NCI-N87-Luc ląstelės

RPMI 1640 terpė, dar žinoma kaip RPMI terpė, yra labai universali ląstelių kultūrų terpė, plačiai naudojama biologiniuose tyrimuose įvairioms žinduolių ląstelėms auginti. Šios terpės pavadinimą 1966 m. sukūrė George'as E. Moore'as, Robertas E. Gerneris ir H. Addisonas Franklinas garsiajame Roswell Park Comprehensive Cancer Center, o jos pavadinimas kilo iš Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Iš pradžių sukurta žmogaus leukeminėms ląstelėms auginti suspensinėse ir viensluoksnėse kultūrose, RPMI 1640 terpė, mokslininkams ir komerciniams tiekėjams ją modifikavus, tapo tinkama įvairioms žinduolių ląstelėms. Ji itin suderinama su tokiomis ląstelių linijomis kaip HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocitais ir karcinomomis.
RPMI 1640 terpė išsiskiria iš kitų ląstelių kultūrų terpių dėl savo unikalios sudėties. Joje yra daug fosfatų, aminorūgščių ir vitaminų. Ypač daug biotino, vitamino B12 ir PABA, kurių nėra Eagle's Minimal Essential Medium arba Dulbecco's Modified Eagle Medium. Be to, RPMI 1640 terpėje yra gerokai didesnė vitaminų inozitolio ir cholino koncentracija. Tačiau joje nėra baltymų, lipidų ir augimo veiksnių. Todėl norint sudaryti optimalias sąlygas ląstelėms augti, paprastai reikia papildyti 10 % galvijų vaisiaus serumo (FBS).
RPMI 1640 terpės buferinė sistema priklauso nuo natrio bikarbonato, o fiziologiškai tinkamam pH palaikyti būtina 5-10 % CO2 aplinka. Šią terpę iš kitų terpių dar labiau išskiria tai, kad joje yra redukuojamosios medžiagos glutationo.
Kokybės kontrolė

Steriliai filtruota


Laikymas ir galiojimo laikas

Laikyti nuo +2 °C iki +8 °C temperatūroje, saugoti nuo šviesos.
Atidarytą laikykite 4 °C temperatūroje ir sunaudokite per 6-8 savaites.


Gabenimo sąlygos

Aplinkos temperatūra


Priežiūra

Laikyti šaldytuve nuo +2°C iki +8°C temperatūroje, tamsioje vietoje. Venkite užšaldymo ir dažno pašildymo iki +37°C, nes tai pablogina produkto kokybę.
Nešildykite terpės aukštesnėje nei 37°C temperatūroje ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių, pavyzdžiui, mikrobangų krosnelių.
Jei reikia naudoti tik dalį terpės, prieš naudojimą paimkite reikiamą kiekį ir pašildykite iki kambario temperatūros.



Sudėtis




Kategorija
Sudedamosios dalys
Koncentracija (mg/l)


Aminorūgštys
Glicinas
10.00



L-alanil-L-gliutaminas
434.40



L-argininas
200.00



L-asparaginasH2O
56.82



L-asparagino rūgštis
20.00



L-cistinas 2HCl
65.20



L-gliutamo rūgštis
20.00



L-histidinas HClH2O
20.27



L-Hidroksi-L-Prolinas
20.00



L-izoleucinas
50.00



L-leucinas
50.00



L-lizinas HCl
40.00



L-metioninas
15.00



L-fenilalaninas
15.00



L-prolinas
20.00



L-serinas
30.00



L-treoninas
20.00



L-triptofanas
5.00



L-tirozinas 2Na 2H2O
28.83



L-Valinas
20.00


Vitaminai
p-amino benzenkarboksirūgštis
1.00



D-biotinas
0.20



Cholino chloridas
3.00



D-kalcio pantotenatas
0.25



Folio rūgštis
1.00



mio-izitolis
35.00



Nikotinamidas
1.00



Piridoksino HCl
1.00



Riboflavinas
0.20



Tiamino HCl
1.00



Vitaminas B12
0.005


Neorganinės druskos
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Kiti komponentai
D-gliukozė
2000.00



