Komórki RBL-2H3 – znaczenie linii komórkowej RBL-2H3 w reakcjach alergicznych i badaniach immunologicznych
Linia komórkowa RBL-2H3 to pochodząca od szczura linia komórkowa białaczki bazofilowej wykorzystywana w badaniach immunologicznych. Służy ona jako system modelowy do badania fizjologii, zachowania i funkcji komórek tucznych. Komórki te są również wykorzystywane do badania reakcji alergicznych, procesów immunologicznych oraz testowania i opracowywania leków.
- Pożywka hodowlana
- Do hodowli komórek RBL-2H3 stosuje się pożywkę EMEM zawierającą 10% FBS, 2 mM L-glutaminy, 2,2 g/l NaHCO3 oraz sól EBSS. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
- Czas podwojenia
- Czas podwojenia liczby komórek tucznych RBL-2H3 wynosi około 50–60 godzin.
- Typ wzrostu
- RBL-2H3 jest linią komórek adhezyjnych.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- BSL-2
- Dostępne w
- Cytion — Zamów RBL-2H3
- Komórki RBL-2H3: pochodzenie i ogólna charakterystyka
- Komórki RBL-2H3: Informacje dotyczące hodowli
- Zalety i ograniczenia linii komórkowej bazofilów RBL-2H3
- Linia komórkowa RBL-2H3: fundament badań immunologicznych
- Linia komórkowa RBL-2H3: Najważniejsze pytania i odpowiedzi dla naukowców
- Bibliografia
- Linia komórkowa RBL-2H3 do zaawansowanych badań immunologicznych
- Komórki RBL-2H3: publikacje naukowe
- Materiały dotyczące linii komórkowej RBL-2H3: protokoły, filmy i inne
- Najczęściej zadawane pytania
Komórki RBL-2H3: pochodzenie i ogólna charakterystyka
Przed wykorzystaniem linii komórkowej bazofilów w swoich badaniach należy zapoznać się z jej pochodzeniem i ogólnymi cechami. W tej części artykułu przedstawiono podstawowe informacje na temat komórek RBL-2H3. Na przykład: Czym są komórki tuczne RBL-2H3? Dlaczego warto stosować komórki RBL-2H3? Czym są komórki RBL-2H3 w białaczce bazofilowej szczura? Jaka jest morfologia komórek RBL-2H3? Czy komórki RBL-2H3 są nieśmiertelne?
- Komórki RBL-2H3 to komórki białaczki bazofilowej wyhodowane z komórek bazofilowych szczura rasy Wistar w 1978 roku w Laboratorium Immunologii Narodowego Instytutu Badań Stomatologicznych.
- Komórki RBL-2H3 posiadają receptor kinazy tyrozynowej c-kit oraz receptory proteazy komórek tucznych II (RMCP-II), co czyni je potencjalnym modelem komórek tucznych. Dlatego też są one powszechnie nazywane komórkami tucznymi, mimo że pochodzą z bazofilów szczurzych [1].
- Po aktywacji uwalniają histaminę i inne mediatory oraz wykazują ekspresję receptorów IgE o wysokim powinowactwie.
- Komórki RBL-2H3 wykazują morfologię podobną do fibroblastów.
Komórki RBL-2H3: Informacje dotyczące hodowli
W tej sekcji poznasz kilka kluczowych aspektów hodowli linii komórkowej RBL-2H3. Dowiesz się: Jaki jest czas podwojenia komórek RBL-2H3? Jaka jest gęstość wysiewu komórek RBL-2H3? Jaki jest protokół hodowli komórek RBL-2H3? Jakie jest podłoże do zamrażania linii komórkowej RBL-2H3?
Kluczowe informacje dotyczące hodowli komórek RBL-2H3
Czas podwojenia populacji:
Czas podwojenia populacji komórek tucznych RBL-2H3 wynosi około 50–60 godzin.
Komórki przylegające czy w zawiesinie:
RBL-2H3 jest linią komórkową adhezyjną.
Współczynnik podziału:
W przypadku komórek RBL-2H3 współczynnik podziału utrzymuje się w zakresie od 1:2 do 1:4. Komórki przylegające przemywa się roztworem 1× PBS bez magnezu i wapnia. Roztwór do pasażowania Dodaje się Accutase, a komórki pozostawia się w temperaturze otoczenia na 10 minut, aby oddzieliły się od dna naczynia hodowlanego. Dodaje się świeżą pożywkę, a komórki poddaje się wirowaniu. Zebrane komórki ostrożnie zawiesza się w świeżej pożywce i przelewa do nowych kolb zawierających pożywkę wzrostową.
Pożywka wzrostowa:
Do hodowli komórek RBL-2H3 stosuje się pożywkę EMEM zawierającą 10% FBS, 2 mM L-glutaminy, 2,2 g/l NaHCO₃ oraz sól EBSS. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
Warunki hodowli:
Komórki RBL-2H3 hoduje się w nawilżanym inkubatorze ustawionym na temperaturę 37 °C i podłączonym do źródła 5% CO₂.
