Células CTX

O DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) é um meio basal altamente versátil e amplamente utilizado, concebido para suportar o crescimento de uma gama diversificada de células de mamíferos em investigação biológica. Serve como meio ideal para a cultura de fibroblastos primários, neurónios, células gliais, HUVECs, células musculares lisas, bem como linhas celulares populares como HeLa, 293, Cos-7 e PC-12.
O que distingue o DMEM de outros meios é a sua composição única. Contém um impressionante aumento de quatro vezes na concentração de aminoácidos e vitaminas em comparação com o Eagle's Minimal Essential Medium original. Inicialmente desenvolvido com baixo teor de glucose (1 g/L) e piruvato de sódio, o DMEM é frequentemente utilizado com níveis de glucose mais elevados, com ou sem piruvato de sódio. O DMEM não contém proteínas, lípidos ou factores de crescimento, o que torna necessária a sua suplementação. Para obter um crescimento ótimo, uma abordagem comum é suplementar o DMEM com 10% de Soro Fetal Bovino (FBS). Além disso, o DMEM emprega um sistema tampão de bicarbonato de sódio, exigindo um ambiente de 5-10% de CO2 para manter um pH fisiológico.
O Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) é altamente considerado entre os meios definidos para cultura de células e tecidos, satisfazendo as necessidades de crescimento de vários fenótipos de células aderentes. Ultrapassa o Meio de Eagle original, desenvolvido nos anos 50 para cultivar células de galinha, através da formulação suplementar melhorada conhecida como modificação de Dulbecco. Esta modificação aumenta significativamente o conteúdo de aminoácidos e vitaminas selecionados até quatro vezes em comparação com o meio original.
No campo da cultura de células, o DMEM desempenha um papel vital como meio de crescimento para diferentes tipos de células, incluindo células primárias, células estaminais e células transformadas. Os investigadores também utilizam a versão modificada do DMEM para uma vasta gama de aplicações de investigação, como a descoberta de medicamentos, a engenharia de tecidos e o estudo das vias de sinalização celular.

Controlo de Qualidade

Estéril-filtrado


Armazenamento e prazo de validade

Armazenar a +2°C a +8°C, protegido da luz.
Depois de aberto, armazenar a 4°C e utilizar no prazo de 6-8 semanas.


Condições de transporte

Temperatura ambiente


Manutenção

Manter refrigerado a uma temperatura entre +2°C e +8°C, ao abrigo da luz. Evitar a congelação e o aquecimento frequente a +37°C, uma vez que reduz a qualidade do produto.
Não aquecer o meio para além de 37°C nem utilizar fontes de calor não controladas, tais como aparelhos de micro-ondas.
Se apenas uma parte do meio for utilizada, retirar a quantidade necessária e aquecê-la à temperatura ambiente antes de a utilizar.


Composição



Categoria
Componentes
Concentração (mg/L)


Aminoácidos
Glicina
30.00



L-Arginina HCl
84.00



L-Cistina 2 HCl
62.57



L-Glutamina
584.00



L-Histidina HCl H2O
42.00



L-Isoleucina
105.00



L-Leucina
105.00



L-Lisina HCl
146.00



L-Metionina
30.00



L-fenilalanina
66.00



L-Serina
42.00



L-Treonina
95.00



L-Triptofano
16.00



L-tirosina 2 Na 2H2O
103.79



L-Valina
94.00


Vitaminas
Cloreto de colina
4.00



Pantotenato de D-Cálcio
4.00



Ácido fólico
4.00



myo-Inositol
7.20



Nicotinamida
4.00



Piridoxal HCl
4.00



Riboflavina
0.40



Tiamina HCl
4.00


Sais inorgânicos
CaCl2 2 H2O
265.00



Fe(NO3)3 9 H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Outros componentes
D-Glucose
4500.00



Sal de sódio de vermelho de fenol
15.90



Piruvato de sódio
110.00

Solução de desprendimento celular Accutase com EDTA e vermelho de fenol – 100 ml

Accutase é uma solução de desprendimento celular pronta a usar e filtrada esterilizada, concebida como uma alternativa suave à tripsina/EDTA para a dissociação de células de mamíferos aderentes de material plástico padrão para cultura de tecidos e superfícies revestidas para adesão. Combina atividade enzimática proteolítica e colagenolítica numa solução salina equilibrada para proporcionar uma dissociação eficaz, mas controlada, preservando as proteínas da superfície celular e favorecendo uma elevada viabilidade pós-passagem e uma rápida readesão.

A formulação do Accutase baseia-se na solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco (DPBS) com EDTA e vermelho de fenol como indicador visual de pH. As enzimas são de origem não mamífera e não bacteriana, tornando o Accutase particularmente adequado para a investigação com células estaminais, fluxos de trabalho de vacinas e qualquer aplicação em que seja necessário minimizar os contaminantes de origem animal ou microbiana. A solução autoinibe-se a 37 °C, pelo que não é necessário qualquer reagente neutralizante ou meio contendo soro após a dissociação – as células podem ser transferidas diretamente para um meio fresco.

