Linia komórkowa MG-63: Szczegółowy przewodnik po komórkach MG-63 w badaniach nad osteosarcomą
Komórki MG-63 to komórki ludzkiego osteosarcoma o charakterze podobnym do fibroblastów, które oferują szeroki zakres zastosowań badawczych w dziedzinie biomedycyny. Może to obejmować badanie procesów związanych z kością, takich jak rozwój kości, różnicowanie itp. Ponadto linia komórkowa MG-63 stanowi odpowiedni model in vitro do badania żywotności, proliferacji i adhezji komórek kostnych.
Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej MG-63
W tej części artykułu omówimy pochodzenie i ogólną charakterystykę linii komórkowej MG-63. Dowiesz się: Czym jest linia komórkowa MG-63? Jakie jest pochodzenie linii komórkowej MG-63? Jaka jest morfologia komórek MG-63? Jaka jest wielkość komórek MG-63?
- MG-63 to linia komórkowa osteoblastów pochodząca z kości 14-letniego pacjenta (rasy kaukaskiej) cierpiącego na osteosarcomę. A. Billiau i współpracownicy zdeponowali tę linię komórkową w 1977 roku.
- Linia komórkowa MG-63 charakteryzuje się morfologią podobną do komórek fibroblastów.
- Ludzkie komórki osteosarcoma (MG-63) wykazują hipotriploidię. Modalna liczba chromosomów dla tych komórek wynosi 66, co występuje u około 44% populacji komórek. W prawie 2% populacji komórek odnotowano również wyższe ploidie. Ponadto we wszystkich komórkach występuje duża liczba chromosomów markerowych 18–19.
Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej MG-63
Ważne informacje na temat wymagań dotyczących hodowli linii komórkowej mogą ułatwić Państwu pracę. W tej części artykułu wymieniono wszystkie kluczowe kwestie istotne dla hodowli i utrzymania komórek MG-63. Dowiedzą się Państwo: Jaki jest czas podwojenia komórek MG-63? Jakie pożywki stosuje się do hodowli komórek MG-63? Jaka jest gęstość wysiewu komórek MG-63?
Kluczowe kwestie dotyczące hodowli komórek MG-63
Czas podwojenia
Czas podwojenia populacji komórek MG-63 wynosi od 28 do 38 godzin, w zależności od warunków hodowli.
Właściwości wzrostowe
MG-63 to linia komórek adhezyjnych.
Gęstość wysiewu
W przypadku komórek MG-63 zaleca się gęstość wysiewu wynoszącą 1 x 10⁴ komórek/cm². Komórki adhezyjne przemywa się 1× buforem fosforanowo-solnym (PBS) bez magnezu i wapnia. Następnie komórki te inkubuje się z roztworem dysocjującym (Accutase), dodaje się świeżą pożywkę i odwirowuje. Otrzymany osad komórkowy zawiesza się w świeżej pożywce i przenosi do nowej kolby w celu dalszego wzrostu.
Pożywka hodowlana
Do hodowli komórek MG-63 stosuje się pożywki DMEM lub Ham’s F12. Pożywki te można wzbogacić o 5% surowicy płodowej bydlęcej (FBS), 3,0 g/l glukozy, 2,5 mM L-glutaminy oraz 1,2 g/l NaHCO₃ w celu uzyskania optymalnego wzrostu komórek. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
Warunki hodowli
Do hodowli komórek MG-63 wymagana jest nawilżana inkubator o temperaturze 37°C i dopływie 5% CO₂.
Przechowywanie
Te komórki podobne do osteoblastów można przechowywać w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150°C w celu zachowania żywotności komórek.
Proces zamrażania i pożywka
Do zamrażania komórek MG-63 stosuje się pożywki CM-1 lub CM-ACF. Zazwyczaj zaleca się powolny proces zamrażania, aby zapobiec szokowi komórkowemu i chronić ich żywotność.
Proces rozmrażania
Zamrożone komórki inkubuje się przez 40 do 60 sekund w podgrzanej wcześniej łaźni wodnej (37 stopni Celsjusza). Komórki zawiesza się w świeżym podłożu hodowlanym i przelewa do nowej kolby. Po 24 godzinach inkubacji podłoże wymienia się w celu usunięcia składników podłoża zamrażającego.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
Do obsługi i utrzymywania hodowli MG-63 konieczne są warunki laboratoryjne zgodne z poziomem bezpieczeństwa biologicznego 1.
- Linia komórkowa MG-63: zalety i wady
- Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej MG-63
- Zamów komórki MG-63 już dziś
- Zastosowania komórek MG-63
- Publikacje naukowe dotyczące komórek MG-63
- Materiały dotyczące linii komórkowej MG-63: protokoły, filmy i inne
- Najczęściej zadawane pytania dotyczące komórek MG-63
- Bibliografia
- Najczęściej zadawane pytania
Linia komórkowa MG-63: zalety i wady
MG-63 to szeroko stosowana linia komórkowa osteoblastów. Wiąże się z nią kilka zalet i wad. W niniejszym artykule omówimy kilka głównych zalet i wad linii komórkowej MG-63.
