DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham’s F12 to powszechnie uznana i szeroko stosowana pożywka bazowa w hodowli komórek do badań biologicznych. Stanowi ona podstawowe źródło składników odżywczych niezbędnych do wzrostu różnych linii komórkowych ssaków, zwłaszcza po uzupełnieniu surowicą płodową bydlęcą (FBS).
Ta unikalna formuła łączy zmodyfikowaną pożywkę Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) oraz Ham's F-12 (mieszankę odżywczą Ham's F-12) w precyzyjnym stosunku 1:1. Dodatek L-glutaminy dodatkowo wzbogaca jej skład.
DMEM, wywodząca się z minimalnej pożywki niezbędnej Eagle’a (EMEM), charakteryzuje się wyższym stężeniem aminokwasów i witamin w porównaniu ze swoją poprzedniczką. Natomiast pożywka Ham’s F-12 opiera się na pożywce Ham’s F-10, dostarczając uzupełniający zestaw niezbędnych składników.
Aby zapewnić optymalny wzrost komórek, powszechną praktyką jest uzupełnianie pożywki DMEM:Ham’s F-12 surowicą płodową bydlęcą (FBS) w typowym stężeniu 5–10%. Dodatek ten jest konieczny, ponieważ w pożywce brakuje hormonów wzrostu, lipidów i białek niezbędnych do rozwoju komórek.
DMEM:Ham’s F12 zawiera system buforowy pH i często jest uzupełniane fenolo-czerwienią, wskaźnikiem pH. Komórki hodowane w DMEM:Ham’s F12 lub w dowolnej pożywce wykorzystującej system buforowy wodorowęglanowy wymagają kontrolowanego stężenia CO₂ na poziomie 5–10%, aby utrzymać odpowiedni poziom pH.
Kontrola jakości
- Filtrowane sterylnie
Przechowywanie i okres przydatności
- Przechowywać w temperaturze od +2°C do +8°C, w miejscu chronionym przed światłem.
- Po otwarciu przechowywać w temperaturze 4°C i zużyć w ciągu 6–8 tygodni.
Warunki transportu
- Temperatura otoczenia
Konserwacja
- Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C, w ciemności. Należy unikać zamrażania i częstego podgrzewania do temperatury +37°C, ponieważ obniża to jakość produktu.
- Nie podgrzewać pożywki powyżej 37°C ani nie stosować niekontrolowanych źródeł ciepła, takich jak kuchenki mikrofalowe.
- Jeśli ma zostać wykorzystana tylko część pożywki, należy pobrać wymaganą ilość i przed użyciem ogrzać ją do temperatury pokojowej.
Skład
| Kategoria | Składniki | Stężenie (mg/l) |
| Aminokwasy | Glicyna | 18,75 |
| L-alanina | 4,45 | |
| L-arginina HCl | 147,50 | |
| L-asparagina H₂O | 7,50 | |
| Kwas L-asparaginowy | 6,65 | |
| L-cysteina HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystyna 2 HCl | 31,29 | |
| Kwas L-glutaminowy | 7,35 | |
| L-glutamina | 365,00 | |
| L-histydyna HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleucyna | 54,47 | |
| L-leucyna | 59,05 | |
| L-lizyna HCl | 91,25 | |
| L-metionina | 17,24 | |
| L-fenyloalanina | 35,48 | |
| L-prolina | 17,25 | |
| L-seryna | 26,25 | |
| L-treonina | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrozyna 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-walina | 52,85 | |
| Witaminy | D-biotyna | 0,0035 |
| Chlorek choliny | 8,98 | |
| D-pantotenian wapnia | 2,24 | |
| Kwas foliowy | 2,66 | |
| mio-inozytol | 12,60 | |
| Nikotynamid | 2,02 | |
| Chlorowodorek pirydoksyny | 0,031 | |
| Chlorowodorek pirydoksalu | 2,00 | |
| Ryboflawina | 0,219 | |
| Chlorowodorek tiaminy | 2,17 | |
| Witamina B12 | 0,68 | |
| Sole nieorganiczne | CaCl₂·2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄·7H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂·6H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2 H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄·7 H₂O | 0,432 | |
| Inne składniki | D-glukoza | 3151,00 |
| Hipoksantyna | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Kwas linolowy | 0,042 | |
| Kwas liponowy | 0,105 | |
| Sól sodowa czerwieni fenolowej | 8,63 | |
| Putrescyna 2 HCl | 0,081 | |
| Pirowinian sodu | 55,00 | |
| Tymidyna | 0,365 |