EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Pożywka Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) jest jedną z najczęściej stosowanych pożywek bazowych do hodowli szerokiej gamy komórek ssaków, zwłaszcza linii komórkowych przylegających do podłoża. Ta klasyczna formuła, opracowana pierwotnie przez Harry’ego Eagle’a, zawiera niezbędne aminokwasy, witaminy i sole nieorganiczne wymagane do wspierania wzrostu zarówno komórek pierwotnych, jak i ustabilizowanych linii komórkowych w standardowych warunkach hodowli.
Ta gotowa do użycia, sterylnie filtrowana płynna formuła jest uzupełniona zrównoważonym roztworem soli Earle'a (EBSS), 2 mM L-glutaminą, D-glukozą (1,0 g/l) oraz 2,2 g/l wodorowęglanem sodu (NaHCO3), dzięki czemu nadaje się do stosowania w atmosferze inkubatora z kontrolowanym poziomem CO2 (zazwyczaj 5% CO2). Zawarty w preparacie fenolowy czerwony pełni rolę wskaźnika pH, umożliwiając wygodne wizualne monitorowanie stanu pożywki podczas hodowli komórkowej.
Najważniejsze cechy
- Klasyczna formuła MEM według Eagle'a z zbilansowanym roztworem soli Earle'a (EBSS)
- Zawiera 2 mM L-glutaminy – gotowe do natychmiastowego użycia
- 2,2 g/l wodorowęglanu sodu – buforowany do inkubacji przy 5% CO2
- Z D-glukozą (1,0 g/l) jako głównym źródłem węgla
- Z czerwienią fenolową jako wskaźnikiem pH
- Bez HEPES i bez pirogronianu sodu
- Płynna pożywka filtrowana sterylnie, gotowa do użycia
- pH 7,0–7,6
Typowe zastosowania
EMEM umożliwia hodowlę szerokiej gamy linii komórek ssaków, w tym HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 oraz wielu komórek pierwotnych. Typowe zastosowania obejmują:
- Rutynową hodowlę i ekspansję linii komórek adhezyjnych
- Procesy namnażania wirusów i produkcji szczepionek
- Zastosowania w badaniach cytotoksyczności i testach biologicznych
- Badania transfekcji i ekspresji białek
- Podstawowe badania w dziedzinie biologii komórkowej i biologii molekularnej
Aby zapewnić optymalny wzrost komórek, pożywkę EMEM zazwyczaj uzupełnia się 5–10% surowicą płodową bydlęcą (FBS) oraz, w zależności od linii komórkowej, nieesencjalnymi aminokwasami (NEAA) i antybiotykami, takimi jak penicylina/streptomycyna.
Postępowanie i przechowywanie
Nieotwartą butelkę należy przechowywać w temperaturze od +2 °C do +8 °C, w miejscu chronionym przed światłem. Po otwarciu należy stosować w warunkach aseptycznych. L-glutamina w roztworze ulega stopniowemu rozkładowi – w celu uzyskania najlepszych wyników zalecamy zużycie pożywki w ciągu 4 tygodni od otwarcia lub uzupełnienie jej świeżą L-glutaminą przed użyciem, jeśli była przechowywana przez dłuższy czas. Przed dodaniem do komórek należy poczekać, aż pożywka ogrzeje się do temperatury 37 °C.
Jakość
Wyprodukowany zgodnie z rygorystycznymi normami jakości. Każda partia jest badana pod kątem sterylności, pH, osmolalności i poziomu endotoksyn, aby zapewnić stałą wydajność w zastosowaniach związanych z hodowlą komórek.
Specyfikacja produktu
| Specyfikacja | Szczegóły |
|---|---|
| Rodzaj produktu | MEM |
| Kategoria produktu | Pożywki do hodowli komórkowej |
| Format | Płyn |
| Sterylne | Tak |
| Pojemność | 500 ml |
| L-glutamina | Z L-glutaminą (2 mM) |
| Glukoza | Z glukozą (1,0 g/l) |
| Wodorowęglan sodu | Z NaHCO3 (2,2 g/l) |
| HEPES | Bez HEPES |
| Pirowinian sodu | Bez pirogronianu sodu |
| Czerwień fenolowa | Z czerwienią fenolową |
| Roztwór soli | Zrównoważony roztwór soli Earle'a (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Zawartość endotoksyn | Nieokreślona |
| Przechowywanie | Od +2 °C do +8 °C |
Skład (skład na litr)
| Składnik | Stężenie (mg/l) |
|---|---|
| Sole nieorganiczne | |
| Chlorek wapnia · 2H2O | 265,00 |
| Siarczan magnezu | 97,72 |
| Chlorek potasu | 400,00 |
| Chlorek sodu | 6 800,00 |
| Dihydrofosforan sodu, bezwodny | 122,00 |
| Wodorowęglan sodu (NaHCO3) | 2 200,00 |
| Aminokwasy | |
| L-arginina · HCl | 126,00 |
| L-cystyna · 2HCl | 31,30 |
| L-glutamina | 292,00 |
| L-histydyna · HCl · H2O | 42,00 |
| L-izoleucyna | 52,00 |
| L-leucyna | 52,00 |
| L-lizyna · HCl | 72,50 |
| L-metionina | 15,00 |
| L-fenyloalanina | 32,00 |
| L-treonina | 48,00 |
| L-tryptofan | 10,00 |
| L-tyrozyna · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-walina | 46,00 |
| Witaminy | |
| D-pantotenian wapnia | 1,00 |
| Chlorek choliny | 1,00 |
| Kwas foliowy | 1,00 |
| mio-inozytol | 2,00 |
| Nikotynamid | 1,00 |
| Pirydoksal · HCl | 1,00 |
| Ryboflawina | 0,10 |
| Tiamina · HCl | 1,00 |
| Inne składniki | |
| D(+)-glukoza | 1 000,00 |
| Czerwień fenolowa | 10,00 |