Komórki SW-620 – wpływ na badania i eksperymenty dotyczące raka jelita grubego
Komórki SW-620 stanowią ludzką linię komórkową raka jelita grubego w stadium C według klasyfikacji Dukesa. Charakteryzują się wysokim potencjałem nowotworowym i przerzutowym. Dlatego są szeroko stosowane w badaniach nad rakiem i toksykologią. W niniejszym artykule omówione zostaną podstawowe aspekty linii komórkowej raka jelita grubego SW-620.
- Pożywka hodowlana
- Do optymalnego wzrostu komórek SW-620 stosuje się pożywkę DMEM uzupełnioną 10% surowicą płodową bydlęcą, 4,5 g/l glukozy, 4 mM L-glutaminy, 1,5 g/l NaHCO3 oraz 1,0 mM pirogronianu sodu. Pożywkę należy wymieniać dwa razy w tygodniu.
- Czas podwojenia
- Czas podwojenia komórek SW-620 wynosi od 20 do 26 godzin.
- Typ wzrostu
- Linia komórkowa SW-620 jest komórkami przylegającymi. Komórki tworzą monowarstwy na powierzchni naczynia hodowlanego.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- BSL-1
- Dostępne w
- Cytion — Zamów SW-620
Pochodzenie i ogólna charakterystyka komórek SW-620
Pochodzenie i ogólna charakterystyka to najważniejsze informacje o linii komórkowej. Znajomość tych danych jest niezbędna dla naukowców, którzy rozważają wykorzystanie tej linii w swoich badaniach. W tej części artykułu wyjaśnimy kluczowe cechy i pochodzenie linii komórkowej SW-620. Dowiedziesz się przede wszystkim: Czym jest linia komórkowa SW-620? Jakie są cechy charakterystyczne linii komórkowej SW-620? Jakie jest pochodzenie linii SW-620? Jaka jest wielkość komórek SW-640? Jaka jest różnica między liniami SW-620 a SW-480?
- SW-620, linia komórkowa raka jelita grubego, pochodzi z zmiany w węźle chłonnym 51-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej z gruczolakorakiem jelita grubego [1]. Linia ta została zdeponowana przez A. Leibovitza i współpracowników.
- Komórki SW-620 mają morfologię nabłonkową. Składają się one również z małych, okrągłych i dwubiegunowych komórek przypominających mikrokosmki.
- Średnica komórek SW-620 wynosi 14,4 ± 0,3 μm.
- Te komórki raka jelita grubego charakteryzują się kariotypem hiperdiploidalnym. Modalna liczba chromosomów w komórkach SW-620 wynosi 50, przy czym może wahać się od 45 do 53.
SW-480 a SW-620
SW-480 i SW-620 to linie komórkowe raka jelita grubego. Linia SW-480 pochodzi z guza pierwotnego, natomiast linia SW-620 została wyhodowana z przerzuconego węzła chłonnego. Ponadto przeszczepy heterogeniczne wyhodowane z tych linii komórkowych różnią się od siebie. Przeszczepy SW-620 tworzą warstwy komórek nowotworowych, podczas gdy przeszczepy SW-480 tworzą struktury przypominające gruczoły [2]. Obie linie komórkowe mają identyczne profile mutacji.
Komórki SW-620: Informacje dotyczące hodowli
Zrozumienie podstawowych zasad hodowli linii komórkowej jest niezbędne, ponieważ pozwala na właściwą obsługę i utrzymanie komórek. W tej sekcji wymieniono kilka kluczowych punktów dotyczących hodowli komórek SW-620, które mogą pomóc w zrozumieniu: Czym jest pożywka dla komórek SW-620? Jaki jest czas podwojenia komórek SW-620? Jak hodować komórki SW-620?
Kluczowe informacje dotyczące hodowli komórek SW-620
Czas podwojenia:
Czas podwojenia komórek SW-620 wynosi od 20 do 26 godzin.
Komórki przylegające czy w zawiesinie:
Linia komórkowa SW-620 jest komórkami przylegającymi. Komórki tworzą monowarstwy na powierzchni naczynia hodowlanego.
Współczynnik subkultury:
Komórki SW-620 są subkultywowane przy współczynniku podziału 1:3. Komórki przylegające są płukane buforem fosforanowo-solnym (1X) bez magnezu i wapnia. Następnie dodaje się roztwór do pasażowania, Accutase, a komórki inkubuje się w temperaturze otoczenia przez 8 do 10 minut. Dodaje się świeżą pożywkę, a komórki odwirowuje się. Następnie zebrane komórki ostrożnie zawiesza się w pożywce wzrostowej i przenosi do nowych kolb w celu dalszego wzrostu.
Pożywka wzrostowa:
Do optymalnego wzrostu komórek SW-620 stosuje się pożywkę DMEM uzupełnioną 10% surowicą płodową bydlęcą, 4,5 g/l glukozy, 4 mM L-glutaminy, 1,5 g/l NaHCO₃ oraz 1,0 mM pirogronianu sodu. Pożywkę należy wymieniać dwa razy w tygodniu.
