Roztwór do oddzielania komórek Accutase – 100 ml

Roztwór do oddzielania komórek Accutase z EDTA i czerwienią fenolową – 100 ml

Accutase to gotowy do użycia, sterylnie filtrowany roztwór do oddzielania komórek, zaprojektowany jako delikatna alternatywa dla trypsyny/EDTA do rozdzielania przylegających komórek ssaków ze standardowych plastikowych naczyń do hodowli tkankowej i powierzchni pokrytych powłoką adhezyjną. Łączy on aktywność enzymów proteolitycznych i kolagenolitycznych w zrównoważonym roztworze soli, zapewniając skuteczne, ale kontrolowane rozdzielanie, zachowując białka powierzchniowe komórek oraz wspierając wysoką żywotność po pasażowaniu i szybkie ponowne przyleganie.

Formuła Accutase opiera się na buforowanym roztworze soli fizjologicznej Dulbecco (DPBS) z dodatkiem EDTA i czerwieni fenolowej jako wizualnego wskaźnika pH. Enzymy są pochodzenia nie-ssaczego i nie-bakteryjnego, co sprawia, że Accutase szczególnie dobrze nadaje się do badań nad komórkami macierzystymi, procesów związanych ze szczepionkami oraz wszelkich zastosowań, w których należy zminimalizować zanieczyszczenia pochodzenia zwierzęcego lub mikrobiologicznego. Roztwór ulega samoczynnej inhibicji w temperaturze 37 °C, więc po oddzieleniu komórek nie jest wymagany odczynnik neutralizujący ani pożywka zawierająca surowicę – komórki można przenieść bezpośrednio do świeżej pożywki.

Najważniejsze cechy

• Gotowy do użycia 1x sterylnie filtrowany płyn – nie wymaga rozcieńczania ani rekonstytucji
• Połączona aktywność enzymów proteolitycznych i kolagenolitycznych zapewnia delikatną dysocjację
• Każda partia jest standaryzowana pod kątem określonej aktywności dysocjacyjnej, co zapewnia spójność między partiami
• Enzymy pochodzenia nie-ssaczego i nie-bakteryjnego
• Samoczynnie hamuje się w temperaturze 37 °C – nie jest potrzebny roztwór neutralizujący
• Opracowany na bazie PBS Dulbecco z EDTA
• Zawiera czerwień fenolową jako wizualny wskaźnik pH
• pH 6,8–7,8

Typowe zastosowania

Accutase delikatnie rozdziela szeroką gamę przylegających i wrażliwych typów komórek, w tym ludzkie embrionalne komórki macierzyste (hESCs), ludzkie indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste (iPSCs), komórki macierzyste układu nerwowego, pierwotne neurony oraz rutynowo hodowane linie przylegające, takie jak HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 i A549. Typowe zastosowania obejmują:

• Rutynową subkulturę i pasażowanie przylegających komórek ssaków
• Delikatną dysocjację pojedynczych komórek hESCs, iPSCs i innych wrażliwych linii
• Przygotowanie próbek do cytometrii przepływowej i analizy FACS
• Analiza markerów powierzchniowych komórek, w przypadku których istotna jest integralność epitopu
• Testy migracji, proliferacji i apoptozy komórek
• Testy spoczynku komórkowego poprzez pozbawienie surowicy oraz badania transfekcji onkogenów
• Testy migracji komórek nowotworowych i komórek grzebienia nerwowego
• Zwiększanie skali produkcji w procesach bioreaktorowych

W przypadku rutynowych prac należy zastosować około 10 ml preparatu Accutase na 75 cm² powierzchni hodowli i inkubować przez 5–10 minut w temperaturze pokojowej. Optymalny czas inkubacji należy określić dla każdej linii komórkowej i nie powinien on przekraczać jednej godziny. Przed dodaniem preparatu należy przepłukać warstwę komórek roztworem soli wolnym od Ca²⁺/Mg²⁺, takim jak DPBS bez wapnia i magnezu, w celu usunięcia resztek surowicy i kationów dwuwartościowych.

Postępowanie i przechowywanie

Nieotwartą butelkę należy przechowywać w stanie zamrożonym w temperaturze -15 °C lub niższej. Rozmrażać w temperaturze pokojowej lub przez noc w temperaturze od +2 °C do +8 °C. Nie rozmrażać preparatu Accutase w łaźni wodnej o temperaturze 37 °C, ponieważ podwyższona temperatura zmniejsza aktywność enzymu. Po rozmrożeniu roztwór można przechowywać do 2 miesięcy w temperaturze od +2 °C do +8 °C; nie przechowywać w temperaturze pokojowej. Nie należy wstępnie ogrzewać odczynnika do temperatury 37 °C przed zastosowaniem – należy go dodać bezpośrednio do przemytych komórek w temperaturze pokojowej. W celu zapewnienia długiego okresu przydatności do użycia zaleca się podział na porcje jednorazowego użytku, aby uniknąć powtarzających się cykli rozmrażania. Zawsze należy pracować w warunkach aseptycznych.

Jakość

Wyprodukowany zgodnie z rygorystycznymi normami jakości. Każda partia preparatu Accutase jest filtrowana sterylnie i badana pod kątem sterylności, pH, wyglądu i aktywności dysocjacyjnej w celu zapewnienia spójnej, powtarzalnej wydajności w poszczególnych partiach.

Specyfikacja produktu

Skład (skład na litr)

Accutase jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy Innovative Cell Technologies, Inc.