Células CTX

A CTX (também designada CTX0E03) é uma linha de células estaminais neurais humanas condicionalmente imortalizadas, derivada do neuroepitélio cortical fetal humano do primeiro trimestre. A linha foi gerada por integração retroviral de um transgene de fusão c-mycER^TAM, que estimula a proliferação celular apenas na presença de 4-hidroxitamoxifeno (4-OHT). Na ausência de 4-OHT e em meio isento de mitógenos, as células CTX0E03 sofrem uma paragem de crescimento e diferenciam-se em neurónios e astrócitos, mantendo a capacidade de diferenciação multipotente. A linha é clonal, apresenta um cariótipo humano normal (46,XY) e foi desenvolvida em condições compatíveis com as BPF (Boas Práticas de Fabrico) para potencial aplicação clínica.

A CTX0E03 foi avaliada em modelos pré-clínicos de acidente vascular cerebral isquémico (modelo de rato com oclusão da artéria cerebral média [MCAo]), nos quais as células implantadas promoveram uma recuperação significativa da função sensório-motora. A linha entrou em ensaios clínicos para o tratamento do AVC. É também utilizada como modelo in vitro para a biologia das células estaminais neurais, a diferenciação de neurónios corticais, a investigação da doença de Alzheimer (estudos sobre a toxicidade da beta-amilóide) e o rastreio neurofarmacológico. O sistema de imortalização condicional torna o CTX0E03 particularmente adequado para estudos de segurança e eficácia, uma vez que a proliferação pode ser desativada através da remoção do 4-OHT antes do transplante.

O CTX0E03 é cultivado em DMEM/F12 suplementado com suplemento N2, EGF (20 ng/ml) e FGF-2 (20 ng/ml), juntamente com 4-OHT (1 μM), em superfícies revestidas com laminina, a 37 °C em 5% de CO₂. Para a diferenciação, os fatores de crescimento e o 4-OHT são retirados. A linha está classificada no nível de biossegurança 1 (GMO-S1 na Alemanha devido ao transgene c-mycERTAM integrado). Os utilizadores devem cumprir os regulamentos aplicáveis em matéria de OGM na sua jurisdição.