EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
„Eagle’s Minimum Essential Medium“ (EMEM) yra viena iš plačiausiai naudojamų bazinių terpių įvairių rūšių žinduolių ląstelių, ypač adhezyvinių ląstelių linijų, kultivavimui. Ši klasikinė formulė, kurią iš pradžių sukūrė Harry Eagle, sudėtyje turi būtinas amino rūgštis, vitaminus ir neorganines druskas, reikalingas pirminių ląstelių ir įsitvirtinusių ląstelių linijų augimui palaikyti standartinėmis kultivavimo sąlygomis.
Ši paruošta naudoti, steriliu filtru filtruota skysta formulė yra papildyta Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutaminu, D-gliukoze (1,0 g/l) ir 2,2 g/l natrio bikarbonatu (NaHCO3), todėl ji tinka naudoti CO2 kontroliuojamoje inkubatoriaus atmosferoje (paprastai 5 % CO2). Įtrauktas fenolio raudonasis veikia kaip pH indikatorius, leidžiantis patogiai vizualiai stebėti terpės būklę ląstelių kultūros metu.
Pagrindinės savybės
- Klasikinė „Eagle’s MEM“ formulė su Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS)
- Sudėtyje yra 2 mM L-glutamino – paruošta nedelsiant naudoti
- 2,2 g/l natrio bikarbonato – buferizuota 5 % CO2 inkubacijai
- