-63 são:

  • Heterogeneidade

    As células MG-63 apresentam heterogeneidade na população celular, o que pode afetar a reprodutibilidade.

  • Linha celular tumoral

    A MG-63 é uma linha celular cancerosa e pode não representar totalmente o comportamento e a fisiologia das células normais, o que limita a sua aplicação em certas experiências laboratoriais.

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Aplicações das células MG-63

As células MG-63 constituem uma excelente ferramenta de investigação. Oferecem muitas aplicações promissoras no campo da investigação. Enumeram-se aqui algumas das principais aplicações das células MG-63 na investigação.

  • Estudo de processos/doenças relacionados com os ossos: as células MG-63 são células semelhantes aos osteoblastos (formadoras de osso). Por conseguinte, estas células são amplamente utilizadas para estudar doenças ósseas e processos celulares, incluindo o desenvolvimento, a diferenciação e a mineralização. Além disso, as células são amplamente utilizadas para a triagem de fármacos terapêuticos destinados a promover a cicatrização óssea. Uma investigação utilizou células MG-63 para estudar o potencial terapêutico de nanopartículas de óxido de zinco sintetizadas de forma ecológica a partir de Scutellaria baicalensis na proliferação, mineralização e diferenciação das células ósseas [3].
  • Investigação oncológica: As células MG-63 são amplamente utilizadas na investigação oncológica. Vários estudos recorreram a estas células de osteossarcoma para compreender as vias de sinalização do cancro e avaliar o potencial citotóxico e terapêutico de fármacos. Um estudo realizado em 2019 explorou as propriedades antitumorais de um composto natural, a tomentosina, utilizando células MG-63. Os resultados demonstraram que a tomentosina exibe efeitos anticancerígenos ao desencadear a produção intracelular de espécies reativas de oxigénio (ROS) [4].

Publicações de investigação que abordam as células MG-63

Seguem-se algumas publicações de investigação que apresentam a MG-63, a linha celular semelhante aos osteoblastos.

O miR-192 aumenta a sensibilidade das células cancerígenas de osteossarcoma MG-63 ao metotrexato

Este artigo foi publicado na revista «Pathology - Research and Practice» em 2020. Esta investigação utilizou células MG-63 para estudar os mecanismos moleculares envolvidos na resistência aos medicamentos nas células cancerígenas do osteossarcoma (MG-63). Os resultados revelaram que o miRNA-192 pode ser um alvo útil para superar a resistência ao metotrexato no osteossarcoma.

As nanopartículas de óxido de zinco sintetizadas por via ecológica regulam a expressão apoptótica nas células cancerígenas ósseas MG-63

Esta investigação foi publicada no «Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology» (2020). O estudo relatou o potencial anticancerígeno das nanopartículas de óxido de zinco (ZnONPs) sintetizadas por via ecológica a partir de Rehmanniae Radix contra células cancerígenas ósseas (MG-63).

Diferenciação osteogénica e potencial de mineralização das nanopartículas de óxido de zinco da Scutellaria baicalensis em células MG-63 semelhantes a osteoblastos humanos

Este artigo de investigação foi publicado em 2021 na revista «Materials Science and Engineering». Este estudo propôs as propriedades de cicatrização óssea das nanopartículas de óxido de zinco biossintetizadas a partir da planta Scutellaria baicalensis, utilizando a linha celular MG-63.

A curcumina inibe a proliferação e a invasão das células MG-63 através da inativação da via p-JAK2/p-STAT3

Este estudo foi publicado na revista «Onco Targets and Therapy» em 2021. A investigação propôs as propriedades antitumorais do composto curcumina contra células de osteossarcoma. O composto exerceu estes efeitos terapêuticos através da inativação da via de sinalização oncológica p-JAK2/p-STAT3.

Influência da vitamina D3 tratada com biocampo na proliferação, diferenciação e maturação de parâmetros relacionados com os ossos na linha celular MG-63

Esta investigação foi publicada em 2018 na revista «International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science». O estudo concluiu que a vitamina D3 tratada com energia de biocampo influencia positivamente a proliferação, maturação e diferenciação das células ósseas e melhora os parâmetros de saúde óssea.