Przechowywanie:
Komórki przechowuje się w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150 °C w zamrażarce elektrycznej w celu zapewnienia ich długotrwałej żywotności.
Proces zamrażania i pożywka:
Do zamrażania komórek RBL-2H3 metodą powolnego zamrażania stosuje się pożywkę zamrażającą CM-1 lub CM-ACF. Krótko mówiąc, metoda ta pozwala na obniżanie temperatury o 1 °C na minutę i chroni komórki przed szokiem termicznym.
Proces rozmrażania:
Komórki RBL-2H3 rozmraża się w ściśle ustawionej łaźni wodnej (37 °C) przez około 60 sekund. Następnie komórki dodaje się do świeżego podłoża hodowlanego i odwirowuje. Ten etap jest niezbędny do usunięcia składników podłoża zamrażającego. Następnie osad komórkowy zawiesza się ponownie w pożywce wzrostowej, a komórki umieszcza się w kolbie do hodowli.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:
Komórki RBL-2H3 należy przechowywać w laboratoriach o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.
Opublikowano: 2023 | Ostatnia aktualizacja: maj 2026
Zalety i ograniczenia linii komórkowej bazofilów RBL-2H3
Komórki RBL-2H3 są powszechnie wykorzystywane w badaniach immunologicznych. W niniejszym rozdziale przedstawiono ich główne zalety i ograniczenia.
Zalety
- Łatwość hodowli: Komórki RBL-2H3 można łatwo hodować i utrzymywać w warunkach laboratoryjnych. Ułatwia to przeprowadzanie ekonomicznych i powtarzalnych eksperymentów, co sprawia, że są one popularnym wyborem do wstępnych badań w dziedzinie immunologii.
Ograniczenia
- Pochodzenie inne niż ludzkie: Komórki RBL-2H3, pochodzące z bazofilów szczurzych, mogą nie odzwierciedlać dokładnie procesów biologicznych zachodzących u ludzi, co może ograniczać ich zastosowanie w badaniach dotyczących wyłącznie człowieka. Wymaga to ostrożnej interpretacji danych przy ekstrapolacji wyników na organizmy ludzkie.
- Uproszczony model komórek tucznych: Chociaż komórki te stanowią podstawowy model do badania funkcji komórek tucznych, nie odzwierciedlają w pełni złożonego charakteru interakcji komórek tucznych w ludzkim układzie odpornościowym. W związku z tym mogą nie odzwierciedlać w odpowiedni sposób wieloaspektowej roli komórek tucznych w reakcjach immunologicznych lub stanach chorobowych in vivo.
Linia komórkowa RBL-2H3: fundament badań immunologicznych
Badania nad bazofilami i komórkami tucznymi z wykorzystaniem linii komórkowej RBL-2H3
Linia komórkowa RBL-2H3, pochodząca od Rattus norvegicus, służy jako kluczowy model do badania biologii bazofilów i komórek tucznych. Te komórki tuczne szczura dostarczają istotnych informacji na temat uwalniania mediatorów przez komórki tuczne, co ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia schorzeń alergicznych, takich jak alergiczny nieżyt nosa. Za pomocą tych komórek naukowcy badają dynamikę receptorów komórkowych oraz powstawanie synaps immunologicznych, które odgrywają kluczową rolę w odpowiedzi układu odpornościowego na alergeny. W interesującym badaniu opublikowanym w 2019 r. wykorzystano linię komórkową RBL-2H3 do zbadania mechanizmów leżących u podstaw reakcji pseudoalergicznych wywołanych wstrzyknięciem preparatu Qingkailing. W badaniu tym stwierdzono, że kaskada sygnałowa PI3K-RAC1 częściowo wywołuje tę reakcję alergiczną w komórkach [2].
Dynamika synaps immunologicznych w badaniach nad alergią
Komórki RBL-2H3, szeroko stosowane w badaniach immunologicznych, są szczególnie skuteczne w badaniu dynamiki synaps immunologicznych. Pomaga to w wyjaśnieniu procesów komunikacyjnych układu odpornościowego, co znajduje zastosowanie w badaniach zarówno komórek tucznych krwi obwodowej, jak i komórek tucznych jamy otrzewnej. Badania te mają kluczowe znaczenie dla kompleksowego zrozumienia odpowiedzi immunologicznej zarówno w kontekście ogólnoustrojowym, jak i miejscowym.
