Komórki HT55

430,00 €*

Produkty są wysyłane w stanie zamrożonym w suchym lodzie w probówkach kriogenicznych. Każda probówka kriogeniczna zawiera zazwyczaj 3 × 10 ⁶ komórek dla linii adhezyjnych lub 5 × 10⁶ komórek dla linii zawiesinowych (szczegółowe informacje znajdują się w certyfikacie analizy partii).

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 305018

Karta charakterystyki

Karta produktu

Umowa transferu materiałów

Opis	HT55 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka odbytnicy, wyhodowana z pierwotnego guza odbytnicy 54-letniej kobiety rasy kaukaskiej. Linia ta rośnie w postaci przylegającej monowarstwy o morfologii przypominającej nabłonek i jest zarejestrowana w bazie Cellosaurus pod numerem CVCL_1294. HT55 nosi liczne heterozygotyczne i homozygotyczne mutacje powodujące utratę funkcji w genie supresorowym nowotworów APC (adenomatous polyposis coli), w tym p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr oraz p.Lys241Ter (wszystkie heterozygotyczne), a także homozygotyczną substytucję p.Arg213Leu. Ten profil mutacji sprawia, że HT55 jest biologicznie istotnym modelem karcynogenezy jelita grubego wywołanej przez gen APC, odzwierciedlającym zaburzenia kanonicznego szlaku WNT, które są przyczyną większości nowotworów jelita grubego u ludzi. Linia HT55 jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem jelita grubego w zakresie sygnalizacji WNT/β-kateniny, funkcji supresora nowotworowego APC, wrażliwości i oporności na leki oraz przedklinicznej oceny leków celowanych skierowanych przeciwko składnikom szlaku WNT. Linia ta nadaje się do testów farmakologicznych in vitro oraz badań na przeszczepach heterogenicznych w modelach myszy z obniżoną odpornością, zapewniając przylegającą, łatwą w obsłudze platformę in vitro do badań mechanistycznych i translacyjnych nad rakiem jelita grubego. Obecność wielu mutacji skracających gen APC sprawia, że linia HT55 jest reprezentatywna dla podtypu raka jelita grubego o stabilności mikrosatelitarnej i niestabilności chromosomowej, często spowodowanego utratą funkcji genu APC. Linia HT55 jest hodowana w pożywce EMEM (MEM Eagle, w: 2 mM L-glutaminy, w: 2,2 g/l NaHCO₃, w: EBSS; numer katalogowy Cytion 820100a) uzupełnionym 10% FBS w temperaturze 37°C w nawilżonej atmosferze zawierającej 5% CO₂. Komórki poddaje się subkulturowi przy użyciu Accutase, gdy osiągną około 80–90% konfluencji, przy zalecanym współczynniku podziału wynoszącym 1:3 do 1:5 oraz gęstości wysiewu wynoszącej 1–3 × 10⁴ komórek/cm². Pożywkę wymienia się co 2–3 dni. Czas podwojenia wynosi około 28 godzin.
Organizm	Człowiek
Tkanka	Odbytnica
Choroba	Gruczolakorak
Zastosowania	Badania nad rakiem jelita grubego; badania nad szlakiem WNT/APC; badania wrażliwości i oporności na leki; onkologia przedkliniczna; modele przeszczepów heterogenicznych; ocena terapii celowanych
Synonimy	HT55

Wiek	54 lata
Płeć	Kobieta
Pochodzenie etniczne	Kaukaski
Morfologia	Podobny do nabłonka
Typ komórki	Komórki nabłonkowe
Właściwości wzrostu	Adherent

Cytat	HT55 (numer katalogowy Cytion 305018)
Poziom bezpieczeństwa biologicznego	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1294

Profil mutacyjny	Mutacja: p.Gln1131Ter, heterozygotyczna; Mutacja: p.Gln1303Ter, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg1463Ser, heterozygotyczna; Mutacja: p.Asn581Tyr, heterozygotyczna; Mutacja: p.Lys241Ter, heterozygotyczna; Mutacja: p.Arg213Leu, homozygotyczna