Zalety
Zalety komórek MG-63 to:
-
Cechy charakterystyczne dla osteoblastów
Linia komórkowa MG-63 wykazuje cechy charakterystyczne dla osteoblastów, dzięki czemu nadaje się do badania procesów i chorób związanych z kością. Można ją również wykorzystać do badania adhezji, proliferacji i żywotności komórek na powierzchniach tytanowych [1].
-
Przystosowanie do transfekcji
Komórki MG-63 są szeroko wykorzystywane w badaniach nad transfekcją, umożliwiając badania nad ekspresją genów, ich funkcją oraz procesami komórkowymi.
-
Wysoka produkcja interferonu
Komórki MG-63 są zdolne do produkcji interferonu na wysokim poziomie. Po indukcji cykloheksymidem, kwasem poliinozynowo-policytydylowym i aktynomycyną mogą one wytwarzać 3,7-krotnie większą ilość interferonu na cm² niż fibroblasty diploidalne [2].
Wady
Wady związane z komórkami B MG-63 to:
-
Heterogenność
Komórki MG-63 wykazują heterogenność w obrębie populacji komórkowej, co może wpływać na powtarzalność wyników.
-
Linia komórek nowotworowych
MG-63 jest linią komórek nowotworowych i może nie odzwierciedlać w pełni zachowania i fizjologii komórek prawidłowych, co ogranicza jej zastosowanie w niektórych eksperymentach laboratoryjnych.
Zamów ogniwa MG-63 już dziś
Zastosowania komórek MG-63
Komórki MG-63 stanowią doskonałe narzędzie badawcze. Oferują one wiele obiecujących zastosowań w dziedzinie badań naukowych. Poniżej wymieniono kilka głównych zastosowań komórek MG-63 w badaniach naukowych.
- Badania procesów i chorób związanych z kością: Komórki MG-63 są komórkami podobnymi do osteoblastów (komórek tworzących kość). Dlatego też komórki te są szeroko wykorzystywane do badania chorób kości oraz procesów komórkowych, w tym rozwoju, różnicowania i mineralizacji. Ponadto komórki te są szeroko stosowane do badań przesiewowych leków terapeutycznych wspomagających gojenie kości. W badaniach wykorzystano komórki MG-63 do analizy potencjału terapeutycznego nanocząstek tlenku cynku, zsyntetyzowanych metodą ekologiczną z Scutellaria baicalensis, w zakresie proliferacji, mineralizacji i różnicowania komórek kostnych [3].
- Badania nad rakiem: Komórki MG-63 są szeroko stosowane w badaniach nad rakiem. W kilku badaniach wykorzystano te komórki osteosarcoma w celu zrozumienia szlaków sygnałowych nowotworów oraz oceny potencjału cytotoksycznego i terapeutycznego leków. W badaniu przeprowadzonym w 2019 roku zbadano właściwości przeciwnowotworowe naturalnego związku, tomentosyny, z wykorzystaniem komórek MG-63. Wyniki wykazały, że tomentosyna wykazuje działanie przeciwnowotworowe poprzez wywoływanie wewnątrzkomórkowej produkcji reaktywnych form tlenu (ROS) [4].
Publikacje naukowe dotyczące komórek MG-63
Poniżej przedstawiono wybrane publikacje naukowe dotyczące linii komórkowej MG-63, przypominającej osteoblasty.
miR-192 zwiększa wrażliwość komórek nowotworowych osteosarcoma MG-63 na metotreksat
Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „Pathology – Research and Practice” w 2020 roku. W ramach tych badań wykorzystano komórki MG-63 do zbadania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw oporności na leki w komórkach nowotworowych osteosarcoma (MG-63). Wyniki wykazały, że miRNA-192 może stanowić użyteczny cel w przezwyciężaniu oporności na metotreksat w przypadku osteosarcoma.
Badania te zostały opublikowane w czasopiśmie „Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology” (2020). W badaniu opisano potencjał przeciwnowotworowy nanocząstek tlenku cynku (ZnONPs) syntetyzowanych metodą ekologiczną z korzenia Rehmanniae Radix wobec komórek raka kości (MG-63).
Artykuł naukowy został opublikowany w 2021 roku w czasopiśmie „Materials Science and Engineering”. W badaniu tym wykazano właściwości wspomagające gojenie kości biosyntetyzowanych nanocząstek tlenku cynku pochodzących z rośliny Scutellaria baicalensis przy użyciu linii komórkowej MG-63.
Kurkumina hamuje proliferację i inwazję komórek MG-63 poprzez inaktywację szlaku p-JAK2/p-STAT3
Badanie to zostało opublikowane w 2021 roku w czasopiśmie „Onco Targets and Therapy”. W badaniach tych wykazano właściwości przeciwnowotworowe kurkuminy wobec komórek osteosarcoma. Związek ten wywierał te efekty terapeutyczne poprzez dezaktywację szlaku sygnałowego p-JAK2/p-STAT3 związanego z nowotworami.
Badania te zostały opublikowane w 2018 roku w czasopiśmie „International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science”. W badaniu stwierdzono, że witamina D3 poddana działaniu energii biopola pozytywnie wpływa na proliferację, dojrzewanie i różnicowanie komórek kostnych oraz poprawia parametry zdrowia kości.