Przesiewanie leków i badania toksyczności
W przesiewaniu leków i testach toksyczności wykorzystuje się reaktywność komórek RBL na różne bodźce, w tym bada się, w jaki sposób H₂O₂ hamuje reakcje, w których pośredniczy IgE. Komórki te odgrywają istotną rolę w opracowywaniu metod leczenia chorób, takich jak zakażenia paciorkowcami, w których paciorkowce z grupy mitis hamują aktywację komórek tucznych. Ponadto naukowcy oceniają toksyczne działanie różnych substancji, w tym chemikaliów, leków i nanocząstek, wykorzystując model komórek RBL 2H3. Na przykład w niedawnym badaniu (2022) oceniono cytotoksyczność mikroplastików polistyrenowych na komórki RBL-2H3. Stwierdzono, że mikroplastiki uszkadzają organelle komórek RBL-2H3 i sprzyjają śmierci komórkowej [3]. W innym badaniu z 2021 r. oceniono potencjał przeciwalergiczny i przeciwzapalny naturalnego związku, neferyny, z wykorzystaniem modelu RBL 2H3 mc. Badanie wykazało dobre właściwości przeciwalergiczne i przeciwzapalne tego związku [4].
Zaawansowane metody pomiarów immunologicznych
Spójne i mierzalne uwalnianie mediatorów z komórek RBL-2H3 sprawia, że idealnie nadają się one do wygodnej fluorometrii, ułatwiającej precyzyjne i dokładne pomiary, które mają kluczowe znaczenie dla badań nad chorobami oraz oceny środków terapeutycznych.
Linia komórkowa RBL-2H3, wywodząca się z gatunku Rattus norvegicus, stanowi nieoceniony zasób zarówno w badaniach podstawowych, jak i stosowanych w dziedzinie immunologii. Oferuje ona ogromne możliwości poszerzania naszej wiedzy oraz rozwoju metod leczenia chorób immunologicznych.
Linia komórkowa RBL-2H3 do zaawansowanych badań immunologicznych
Komórki RBL-2H3: Publikacje naukowe
Poniżej przedstawiono kilka interesujących publikacji naukowych dotyczących komórek tucznych RBL-2H3:
Działanie hamujące narirutyny na degranulację komórek RBL-2H3
Artykuł ten ukazał się w czasopiśmie „Immunopharmacology and Immunotoxicology” (2021). W badaniu tym wysunięto hipotezę, że narirutyna, związek naturalny, wywiera działanie hamujące na degranulację komórek RBL-2H3 poprzez regulację szlaków sygnałowych NF-κB, MAPK oraz kinazy tyrozynowej.
W badaniach opublikowanych w czasopiśmie „International Journal of Molecular Sciences” (2020) wysunięto hipotezę, że apigenina znacząco hamuje reakcje alergiczne i zapalne komórek RBL-2H3 oraz RAW264.7. W związku z tym może ona służyć jako potencjalny środek do zwalczania chorób o podłożu immunologicznym.
W niniejszym artykule naukowym opublikowanym w czasopiśmie „International Journal of Molecular Sciences” (2021) oceniono działanie przeciwalergiczne i przeciwzapalne naturalnego związku – saponaryny – z wykorzystaniem różnych linii komórkowych, w tym RBL-2H3.
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine” (2014) stwierdzono, że ekstrakty z Benchalokawichian oraz niektóre jego aktywne składniki wywierają potencjalne działanie hamujące na uwalnianie β-heksosaminidazy z komórek RBL-2H3.
Artykuł ten został opublikowany w 2018 roku w czasopiśmie „International Journal of Biological Macromolecules”. W badaniu stwierdzono, że spirulina maxima, produkt naturalny, hamuje degranulację komórek RBL 2H3 poprzez zapobieganie fosforylacji szlaków MAPK i AKT.
Materiały dotyczące linii komórkowej RBL-2H3: protokoły, filmy i inne
RBL-2H3 to powszechnie stosowana linia komórek tucznych. Poniżej wymieniono dostępne materiały dotyczące protokołów hodowli i transfekcji komórek RBL-2H3:
- Model komórek tucznych RBL-2H3: Ten artykuł naukowy zawiera protokoły dotyczące utrzymywania hodowli RBL-2H3 oraz transfekcji komórek RBL-2H3.
Oto kilka zasobów wyjaśniających protokół hodowli komórek RBL-2H3:
- Komórki RBL-2H3: Ta strona internetowa jest przydatna do zapoznania się z protokołami hodowli komórek linii RBL-2H3. Ponadto zawiera informacje na temat pożywek komórkowych RBL-2H3 oraz warunków hodowli.
Linia komórkowa RBL-2H3: Najważniejsze pytania i odpowiedzi dla naukowców
Bibliografia
- Passante, E. i N. Frankish, Linia komórkowa RBL-2H3: jej pochodzenie i przydatność jako modelu komórki tucznej. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737–45.
- Li, Q. i in., Reakcja pseudoalergiczna wywołana przez zastrzyk Qingkailing, częściowo za pośrednictwem szlaku sygnałowego PI3K-Rac1 w komórkach RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353–360.
- Liu, L. i in., Mikro- (nano-) tworzywa polistyrenowe uszkadzają organelle komórek RBL-2H3 i pobudzają MOAP-1 do indukowania apoptozy. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M. i in., Działanie przeciwalergiczne i przeciwzapalne neferyny na komórki RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.