PIEC ląstelės
Bendra informacija
| Aprašymas | PIEC (kiaulių klubo endotelio ląstelės) yra spontaniškai nemirtingos endotelio ląstelių linija, gauta iš jaunos kiaulės klubo arterijos endotelio. Ląstelių linija, augdama iki konfluencijos, pasižymi tipine akmenimis grįsto paviršiaus morfologija ir standartinėmis kultivavimo sąlygomis sudaro adhezyvinius monosluoksnius. PIEC išlaiko pagrindines endotelio savybes, įskaitant kontaktinį slopinimą, endotelio žymenų, pvz., von Willebrand faktoriaus (vWF), ekspresiją ir gebėjimą formuoti kapiliarinės struktūros atitinkamuose in vitro tyrimuose. Dėl savo kraujagyslinės kilmės PIEC plačiai naudojamos kaip modelis kiaulių endotelio biologijos ir šeimininko-patogeno sąveikos tyrimams. Funkciniu požiūriu PIEC pasižymi savybėmis, būdingomis makrovaskuliniams endotelio ląstelėms, įskaitant jautrumą uždegiminiams dirgikliams ir gebėjimą ekspresuoti adhezijos molekules, dalyvaujančias leukocitų rekrutacijoje. Jos plačiai naudojamos virusologijos tyrimuose, ypač kiaulių virusų, tokių kaip klasikinio kiaulių maro virusas (CSFV), afrikinio kiaulių maro virusas (ASFV) ir kiaulių reprodukcinio ir respiratorinio sindromo virusas (PRRSV), dauginimui ir tyrimams. Dėl didelio atsparumo tam tikroms virusinėms infekcijoms ir stabilių augimo savybių jos yra vertinga in vitro sistema virusų replikacijos tyrimams, antivirusinių preparatų atrankai ir vakcinų tyrimams. Be infekcinių ligų tyrimų, PIEC yra tinkamas didelių gyvūnų endotelio modelis kraujagyslių barjero funkcijos, endotelio aktyvacijos, angiogenezės ir uždegiminių signalų perdavimo kelių tyrimams. Kaip kiaulių endotelio linija, PIEC yra tinkami lyginamiesiems širdies ir kraujagyslių tyrimams bei ikiklinikiniams tyrimams, kuriuose dažnai naudojami kiaulių modeliai. |
|---|---|
| Organizmas | Kiaulė |
| Audiniai | Kraujagyslių endotelis |
Charakteristikos
| Morfologija | Epitelis |
|---|---|
| Augimo savybės | Prigludęs |
Reguliavimo duomenys
| Citavimas | PIEC (Cytion katalogo numeris 305213) |
|---|---|
| Biologinės saugos lygis | 1 |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| CellosaurusAccession | CVCL_C0W5 |
Biomolekuliniai duomenys
Tvarkymas
| Kultūros terpė | RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a) |
|---|---|
| Maisto papildai | Papildykite terpę šiluma inaktyvuotu 10 % FBS |
| Disociacijos reagentas | Accutase |
| Subkultūrinimas | Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė. |
| Padalijimo santykis | nuo 1:2 iki 1:4 |
| Skysčių atnaujinimas | 2-3 kartus per savaitę |
| Užšaldyti terpę | Kaip kriokonservavimo terpę naudokite visavertę augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas. |
| Ląstelių atšildymas ir kultivavimas |
|
| Inkubacijos atmosfera | 37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje. |
| Flakono danga | Kad po atšildymo būtų užtikrintas optimalus prisitvirtinimas ir gyvybingumas, rekomenduojame naudoti kolagenu dengtas kolbas arba plokšteles. |
| Užšaldymo procedūra | Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą. |
| Pristatymo sąlygos | Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą. |
| Laikymo sąlygos | Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą. |
Kokybės kontrolė / Genetinis profilis / HLA
| Sterilumas | Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus. Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos. |
|---|
Analizės sertifikatas (CoA)
| Partijos numeris | Sertifikato tipas | Data | Katalogo numeris |
|---|---|---|---|
| 305213-070524 | Analizės sertifikatas | 23. May. 2025 | 305213 |
Medžiagų perdavimo sutartis
Jei ketinate naudoti Cytion ląstelių linijas tik vidiniams tyrimams vienoje tyrimų vietoje, užpildykite ir pasirašykite mūsų medžiagų perdavimo sutartį (MTA) ir pateikite ją kartu su užsakymu.
Bet kokiam komerciniam naudojimui, įskaitant, bet neapsiribojant, mokamais paslaugų darbais, kokybės kontrolės bandymais, produktų išleidimu, diagnostiniu naudojimu ar reguliavimo tyrimais, užpildykite numatomo naudojimo formą, kad galėtume parengti jūsų projektui pritaikytą sutartį.
Atkreipkite dėmesį: MTA taikoma tik tam tikroms ląstelių linijoms. Jei šis pranešimas ir MTA dokumentas yra pateikti produkto puslapyje, sutartis yra taikoma. Ląstelių linijoms, kurioms MTA netaikoma, nuoroda į sutartį nebus rodoma. MTA negalioja klientams Amerikoje, Kinijoje ar Taivane. Norėdami gauti atitinkamą sutartį, susisiekite su mūsų JAV padaliniu.