HT55 ląstelės

430,00 €*

Produktai yra siunčiami užšaldyti sausojo ledo kriotubose. Kiekvienoje kriotuboje paprastai yra 3 × 10 ⁶ ląstelių adhezyvinių linijų atveju arba 5 × 10⁶ ląstelių suspensijos linijų atveju (išsami informacija pateikta partijos CoA).

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305018

Saugos duomenų lapas

Produkto lapas

Medžiagų perdavimo sutartis

Aprašymas	HT55 – tai žmogaus tiesiosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, išskirta iš 54 metų amžiaus kaukazietės pirminio tiesiosios žarnos naviko. Ši linija auga kaip prisitvirtinęs monosluoksnis, pasižymintis epitelio tipo morfologija, ir yra užregistruota „Cellosaurus“ duomenų bazėje kaip CVCL_1294. HT55 turi daug heterozigotinių ir homozigotinių funkcijos praradimo mutacijų APC (adenomatozinės polipozės) naviko slopinančiame gene, įskaitant p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr ir p.Lys241Ter (visos heterozigotinės), taip pat homozigotinę p.Arg213Leu substituciją. Šis mutacijų profilis daro HT55 biologiniu požiūriu aktualiu APC reguliuojamos kolorektalinės karcinogenezės modeliu, atspindinčiu kanoninio WNT signalo kelio disreguliaciją, kuri lemia daugumą žmogaus kolorektalinių vėžių. HT55 plačiai naudojama kolorektalinio vėžio tyrimuose, skirtuose WNT/β-katenino signalizacijos, APC naviko slopintojo funkcijos, jautrumo vaistams ir atsparumo jiems tyrimams, taip pat tikslinio poveikio preparatų, nukreiptų prieš WNT signalo kelio komponentus, ikiklinikiniam vertinimui. Ši linija tinka in vitro farmakologiniams tyrimams ir ksenotransplantatų tyrimams imunokompromituotuose pelių modeliuose, suteikdama adhezyvią, lengvai valdomą in vitro platformą mechanistiniams ir translaciniams kolorektalinio vėžio tyrimams. Dėl daugybės APC trunkačių mutacijų HT55 yra tipiškas mikrosatelitų atžvilgiu stabilaus, bet chromosomų atžvilgiu nestabilaus storosios žarnos vėžio potipio, kurį dažniausiai lemia APC funkcijos praradimas, pavyzdys. HT55 linija auginama EMEM terpėje (MEM Eagle, 2 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO₃, EBSS; „Cytion“ prekės numeris 820100a), papildytame 10 % FBS, 37 °C temperatūroje drėgnoje aplinkoje su 5 % CO₂. Ląstelės perauginamos naudojant „Accutase“, kai jos užpildo maždaug 80–90 % paviršiaus, rekomenduojamas padalijimo santykis yra 1:3–1:5, o pasėjimo tankis – 1–3 × 10⁴ ląstelių/cm². Terpė keičiama kas 2–3 dienas. Ląstelių skaičiaus padvigubėjimo laikas yra maždaug 28 valandos.
Organizmas	Žmogus
Audiniai	Tiesioji žarna
Liga	Adenokarcinoma
Paraiškos	Kolorektalinio vėžio tyrimai; WNT/APC signalo kelio tyrimai; vaistų jautrumo ir atsparumo tyrimai; ikiklinikinė onkologija; ksenotransplantacijos modeliai; tikslinės terapijos vertinimas
Sinonimai	HT55

Amžius	54 metai
Lytis	Moteris
Etniškumas	Kaukaziečių
Morfologija	Į epitelį panašus
Ląstelės tipas	Epitelio ląstelės
Augimo savybės	Prigludęs

Citavimas	HT55 (Cytion katalogo numeris 305018)
Biologinės saugos lygis	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1294

Mutacijų profilis	Mutacija: p.Gln1131Ter, heterozigotinė; Mutacija: p.Gln1303Ter, heterozigotinė; Mutacija: p.Arg1463Ser, heterozigotinė; Mutacija: p.Asn581Tyr, heterozigotinė; Mutacija: p.Lys241Ter, heterozigotinė; Mutacija: p.Arg213Leu, homozigotė