L-Glutationas redukuotas
1.00



Fenolio raudonojo natrio druska
5.30

„Accutase“ ląstelių atskyrimo tirpalas su EDTA ir fenolio raudonuoju – 100 ml

„Accutase“ yra paruoštas naudoti, steriliai filtruotas ląstelių atskyrimo tirpalas, sukurtas kaip švelni alternatyva tripsinui/EDTA, skirtas adhezyvinių žinduolių ląstelių atskyrimui nuo standartinių audinių kultūros plastikinių indų ir adhezyviniu sluoksniu padengtų paviršių. Jis derina proteolitinį ir kolagenolitinį fermentų aktyvumą subalansuotame druskos tirpale, kad užtikrintų veiksmingą, tačiau kontroliuojamą atskyrimą, išsaugant ląstelių paviršiaus baltymus ir palaikant aukštą gyvybingumą po perėjimo bei greitą pakartotinį prisijungimą.

„Accutase“ sudėtis pagrįsta Dulbecco fosfato buferiniu tirpalu (DPBS) su EDTA ir fenolio raudonuoju kaip vizualiu pH indikatoriumi. Fermentai yra ne žinduolių ir ne bakterijų kilmės, todėl „Accutase“ ypač tinka kamieninių ląstelių tyrimams, vakcinų gamybos procesams ir bet kokiam naudojimui, kur reikia kuo labiau sumažinti gyvūninės ar mikrobiologinės kilmės teršalus. Tirpalas savaime slopina veiklą 37 °C temperatūroje, todėl po atskyrimo nereikia neutralizuojančio reagento ar serumo turinčios terpės – ląstelės gali būti perkeltos tiesiai į šviežią terpę.

Pagrindinės savybės

Paruoštas naudoti 1x steriliai filtruotas skystis – nereikia skiesti ar atskiesti
Kombinuotas proteolitinis ir kolagenolitinis fermentų aktyvumas švelniam atskyrimui
Kiekviena partija standartizuota pagal nustatytą atskyrimo aktyvumą, siekiant užtikrinti partijų nuoseklumą
Nežinduolių ir nebakterinės kilmės fermentai
Savaiminis slopinimas 37 °C temperatūroje – nereikia neutralizuojančio tirpalo
Sudėtyje yra Dulbecco PBS su EDTA
Fenolio raudonasis įtrauktas kaip vizualus pH indikatorius
pH 6,8–7,8


Tipiniai taikymo atvejai
„Accutase“ švelniai atskiria įvairius adhezyvinius ir jautrius ląstelių tipus, įskaitant žmogaus embrionines kamienines ląsteles (hESCs), žmogaus indukuotas pluripotentines kamienines ląsteles (iPSCs), nervines kamienines ląsteles, pirminius neuronus ir įprastai kultivuojamas adhezyvines ląstelių linijas, tokias kaip HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ir A549. Tipiniai naudojimo atvejai:

Įprastinis prisitvirtinusių žinduolių ląstelių subkultūravimas ir perėjimas
Švelnus hESCs, iPSCs ir kitų jautrių linijų vienos ląstelės atskyrimas
Mėginių paruošimas srauto citometrijai ir FACS analizei
Ląstelių paviršiaus žymenų analizė, kai svarbus epitopo vientisumas
Ląstelių migracijos, proliferacijos ir apoptozės tyrimai
Ramybės tyrimai, atliekant serumo badą ir onkogenų transfekcijos tyrimus
Naviko ląstelių ir nervų kamieno ląstelių migracijos tyrimai
Gamybos masto didinimas bioreaktorių darbo srautais

Atliekant įprastinius darbus, užpilkite maždaug 10 ml „Accutase“ ant 75 cm2 kultūros paviršiaus ir inkubuokite 5–10 minučių kambario temperatūroje. Optimalus inkubacijos laikas turėtų būti nustatomas kiekvienai ląstelių linijai atskirai ir neturėtų viršyti vienos valandos. Prieš pridedant, nuplaukite ląstelių sluoksnį druskos tirpalu be Ca2+/Mg2+, pvz., DPBS be kalcio ir magnio, kad pašalintumėte serumo likučius ir dvivalenčius katijonus.