Warunki hodowli:
Komórki raka jelita grubego SW-620 hoduje się w nawilżanym inkubatorze w temperaturze 37°C i przy stężeniu CO₂ wynoszącym 5%.
Przechowywanie:
Po zamrożeniu komórki SW-620 przechowuje się w temperaturze poniżej -150°C w zamrażarkach ultra-niskotemperaturowych lub w fazie gazowej ciekłego azotu.
Proces zamrażania i pożywka:
CM-1 lub CM-ACF to idealne pożywki do zamrażania komórek SW-620. Do zamrażania komórek SW-620 stosuje się proces powolnego zamrażania. Pozwala on na spadek temperatury o zaledwie 1°C na minutę, co chroni żywotność komórek.
Proces rozmrażania:
Zamrożone komórki SW-620 rozmraża się w łaźni wodnej ustawionej na 37°C przez 40 do 60 sekund. Po rozmrożeniu dodaje się pożywkę hodowlaną, a komórki odwirowuje się w celu usunięcia składników środka zamrażającego. Następnie uzyskany osad komórkowy zawiesza się ponownie w pożywce wzrostowej, a komórki przenosi się do nowej kolby w celu dalszej hodowli.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:
Do pracy z hodowlami SW-620 wymagane jest laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1 (BSL-1).
Zalety ogniw SW-620
Zalety
- Modelowanie raka jelita grubego: Komórki SW-620 stanowią kluczowy model raka jelita grubego, umożliwiający dogłębne badanie mechanizmów powstawania nowotworów i przerzutów, szczególnie w modelach ksenotransplantacyjnych.
- Badania nad rakiem i terapie: Komórki te ułatwiają badanie biologii nowotworów, skuteczności chemioterapii oraz mechanizmów śmierci komórkowej, w tym anoikis.
- Ekspresja CD133: Ekspresja CD133 w komórkach SW-620 dostarcza informacji na temat biologii komórek macierzystych nowotworu oraz ich wpływu na powstawanie nowotworów i oporność na leczenie.
- Zastosowania cytometrii przepływowej: Analiza cytometrii przepływowej tych komórek umożliwia ocenę populacji komórkowych, poziomów apoptozy oraz proliferacji.
Zastosowania badawcze linii komórkowej SW-620
Poniżej omówiono obszary badań, w których komórki SW-620 znajdują obiecujące zastosowanie:
- Badania nad rakiem: Linia komórkowa SW-620 stanowi nieoceniony model komórkowy do badania biologii raka jelita grubego. Naukowcy wykorzystują ten model in vitro do badania mechanizmów molekularnych odpowiedzialnych za wzrost, inwazję i migrację komórek nowotworowych. Ponadto można ją wykorzystać do badania mutacji w linii komórkowej SW-620, tj. p53, APC i KRAS. W badaniach przeprowadzonych w 2021 r. analizowano wpływ mutacji genu KRAS w linii komórkowej SW-620 na wrażliwość na nowy lek FL118. Zaobserwowano, że nadekspresja KRAS zwiększa indukowaną przez FL118 apoptozę komórek jelita grubego, podczas gdy jej wyciszenie ją zmniejsza. Wyniki te mogą pomóc w przewidywaniu zastosowania FL118 u pacjentów z rakiem jelita grubego z mutacją KRAS [3].
- Przesiewanie i opracowywanie leków: Linia komórkowa SW-620 jest szeroko stosowana do przesiewania i testowania potencjalnych kandydatów na leki przeciwko rakowi jelita grubego. Naukowcy wykorzystują te komórki do oceny cytotoksyczności i skuteczności leków, co może prowadzić do opracowania ukierunkowanych metod leczenia. Przykładem jest badanie, w którym zbadano działanie przeciwnowotworowe poszczególnych związków olejków eterycznych z cynamonu i goździków na raka jelita grubego przy użyciu linii komórkowej SW-620 [4].
- Badania nad przerzutami: Ze względu na wysoki potencjał przerzutowy komórki SW-620 mogą być wykorzystywane do badania szlaków molekularnych leżących u podstaw przerzutów komórek nowotworowych. Na przykład Zhou Yang i jego współpracownicy odkryli rolę genu Grainy-head-like 2 (GRHL2) w progresji raka jelita grubego i powstawaniu przerzutów. Zaproponowali, że ekspresja genu GRHL2 hamuje progresję raka jelita grubego i powstawanie przerzutów poprzez hamowanie przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego (EMT) [5].
Zabezpiecz swoją linię komórkową SW620
Komórki SW-620: Publikacje
W tej sekcji przedstawimy kilka interesujących i najczęściej cytowanych publikacji naukowych dotyczących komórek SW-620.