Materiały dotyczące linii komórkowej MG-63: protokoły, filmy i inne
Dostępnych jest kilka materiałów dotyczących linii komórkowej MG-63, wyjaśniających protokoły hodowli komórek i transfekcji.
- Transfekcja komórek MG-63: Ten film wyczerpująco wyjaśnia protokół transfekcji komórek MG-63.
- Pasażowanie komórek adhezyjnych: Ten film przedstawia instrukcję subkulturowania lub pasażowania linii komórkowych adhezyjnych. Pomoże on w opanowaniu podstawowych protokołów hodowli komórkowej.
Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek MG-63.
- Hodowla komórek MG-63: Ta strona internetowa zawiera prosty i szczegółowy protokół dotyczący subkultury lub podziału linii komórkowej MG-63.
Najczęściej zadawane pytania dotyczące komórek MG-63
Komórki MG-63 to ludzka linia komórek kostniakomięsaka powszechnie wykorzystywana w badaniach nad biologią kości, biologią nowotworów i testowaniem leków. Pochodzą one z kostniakomięsaka 14-letniego mężczyzny i wykazują cechy typowe dla komórek osteoblastycznych.
Komórki MG-63 pochodzą z ludzkiego kostniakomięsaka, rodzaju raka kości. W szczególności pochodzą one ze złośliwej tkanki kostnej ludzkiego pacjenta.
Czas podwojenia komórek MG-63 wynosi zazwyczaj od 24 do 36 godzin, w zależności od warunków hodowli i zastosowanego podłoża.
Komórki MG-63 wykazują nieprawidłowy kariotyp z wieloma nieprawidłowościami chromosomalnymi. Obejmuje to zarówno aberracje liczbowe, jak i strukturalne, które są charakterystyczne dla komórek nowotworowych.
Podczas gdy komórki MG-63 są komórkami kostniakomięsaka, ludzkie fibroblasty pochodzą z tkanki łącznej i są zaangażowane w gojenie się ran i tworzenie macierzy zewnątrzkomórkowej. Oba typy komórek są wykorzystywane w badaniach interakcji komórkowych, szczególnie w kontekście inżynierii kości i tkanek.
Komórki MG-63 mają silne właściwości przyłączania komórek, dzięki czemu nadają się do badań obejmujących adhezję komórek, rozprzestrzenianie się i interakcję z różnymi biomateriałami. Właściwości te mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia funkcji osteoblastów i optymalizacji implantów kostnych.
Komórki MG-63 są wykorzystywane w badaniach nad rolą adenozyny w metabolizmie kości. Receptory adenozyny na tych komórkach pośredniczą w różnych funkcjach, w tym w tworzeniu i resorpcji kości, co czyni je cennymi do badania molekularnych mechanizmów metabolizmu kości.
Amelogenina, białko niezbędne do tworzenia szkliwa w zębach, może być również badana przy użyciu komórek MG-63 w celu zbadania jej wpływu na komórki kostne i jej potencjalnej roli w inżynierii i regeneracji tkanki kostnej.
Komórki MG-63 odgrywają kluczową rolę w badaniu optymalizacji osseointegracji, czyli procesu integracji tkanki kostnej z implantami. Naukowcy wykorzystują te komórki do testowania nowych materiałów i modyfikacji powierzchni, które mogą poprawić integrację i stabilność implantów.
Stabilność fenotypowa odnosi się do spójności cech komórkowych w czasie i w wielu pasażach. W przypadku komórek MG-63 utrzymanie stabilności fenotypowej ma zasadnicze znaczenie dla zapewnienia wiarygodnych i powtarzalnych wyników eksperymentów.
Komórki MG-63 służą jako model do badania funkcji osteoblastów, w tym tworzenia i mineralizacji kości, a także patofizjologii kostniakomięsaka, zapewniając wgląd w progresję nowotworu i potencjalne cele terapeutyczne.
Tak, komórki MG-63 mogą być wykorzystywane do badania wpływu ludzkich interferonów na komórki raka kości, w tym ich właściwości przeciwwirusowych, antyproliferacyjnych i immunomodulacyjnych, przyczyniając się do zrozumienia immunoterapii nowotworów.
Bibliografia
- Wandiyanto, J.V. i in., Losy komórek MG-63 podobnych do osteoblastów na wstępnie zainfekowanych, bakteriobójczych powierzchniach tytanu o nanostrukturze. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A. i in., Ludzki interferon: masowa produkcja w nowo utworzonej linii komórkowej MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): s. 11–5.
- Tang, Y. i in., Potencjał różnicowania osteogenicznego i mineralizacji nanocząstek tlenku cynku pochodzących z Scutellaria baicalensis na ludzkich komórkach MG-63 podobnych do osteoblastów. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: s. 111656.
- Lee, C.M. i in., Tomentosina wykazuje działanie przeciwnowotworowe w ludzkich komórkach osteosarcoma MG-63 poprzez indukcję wewnątrzkomórkowych reaktywnych form tlenu. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): s. 1508.