Podłoże hodowlane	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Suplementy	Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny	Accutase
Czas podwojenia	28 godzin
Subkultury	Usunąć stare podłoże z przylegających komórek i przepłukać je roztworem PBS bez wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3–5 ml roztworu PBS, a w przypadku kolb T75 – 5–10 ml. Następnie całkowicie zalej komórki preparatem Accutase, używając 1–2 ml w przypadku kolb T25 i 2,5 ml w przypadku kolb T75. Pozostaw komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 8–10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki w celu ich ponownego zawieszenia, a następnie odwirowaj przy 300×g przez 3 minuty. Odrzuć supernatant, zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieś je do nowych kolb, w których znajduje się już świeża pożywka.
Współczynnik podziału	od 1 do 5
Gęstość siewu	1 do 3 x 10⁴ ^komórek/cm²
Odnawianie płynów	Co 2 do 3 dni
Środek zamrażający	Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Rozmrażanie i hodowla komórek	Upewnij się, że fiolka pozostaje głęboko zamrożona w momencie dostawy, ponieważ komórki są wysyłane w suchym lodzie, aby utrzymać optymalną temperaturę podczas transportu. Po otrzymaniu należy natychmiast przechowywać fiolkę w temperaturze poniżej -150°C, aby zapewnić zachowanie integralności komórek, lub przejść do kroku 3, jeśli wymagana jest natychmiastowa hodowla. W przypadku natychmiastowej hodowli należy szybko rozmrozić fiolkę, zanurzając ją w łaźni wodnej o temperaturze 37°C z czystą wodą i środkiem przeciwdrobnoustrojowym, delikatnie mieszając przez 40-60 sekund, aż pozostanie niewielka grudka lodu. Wykonaj wszystkie kolejne kroki w sterylnych warunkach w kapturze przepływowym, dezynfekując fiolkę 70% etanolem przed otwarciem. Ostrożnie otworzyć zdezynfekowaną fiolkę i przenieść zawiesinę komórek do 15 ml probówki wirówkowej zawierającej 8 ml podłoża hodowlanego o temperaturze pokojowej, delikatnie mieszając. Wirować mieszaninę z prędkością 300 x g przez 3 minuty w celu oddzielenia komórek i ostrożnie odrzucić supernatant zawierający pozostałości pożywki do zamrażania. Delikatnie ponownie zawiesić osad komórek w 10 ml świeżego podłoża hodowlanego. W przypadku komórek przylegających, rozdzielić zawiesinę pomiędzy dwie kolby hodowlane T25; w przypadku hodowli zawiesinowych, przenieść całą pożywkę do jednej kolby T25 w celu promowania skutecznej interakcji i wzrostu komórek. Przestrzegaj ustalonych protokołów podhodowli w celu ciągłego wzrostu i utrzymania linii komórkowej, zapewniając wiarygodne wyniki eksperymentów.
Atmosfera inkubacji	37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.
Warunki wysyłki	Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
Warunki przechowywania	W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Jeśli zamierzają Państwo wykorzystywać linie komórkowe Cytion wyłącznie do badań wewnętrznych w jednym ośrodku badawczym, prosimy o wypełnienie i podpisanie naszej umowy o transferze materiałów (MTA) oraz przesłanie jej wraz z zamówieniem.

W przypadku wszelkich zastosowań komercyjnych — w tym między innymi prac wykonywanych za wynagrodzeniem, testów kontroli jakości, wprowadzania produktów na rynek, zastosowań diagnostycznych lub badań regulacyjnych — prosimy o wypełnienie formularza przeznaczenia, abyśmy mogli przygotować umowę dostosowaną do Państwa projektu.

Uwaga: Umowa MTA dotyczy tylko niektórych linii komórkowych. Jeśli ta informacja i dokument MTA pojawiają się na stronie produktu, umowa ma zastosowanie. W przypadku linii komórkowych nieobjętych umową MTA nie będzie wyświetlana żadna informacja o umowie. Umowa MTA nie obowiązuje klientów z Ameryki, Chin i Tajwanu. Aby otrzymać odpowiednią umowę, skontaktuj się z naszym oddziałem w Stanach Zjednoczonych.

Komórki HT55

Informacje ogólne

Charakterystyka

Dane regulacyjne

Dane biomolekularne

Obsługa

Kontrola jakości i analiza molekularna

Umowa transferu materiałów