Naudojimas ir laikymas
Neatidarytą buteliuką laikykite užšaldytą -15 °C ar žemesnėje temperatūroje. Atšildykite kambario temperatūroje arba per naktį +2 °C – +8 °C temperatūroje. Neatšildykite „Accutase“ 37 °C vandens vonioje, nes aukšta temperatūra sumažina fermentų aktyvumą. Atšildžius tirpalą galima laikyti iki 2 mėnesių +2 °C – +8 °C temperatūroje; nelaikykite kambario temperatūroje. Prieš naudojimą nereikia iš anksto pašildyti reagento iki 37 °C – jį reikia tiesiogiai įpilti į nuplautas ląsteles kambario temperatūroje. Siekiant užtikrinti ilgą galiojimo laiką, rekomenduojama naudoti vienkartines alikvotas, kad būtų išvengta pakartotinių atšildymo ciklų. Visada dirbkite aseptinėmis sąlygomis.

Kokybė
Pagaminta laikantis griežtų kokybės standartų. Kiekviena „Accutase“ partija yra steriliškai filtruojama ir tikrinama dėl sterilumo, pH, išvaizdos ir disociacijos aktyvumo, siekiant užtikrinti nuoseklų, atkartojamą veikimą iš partijos į partiją.

Produkto specifikacijos



Specifikacija
Išsami



Produkto tipasLąstelių atskyrimo / disociacijos reagentas
FormatasSteriliai filtruotas skystis, paruoštas naudoti
Tūris100 ml
Darbinė koncentracija1x (paruoštas naudoti)
Fermentų aktyvumasKombinuotas proteolitinis ir kolagenolitinis
Fermentų kilmėNe iš žinduolių ir ne iš bakterijų
Buferinė sistemaDulbecco PBS su EDTA
pH indikatoriusFenolio raudonasis
pH diapazonas6,8 – 7,8
IšvaizdaSkaidrus, nuo šviesiai raudonos iki oranžinės spalvos tirpalas
Laikymo temperatūra-15 °C arba žemesnė
Stabilumas po atšildymoIki 2 mėnesių +2 °C iki +8 °C temperatūroje
Rekomenduojamas naudojimo tūris~10 ml 75 cm2 kultūros paviršiaus
Tipinis inkubacijos laikas5–10 minučių kambario temperatūroje
Pristatymo sąlygosUžšaldyta sausuoju ledu
PaskirtisTik moksliniams tyrimams ir tolesnei gamybai



Sudėtis (sudėtis viename litre)



Komponentas
Koncentracija (mg/l)




Neorganinės druskos

Natrio chloridas (NaCl)8000,00
Dinatrio hidrogenfosfatas (Na2HPO4)1150,00
Kalio chloridas (KCl)200,00
Kalio dihidrogeno fosfatas (KH2PO4)200,00

Kiti komponentai

EDTA · 4Na (tetranatrio EDTA)220,00
Fenolio raudonasis3,00
Patentuotas fermentų mišinys (proteolitinis ir kolagenolitinis aktyvumas)1x



„Accutase“ yra „Innovative Cell Technologies, Inc.“ registruotas prekės ženklas.

„Accutase“ ląstelių atskyrimo tirpalas su EDTA ir fenolio raudonuoju – 100 ml

„Accutase“ yra paruoštas naudoti, steriliai filtruotas ląstelių atskyrimo tirpalas, sukurtas kaip švelni alternatyva tripsinui/EDTA, skirtas adhezyvinių žinduolių ląstelių atskyrimui nuo standartinių audinių kultūros plastikinių indų ir adhezyviniu sluoksniu padengtų paviršių. Jis derina proteolitinį ir kolagenolitinį fermentų aktyvumą subalansuotame druskos tirpale, kad užtikrintų veiksmingą, tačiau kontroliuojamą atskyrimą, išsaugant ląstelių paviršiaus baltymus ir palaikant aukštą gyvybingumą po perėjimo bei greitą pakartotinį prisijungimą.

