DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 to powszechnie uznana i szeroko stosowana pożywka bazowa w hodowli komórek do badań biologicznych. Stanowi ona podstawowe źródło składników odżywczych niezbędnych do wzrostu różnych linii komórek ssaków, zwłaszcza w połączeniu z surowicą płodową bydlęcą (FBS).
Ta unikalna formuła łączy w sobie pożywkę Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) oraz Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) w precyzyjnym stosunku 1:1. Dodatek L-glutaminy dodatkowo wzbogaca jej skład.
DMEM, wywodzące się z minimalnej pożywki niezbędnej Eagle'a (EMEM), oferuje zwiększone stężenie aminokwasów i witamin w porównaniu ze swoim poprzednikiem. Natomiast Ham's F-12 opiera się na pożywce Ham's F-10, zapewniając uzupełniający zestaw niezbędnych składników.
Aby wspierać optymalny wzrost komórek, powszechną praktyką jest uzupełnianie DMEM:Ham's F12 surowicą płodową (FBS) w typowym stężeniu 5–10%. Dodatek ten jest konieczny, ponieważ pożywce brakuje hormonów wzrostu, lipidów i białek niezbędnych do rozwoju komórek.
DMEM:Ham's F12 zawiera system buforujący pH i często jest uzupełniane fenolo-czerwienią, wskaźnikiem pH. Komórki hodowane w DMEM:Ham's F12 lub w dowolnej pożywce wykorzystującej system buforowy wodorowęglanowy wymagają kontrolowanego środowiska CO2 na poziomie 5–10%, aby utrzymać odpowiedni poziom pH.
Kontrola jakości
- Filtrowane sterylnie
Przechowywanie i okres przydatności
- Przechowywać w temperaturze od +2°C do +8°C, chroniąc przed światłem.
- Po otwarciu przechowywać w temperaturze 4°C i zużyć w ciągu 6–8 tygodni.
Warunki transportu
- Temperatura otoczenia
Przechowywanie
- Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C w ciemności. Unikać zamrażania i częstego ogrzewania do +37°C, ponieważ obniża to jakość produktu.
- Nie podgrzewać pożywki powyżej 37°C ani nie używać niekontrolowanych źródeł ciepła, takich jak kuchenki mikrofalowe.
- Jeśli ma zostać wykorzystana tylko część pożywki, należy pobrać wymaganą ilość i ogrzać ją do temperatury pokojowej przed użyciem.
Skład
| Kategoria | Składniki | Stężenie (mg/l) |
| Kwasy aminowe | Glicyna | 18,75 |
| L-alanina | 4,45 | |
| L-arginina HCl | 147,50 | |
| L-asparagina H₂O | 7,50 | |
| Kwas L-asparaginowy | 6,65 | |
| L-cysteina HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystyna 2 HCl | 31,29 | |
| Kwas L-glutaminowy | 7,35 | |
| L-glutamina | 365,00 | |
| L-histydyna HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleucyna | 54,47 | |
| L-leucyna | 59,05 | |
| L-lizyna HCl | 91,25 | |
| L-metionina | 17,24 | |
| L-fenyloalanina | 35,48 | |
| L-prolina | 17,25 | |
| L-seryna | 26,25 | |
| L-treonina | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrozyna 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-walina | 52,85 | |
| Witaminy | D-biotyna | 0,0035 |
| Chlorek choliny | 8,98 | |
| D-pantotenian wapnia | 2,24 | |
| Kwas foliowy | 2,66 | |
| mio-inozytol | 12,60 | |
| Nikotynamid | 2,02 | |
| Chlorowodorek pirydoksyny | 0,031 | |
| Chlorowodorek pirydoksalu | 2,00 | |
| Ryboflawina | 0,219 | |
| Chlorowodorek tiaminy | 2,17 | |
| Witamina B12 | 0,68 | |
| Sole nieorganiczne | CaCl2·2H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Inne składniki | D-glukoza | 3151,00 |
| Hipotoksantyna | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Kwas linolowy | 0,042 | |
| Kwas liponowy | 0,105 | |
| Sól sodowa czerwieni fenolowej | 8,63 | |
| Putrescyna 2 HCl | 0,081 | |
| Pirowinian sodu | 55,00 | |
| Tymidyna | 0,365 |