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „Molecular Carcinogenesis” (2017) wysunięto hipotezę, że polifenol – urolityna A – po podaniu indukuje autofagię w linii komórkowej raka jelita grubego SW620. Hamowała ona również przerzuty komórek nowotworowych.
W artykule opublikowanym w czasopiśmie „Oncology Letters” (2018) zbadano potencjał przeciwprzerzutowy tetrandryny, alkaloidu z grupy bis-benzyloizochinolin, na komórkach SW-620.
Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „Biochemical and Biophysical Research Communications” (2018). Sugeruje on, że gen CDCA3 (Cell division cycle associated 3) ulega zwiększonej ekspresji w komórkach raka jelita grubego i sprzyja ich proliferacji poprzez aktywację szlaku sygnałowego NF-κB.
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „International Journal of Molecular Sciences” (2021) zbadano synergistyczny wpływ przeciwciała bispecyficznego (ABL001) oraz leków chemioterapeutycznych na progresję nowotworu w modelu przeszczepu heterogenicznego SW620.
Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „Cells” (2018). W niniejszym artykule zbadano działanie przeciwnowotworowe wyciągu z Bacopa monnieri (bakopazyd II) na komórki SW-620 oraz inne komórki raka jelita grubego.
Materiały dotyczące linii komórkowej SW-620: protokoły, filmy i inne
Poniżej przedstawiono kilka zasobów internetowych dotyczących komórek raka jelita grubego SW-620.
- Transfekcja linii komórkowej SW-620: W artykule tym krótko opisano protokół stabilnej transfekcji linii komórkowej SW-620.
Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek SW-620.
- Protokół hodowli komórek SW-620: Ten link zawiera podstawowe informacje na temat linii komórkowej SW-620. Pomoże Ci on również zapoznać się z protokołem subkulturowania komórek SW-620 oraz postępowania z kriokonserwowanymi i proliferującymi hodowlami SW-620.
- Protokoły hodowli komórkowej: Ten film jest doskonałym źródłem wiedzy na temat protokołów pasażowania, zamrażania i rozmrażania komórek adhezyjnych.
Często zadawane pytania dotyczące ogniw SW620
Komórki SW620 to ludzkie komórki gruczolakoraka jelita grubego uzyskane z przerzutów do węzłów chłonnych pacjenta z rakiem jelita grubego, co czyni je istotnymi dla badań nad rakiem.
Komórki SW620 mają zazwyczaj średnicę od 15 do 30 mikrometrów, choć może się ona różnić w zależności od warunków hodowli.
Komórki SW620 wykazują kilka mutacji, w tym w genie TP53. Mutacje te mogą wpływać na morfologię komórek, prowadząc do różnych kształtów i rozmiarów w populacji.
Komórki SW620 i SW480 pochodzą z gruczolakoraka jelita grubego, ale komórki SW620 pochodzą z przerzutów, podczas gdy komórki SW480 pochodzą z guza pierwotnego. Różnica ta może wpływać na ich skład genetyczny, zachowanie w hodowli i reakcję na leczenie.
Komórki SW620 odgrywają kluczową rolę w badaniach nad nowotworzeniem, zwłaszcza ze względu na ich zdolność do tworzenia guzów w mysich modelach ksenograftów i ekspresję markerów nowotworowych komórek macierzystych, takich jak CD133.
Tak, komórki SW620 są wykorzystywane do badania szlaków śmierci komórkowej, w tym apoptozy i anoikis, ponieważ reagują one na różne leki przeciwnowotworowe i warunki środowiskowe.
Wysoki potencjał przerzutowy komórek SW620 i ich pochodzenie z przerzutowego węzła chłonnego sprawiają, że są one odpowiednim modelem do badania rozprzestrzeniania się raka okrężnicy.
Cytometria przepływowa umożliwia badaczom analizę właściwości komórek SW620, w tym wzorców ekspresji CD133 oraz stopnia apoptozy lub wrażliwości na anoikis.
Komórki SW620 mają wysoki potencjał nowotworowy po wprowadzeniu do mysich modeli ksenograftów z niedoborem odporności, co czyni je cennymi w badaniach in vivo nad progresją raka.
Bibliografia
- Siekmann, W. i in., Wpływ lidokainy i ropiwakainy na pierwotne (SW480) i przerzutowe (SW620) linie komórkowe raka jelita grubego. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395–401.
- Hewitt, R.E. i in., Walidacja modelu progresji raka jelita grubego. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446–54.
- Thangaiyan, R. i in., Podtypy mutacji KRAS w różny sposób wpływają na wrażliwość komórek raka jelita grubego na FL118, nowy inhibitor surviviny, Mcl-1, XIAP, cIAP2 i MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
- Petrocelli, G. i in., Cząsteczki obecne w olejkach eterycznych roślinnych stosowane w profilaktyce i leczeniu raka jelita grubego (CRC). Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
- Yang, Z. i in., GRHL2 hamuje progresję raka jelita grubego i przerzuty poprzez hamowanie przejścia nabłonkowo-mezenchymalnego. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195–1205.