Kultūros terpė	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Maisto papildai	Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas	Accutase
Padvigubėjimo laikas	28 valandos
Subkultūrinimas	Pašalinkite seną terpę nuo prisitvirtinusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS tirpalu be kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3–5 ml PBS, o T75 kolboms – 5–10 ml. Tada ląsteles visiškai užpilkite „Accutase“ tirpalu – T25 kolboms naudokite 1–2 ml, o T75 kolboms – 2,5 ml. Palikite ląsteles inkubuoti kambario temperatūroje 8–10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos ląsteles švelniai sumaišykite su 10 ml terpės, kad jos vėl susidarytų suspensiją, tada centrifuguokite 300×g greičiu 3 minutes. Supernatantą išpilkite, ląsteles vėl suspenduokite šviežioje terpėje ir perkelkite į naujus kolbelius, kuriuose jau yra šviežia terpė.
Padalijimo santykis	1–5
Sėjos tankis	1–3 x 10⁴ lą^stelės/cm²
Skysčių atnaujinimas	Kas 2-3 dienas
Užšaldyti terpę	Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Ląstelių atšildymas ir kultivavimas	Patikrinkite, ar pristatant buteliuką jis išlieka gerai užšaldytas, nes ląstelės gabenamos ant sauso ledo, kad gabenimo metu būtų palaikoma optimali temperatūra. Gavę iš karto laikykite kriovialą žemesnėje nei -150 °C temperatūroje, kad užtikrintumėte ląstelių vientisumo išsaugojimą, arba pereikite prie 3 veiksmo, jei reikia nedelsiant kultivuoti. Jei norite nedelsiant pradėti kultivuoti, greitai atšildykite buteliuką panardindami jį į 37 °C temperatūros vandens vonelę su švariu vandeniu ir antimikrobine priemone, švelniai maišydami 40-60 sekundžių, kol liks nedidelis ledo gabalėlis. Visus tolesnius veiksmus atlikite steriliomis sąlygomis srauto gaubte, prieš atidarydami kriovialą dezinfekuokite jį 70 % etanoliu. Atsargiai atidarykite dezinfekuotą buteliuką ir perpilkite ląstelių suspensiją į 15 ml centrifugos mėgintuvėlį, kuriame yra 8 ml kambario temperatūros mitybinės terpės, atsargiai išmaišykite. Mišinį centrifuguokite 300 x g greičiu 3 minutes, kad atsiskirtų ląstelės, ir atsargiai išmeskite supernatantą su šaldymo terpės likučiais. Švelniai resuspenduokite ląstelių granules 10 ml šviežios mitybinės terpės. Jei ląstelės yra prigludusios, suspensiją padalykite į dvi T25 kolbas; jei tai suspensinės kultūros, visą terpę perkelkite į vieną T25 kolbą, kad paskatintumėte veiksmingą ląstelių sąveiką ir augimą. Laikykitės nustatytų subkultūrų protokolų, kad ląstelių linija nuolat augtų ir būtų palaikoma, taip užtikrinant patikimus eksperimentų rezultatus.
Inkubacijos atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.
Pristatymo sąlygos	Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
Laikymo sąlygos	Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Jei ketinate naudoti Cytion ląstelių linijas tik vidiniams tyrimams vienoje tyrimų vietoje, užpildykite ir pasirašykite mūsų medžiagų perdavimo sutartį (MTA) ir pateikite ją kartu su užsakymu.

Bet kokiam komerciniam naudojimui, įskaitant, bet neapsiribojant, mokamais paslaugų darbais, kokybės kontrolės bandymais, produktų išleidimu, diagnostiniu naudojimu ar reguliavimo tyrimais, užpildykite numatomo naudojimo formą, kad galėtume parengti jūsų projektui pritaikytą sutartį.

Atkreipkite dėmesį: MTA taikoma tik tam tikroms ląstelių linijoms. Jei šis pranešimas ir MTA dokumentas yra pateikti produkto puslapyje, sutartis yra taikoma. Ląstelių linijoms, kurioms MTA netaikoma, nuoroda į sutartį nebus rodoma. MTA negalioja klientams Amerikoje, Kinijoje ar Taivane. Norėdami gauti atitinkamą sutartį, susisiekite su mūsų JAV padaliniu.

HT55 ląstelės

Bendra informacija

Charakteristikos

Reguliavimo duomenys

Biomolekuliniai duomenys

Tvarkymas

Kokybės kontrolė ir molekulinė analizė

Medžiagų perdavimo sutartis