„Accutase“ sudėtis pagrįsta Dulbecco fosfato buferiniu tirpalu (DPBS) su EDTA ir fenolio raudonuoju kaip vizualiu pH indikatoriumi. Fermentai yra ne žinduolių ir ne bakterijų kilmės, todėl „Accutase“ ypač tinka kamieninių ląstelių tyrimams, vakcinų gamybos procesams ir bet kokiam naudojimui, kur reikia kuo labiau sumažinti gyvūninės ar mikrobiologinės kilmės teršalus. Tirpalas savaime slopina veiklą 37 °C temperatūroje, todėl po atskyrimo nereikia neutralizuojančio reagento ar serumo turinčios terpės – ląstelės gali būti perkeltos tiesiai į šviežią terpę.

Pagrindinės savybės

Paruoštas naudoti 1x steriliai filtruotas skystis – nereikia skiesti ar atskiesti
Kombinuotas proteolitinis ir kolagenolitinis fermentų aktyvumas švelniam atskyrimui
Kiekviena partija standartizuota pagal nustatytą atskyrimo aktyvumą, siekiant užtikrinti partijų nuoseklumą
Nežinduolių ir nebakterinės kilmės fermentai
Savaiminis slopinimas 37 °C temperatūroje – nereikia neutralizuojančio tirpalo
Sudėtyje yra Dulbecco PBS su EDTA
Fenolio raudonasis įtrauktas kaip vizualus pH indikatorius
pH 6,8–7,8


Tipiniai taikymo atvejai
„Accutase“ švelniai atskiria įvairius adhezyvinius ir jautrius ląstelių tipus, įskaitant žmogaus embrionines kamienines ląsteles (hESCs), žmogaus indukuotas pluripotentines kamienines ląsteles (iPSCs), nervines kamienines ląsteles, pirminius neuronus ir įprastai kultivuojamas adhezyvines ląstelių linijas, tokias kaip HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ir A549. Tipiniai naudojimo atvejai:

Įprastinis prisitvirtinusių žinduolių ląstelių subkultūravimas ir perėjimas
Švelnus hESCs, iPSCs ir kitų jautrių linijų vienos ląstelės atskyrimas
Mėginių paruošimas srauto citometrijai ir FACS analizei
Ląstelių paviršiaus žymenų analizė, kai svarbus epitopo vientisumas
Ląstelių migracijos, proliferacijos ir apoptozės tyrimai
Ramybės tyrimai, atliekant serumo badą ir onkogenų transfekcijos tyrimus
Naviko ląstelių ir nervų kamieno ląstelių migracijos tyrimai
Gamybos masto didinimas bioreaktorių darbo srautais

Atliekant įprastinius darbus, užpilkite maždaug 10 ml „Accutase“ ant 75 cm2 kultūros paviršiaus ir inkubuokite 5–10 minučių kambario temperatūroje. Optimalus inkubacijos laikas turėtų būti nustatomas kiekvienai ląstelių linijai atskirai ir neturėtų viršyti vienos valandos. Prieš pridedant, nuplaukite ląstelių sluoksnį druskos tirpalu be Ca2+/Mg2+, pvz., DPBS be kalcio ir magnio, kad pašalintumėte serumo likučius ir dvivalenčius katijonus.

Naudojimas ir laikymas
Neatidarytą buteliuką laikykite užšaldytą -15 °C ar žemesnėje temperatūroje. Atšildykite kambario temperatūroje arba per naktį +2 °C – +8 °C temperatūroje. Neatšildykite „Accutase“ 37 °C vandens vonioje, nes aukšta temperatūra sumažina fermentų aktyvumą. Atšildžius tirpalą galima laikyti iki 2 mėnesių +2 °C – +8 °C temperatūroje; nelaikykite kambario temperatūroje. Prieš naudojimą nereikia iš anksto pašildyti reagento iki 37 °C – jį reikia tiesiogiai įpilti į nuplautas ląsteles kambario temperatūroje. Siekiant užtikrinti ilgą galiojimo laiką, rekomenduojama naudoti vienkartines alikvotas, kad būtų išvengta pakartotinių atšildymo ciklų. Visada dirbkite aseptinėmis sąlygomis.