Características principais

Líquido 1x pronto a usar e filtrado esterilizado – não requer diluição nem reconstituição
Atividade enzimática proteolítica e colagenolítica combinada para uma dissociação suave
Cada lote padronizado para uma atividade de dissociação definida, garantindo a consistência entre lotes
Enzimas de origem não mamífera e não bacteriana
Autoinibe-se a 37 °C – não é necessária solução neutralizante
Formulado em PBS de Dulbecco com EDTA
Fenol vermelho incluído como indicador visual de pH
pH 6,8 – 7,8


Aplicações típicas
O Accutase dissocia suavemente uma ampla variedade de tipos de células aderentes e sensíveis, incluindo células estaminais embrionárias humanas (hESCs), células estaminais pluripotentes induzidas humanas (iPSCs), células estaminais neurais, neurónios primários e linhas aderentes cultivadas rotineiramente, tais como HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 e A549. Casos de utilização típicos incluem:

Subcultura e passagem de rotina de células mamíferas aderentes
Dissociação suave de células individuais de hESCs, iPSCs e outras linhas sensíveis
Preparação de amostras para citometria de fluxo e análise FACS
Análise de marcadores da superfície celular em que a integridade do epítopo é importante
Ensaios de migração, proliferação e apoptose celular
Ensaios de quiescência por privação de soro e estudos de transfecção de oncogenes
Ensaios de migração de células tumorais e de crista neural
Aumento da escala de produção em fluxos de trabalho com biorreatores

Para trabalhos de rotina, aplique aproximadamente 10 ml de Accutase por 75 cm² de superfície de cultura e incube durante 5–10 minutos à temperatura ambiente. O tempo de incubação ideal deve ser determinado para cada linha celular e não deve exceder uma hora. Antes da adição, lave a camada celular com uma solução salina isenta de Ca²⁺/Mg²⁺, como DPBS sem cálcio e magnésio, para remover soro residual e catiões divalentes.

Manuseamento e armazenamento
Armazene o frasco fechado congelado a -15 °C ou abaixo. Descongele à temperatura ambiente ou durante a noite a +2 °C a +8 °C. Não descongele o Accutase num banho-maria a 37 °C, uma vez que as temperaturas elevadas reduzem a atividade enzimática. Após a descongelação, a solução pode ser armazenada por um período de até 2 meses a +2 °C a +8 °C; não armazene à temperatura ambiente. Não pré-aqueça o reagente a 37 °C antes da aplicação – adicione-o diretamente às células lavadas à temperatura ambiente. Para uma vida útil prolongada, recomenda-se a divisão em alíquotas de uso único para evitar ciclos de descongelação repetidos. Trabalhe sempre em condições assépticas.

Qualidade
Fabricado sob rigorosos padrões de qualidade. Cada lote de Accutase é filtrado em estéril e testado quanto à esterilidade, pH, aspeto e atividade de dissociação para garantir um desempenho consistente e reprodutível de lote para lote.

Especificações do produto



Especificação
Detalhe



Tipo de produtoReagente de desprendimento/dissociação celular
FormatoLíquido filtrado esterilizado, pronto a usar
Volume100 ml
Concentração de trabalho1x (pronto a usar)
Atividade enzimáticaProteolítica e colagenolítica combinadas
Origem enzimáticaNão mamífera e não bacteriana
Sistema tampãoPBS de Dulbecco com EDTA
Indicador de pHVermelho de fenol
Intervalo de pH6,8 – 7,8
AspectoSolução límpida, de cor vermelho-pálido a laranja
Temperatura de armazenamento-15 °C ou inferior
Estabilidade após descongelaçãoAté 2 meses a +2 °C a +8 °C
Volume de utilização recomendado~10 ml por 75 cm² de superfície de cultura
Tempo de incubação típico5 – 10 minutos à temperatura ambiente
Condições de envioCongelado em gelo seco
Utilização previstaApenas para uso em investigação e fabrico posterior



Formulação (Composição por litro)



Componente
Concentração (mg/L)




Sais inorgânicos

Cloreto de sódio (NaCl)8000,00
Hidrogenofosfato dissódico (Na₂HPO₄)1150,00
Cloreto de potássio (KCl)200,00
Dihidrogenofosfato de potássio (KH₂PO₄)200,00

Outros componentes

EDTA · 4Na (EDTA tetrassódico)220,00
Vermelho de fenol3,00
Mistura enzimática patenteada (atividade proteolítica e colagenolítica)1x



Accutase é uma marca registada da Innovative Cell Technologies, Inc.

Visão geral do produto
Volume: 100 ml Armazenamento: ≤-15°C Esterilidade: Estéril-filtrado
A Solução Antibiótica/Antimicótica (100x) é um concentrado estéril, pronto a usar, concebido para reduzir os riscos de contaminação microbiana em culturas celulares e aplicações laboratoriais relacionadas. Esta solução 100x contém uma combinação bem estabelecida de penicilina, estreptomicina e anfotericina B, proporcionando uma atividade antimicrobiana de largo espetro contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, leveduras e fungos filamentosos. A formulação é adequada para utilização em culturas de células eucarióticas, meios bacterianos e outros sistemas sensíveis à contaminação, apoiando operações laboratoriais limpas e consistentes.
Aplicação e benefícios Optimizada para protocolos de investigação de rotina, esta solução é amplamente utilizada para manter condições assépticas em fluxos de trabalho de cultura de células. Oferece um desempenho fiável em ambientes sensíveis à contaminação, ajudando os investigadores a reduzir o risco de crescimento microbiano excessivo sem comprometer a saúde das células ou a reprodutibilidade experimental. A formulação estéril-filtrada elimina a necessidade de etapas adicionais de solubilização, apoiando a preparação simplificada de meios e reduzindo a variabilidade nos procedimentos laboratoriais diários.
Utilização e compatibilidade Para obter concentrações de trabalho padrão, diluir a solução 1:100 no seu meio de cultura completo. O produto é compatível com uma vasta gama de linhas celulares de mamíferos e meios basais. Com uma disponibilidade de stock consistente, os investigadores beneficiam de uma continuidade de fornecimento fiável e de um planeamento logístico simplificado. A solução deve ser armazenada a ≤ -15 °C e protegida de ciclos repetidos de congelamento e descongelamento para manter a estabilidade. Apenas para uso em investigação. Não se destina a ser utilizado em procedimentos de diagnóstico ou terapêuticos. Não se destina a ser utilizado em seres humanos ou animais.