Recursos para a linha celular MG-63: protocolos, vídeos e muito mais

Estão disponíveis vários recursos sobre a linha celular MG-63 que explicam os seus protocolos de cultura celular e transfecção.

A ligação seguinte fornece-lhe o protocolo de cultura para as células MG-63.

  • Cultura de células MG-63: Este site fornece um protocolo simples e detalhado para a subcultura ou divisão da linha celular MG-63.

Perguntas frequentes sobre as células MG-63

As células MG-63 são uma linha celular de osteossarcoma humano habitualmente utilizada em investigação para estudar a biologia óssea, a biologia do cancro e os testes de medicamentos. São derivadas do osteossarcoma de um homem de 14 anos e apresentam caraterísticas típicas de células osteoblásticas.

As células MG-63 são originárias de osteossarcoma humano, um tipo de cancro ósseo. Especificamente, são derivadas do tecido ósseo maligno de um doente humano.

O tempo de duplicação das células MG-63 varia tipicamente entre 24 e 36 horas, dependendo das condições de cultura e dos meios utilizados.

As células MG-63 apresentam um cariótipo anormal com múltiplas anomalias cromossómicas. Isto inclui aberrações numéricas e estruturais que são caraterísticas das células cancerígenas.

Enquanto as células MG-63 são células de osteossarcoma, os fibroblastos humanos são derivados do tecido conjuntivo e estão envolvidos na cicatrização de feridas e na formação da matriz extracelular. Ambos os tipos de células são utilizados em estudos de interações celulares, particularmente no contexto da engenharia óssea e de tecidos.

As células MG-63 têm propriedades robustas de fixação celular, o que as torna adequadas para estudos que envolvam a adesão celular, o espalhamento e a interação com vários biomateriais. Estas propriedades são cruciais para compreender as funções dos osteoblastos e otimizar os implantes ósseos.

As células MG-63 são utilizadas em pesquisas para investigar o papel da adenosina no metabolismo ósseo. Os receptores de adenosina nestas células medeiam várias funções, incluindo a formação e a reabsorção óssea, tornando-as valiosas para o estudo dos mecanismos moleculares do metabolismo ósseo.

A amelogenina, uma proteína essencial para a formação do esmalte nos dentes, pode também ser estudada utilizando células MG-63 para explorar os seus efeitos nas células ósseas e o seu papel potencial na engenharia e regeneração do tecido ósseo.

As células MG-63 são fundamentais no estudo da otimização da osseointegração, que é o processo de integração do tecido ósseo com os implantes. Os investigadores utilizam estas células para testar novos materiais e modificações de superfície que possam melhorar a integração e a estabilidade dos implantes.

A estabilidade fenotípica refere-se à consistência das caraterísticas celulares ao longo do tempo e através de múltiplas passagens. No caso das células MG-63, a manutenção da estabilidade fenotípica é essencial para garantir resultados fiáveis e reprodutíveis nas experiências.

As células MG-63 servem de modelo para estudar as funções dos osteoblastos, incluindo a formação e mineralização óssea, bem como a fisiopatologia do osteossarcoma, fornecendo informações sobre a progressão do cancro e potenciais alvos terapêuticos.

Sim, as células MG-63 podem ser utilizadas para investigar os efeitos dos interferões humanos nas células de cancro ósseo, incluindo as suas propriedades antivirais, antiproliferativas e imunomoduladoras, contribuindo para a compreensão da imunoterapia do cancro.

Referências

  1. Wandiyanto, J.V., et al., O destino das células MG-63 semelhantes a osteoblastos em superfícies de titânio nanoestruturadas bactericidas pré-infectadas. Materials (Basel), 2019. 12(10).
  2. Billiau, A., et al., Interferão humano: produção em massa numa linha celular recém-estabelecida, a MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
  3. Tang, Y., et al., Diferenciação osteogénica e potencial de mineralização de nanopartículas de óxido de zinco provenientes de Scutellaria baicalensis em células MG-63 semelhantes a osteoblastos humanos. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
  4. Lee, C.M., et al., A tomentosina exibe um efeito anticancerígeno nas células MG-63 de osteossarcoma humano através da indução de espécies reativas de oxigénio intracelulares. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.