Kokybė
Pagaminta laikantis griežtų kokybės standartų. Kiekviena „Accutase“ partija yra steriliškai filtruojama ir tikrinama dėl sterilumo, pH, išvaizdos ir disociacijos aktyvumo, siekiant užtikrinti nuoseklų, atkartojamą veikimą iš partijos į partiją.

Produkto specifikacijos



Specifikacija
Išsami



Produkto tipasLąstelių atskyrimo / disociacijos reagentas
FormatasSteriliai filtruotas skystis, paruoštas naudoti
Tūris100 ml
Darbinė koncentracija1x (paruoštas naudoti)
Fermentų aktyvumasKombinuotas proteolitinis ir kolagenolitinis
Fermentų kilmėNe iš žinduolių ir ne iš bakterijų
Buferinė sistemaDulbecco PBS su EDTA
pH indikatoriusFenolio raudonasis
pH diapazonas6,8 – 7,8
IšvaizdaSkaidrus, nuo šviesiai raudonos iki oranžinės spalvos tirpalas
Laikymo temperatūra-15 °C arba žemesnė
Stabilumas po atšildymoIki 2 mėnesių +2 °C iki +8 °C temperatūroje
Rekomenduojamas naudojimo tūris~10 ml 75 cm2 kultūros paviršiaus
Tipinis inkubacijos laikas5–10 minučių kambario temperatūroje
Pristatymo sąlygosUžšaldyta sausuoju ledu
PaskirtisTik moksliniams tyrimams ir tolesnei gamybai



Sudėtis (sudėtis viename litre)



Komponentas
Koncentracija (mg/l)




Neorganinės druskos

Natrio chloridas (NaCl)8000,00
Dinatrio hidrogenfosfatas (Na2HPO4)1150,00
Kalio chloridas (KCl)200,00
Kalio dihidrogeno fosfatas (KH2PO4)200,00

Kiti komponentai

EDTA · 4Na (tetranatrio EDTA)220,00
Fenolio raudonasis3,00
Patentuotas fermentų mišinys (proteolitinis ir kolagenolitinis aktyvumas)1x



„Accutase“ yra „Innovative Cell Technologies, Inc.“ registruotas prekės ženklas.

Fosfatu buferizuotas fiziologinis tirpalas (PBS)
Fosfatu buferizuotas fiziologinis tirpalas (PBS) yra plačiai naudojamas buferinis tirpalas biologiniuose ir cheminiuose tyrimuose. Jis atlieka svarbų vaidmenį palaikant pH pusiausvyrą ir osmoliariškumą atliekant įvairias eksperimentines procedūras, įskaitant audinių apdorojimą ir ląstelių auginimą. Mūsų PBS tirpalas yra kruopščiai sukurtas iš didelio grynumo ingredientų, kad būtų užtikrintas kiekvieno eksperimento stabilumas ir patikimumas. Mūsų PBS tirpalo osmoliariškumas ir jonų koncentracija tiksliai atitinka žmogaus organizmo osmoliariškumą ir jonų koncentraciją, todėl jis yra izotoninis ir netoksiškas daugumai ląstelių.

Mūsų PBS tirpalo sudėtis
Mūsų PBS tirpalas yra pH sureguliuotas itin grynų fosfatinių buferių ir fiziologinių tirpalų mišinys. 1X darbinės koncentracijos tirpale yra:

8000 mg/l natrio chlorido (NaCl)
200 mg/l kalio chlorido (KCl)
1150 mg/l natrio fosfato dibazinio bevandenio (Na2HPO4)
200 mg/L Kalio fosfatas vienbazis bevandenis (KH2PO4)

Ši sudėtis užtikrina optimalią pH ir jonų pusiausvyrą, tinkančią įvairioms biologinėms reikmėms.

Mūsų PBS tirpalo taikymas
Mūsų PBS tirpalas idealiai tinka įvairioms biologinių tyrimų reikmėms. Dėl izotoninių ir netoksiškų savybių jis tinka medžiagoms skiesti ir ląstelių talpykloms skalauti. PBS tirpalai, kurių sudėtyje yra EDTA, efektyviai išlaisvina prisitvirtinusias ir susitelkusias ląsteles. Tačiau į PBS negalima dėti dvivalenčių metalų, pavyzdžiui, cinko, nes tai gali sukelti nuosėdų susidarymą. Tokiais atvejais rekomenduojama naudoti Good's buferius. Be to, mūsų PBS tirpalas yra priimtina alternatyva virusų transportavimo terpei RNR virusams, įskaitant SARS-CoV-2, transportuoti ir laikyti.

Kokybės kontrolė

Steriliai filtruotas


Laikymas ir galiojimo laikas

Laikyti nuo +2 °C iki +25 °C temperatūroje, saugoti nuo šviesos.
Atidarytą laikykite nuo 2 °C iki 25 °C temperatūroje ir sunaudokite per 24 mėnesius.


Gabenimo sąlygos

Aplinkos temperatūra


Priežiūra

Laikyti šaldytuve nuo +2°C iki +8°C temperatūroje, tamsioje vietoje. Venkite užšaldymo ir dažno pašildymo iki +37°C, nes tai pablogina produkto kokybę.
Nešildykite terpės aukštesnėje nei 37°C temperatūroje ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių, pavyzdžiui, mikrobangų krosnelių.
Jei reikia naudoti tik dalį terpės, prieš naudojimą paimkite reikiamą kiekį ir pašildykite iki kambario temperatūros.

Sudėtis



Kategorija
Sudedamosios dalys
Koncentracija (mg/l)


Druskos
Kalio chloridas
200



Kalio fosfatas monobazinis bevandenis
200



Natrio chloridas
8000



Natrio fosfatas dvibazis bevandenis
1150

Produkto apžvalga
Tūris: 100 ml Laikymas: ≤-15°C Sterilumas: Sterilus filtras
Antibiotikų ir antimikotinių medžiagų tirpalas (100x ) yra sterilus, paruoštas naudoti koncentratas, skirtas sumažinti mikrobinio užteršimo riziką ląstelių kultūrose ir susijusiose laboratorijose. Šiame 100x tirpale yra gerai žinomas penicilino, streptomicino ir amfotericino B derinys, užtikrinantis plataus spektro antimikrobinį veikimą prieš gramteigiamas ir gramneigiamas bakterijas, mieles ir gijinius grybelius. Preparatas tinka naudoti eukariotinių ląstelių kultūrose, bakterijų terpėse ir kitose užterštumui jautriose sistemose, taip užtikrinant švarią ir nuoseklią laboratorinę veiklą.
Taikymas ir privalumai Šis tirpalas, optimizuotas įprastiniams mokslinių tyrimų protokolams, plačiai naudojamas aseptinėms sąlygoms palaikyti ląstelių kultūrų darbo procesuose. Jis užtikrina patikimą veikimą užterštumui jautriose aplinkose, padėdamas tyrėjams sumažinti mikrobų peraugimo riziką, nepakenkiant ląstelių sveikatai ar eksperimentų atkuriamumui. Dėl steriliai filtruotos sudėties nereikia atlikti papildomų tirpinimo etapų, todėl galima supaprastinti terpės paruošimą ir sumažinti kasdienių laboratorinių procedūrų kintamumą.
Naudojimas ir suderinamumas Norint pasiekti standartinę darbinę koncentraciją, praskieskite tirpalą santykiu 1:100 į visą kultūros terpę. Produktas suderinamas su daugeliu žinduolių ląstelių linijų ir bazinių terpių. Nuolat turėdami atsargų, mokslininkai gali naudotis patikimu tiekimo tęstinumu ir supaprastintu logistikos planavimu. Tirpalas turi būti laikomas ≤ -15 °C temperatūroje ir saugomas nuo pakartotinių užšaldymo-atšildymo ciklų, kad išliktų stabilus. Skirtas tik moksliniams tyrimams. Negalima naudoti diagnostinėms ar terapinėms procedūroms. Negalima naudoti žmonėms ar gyvūnams.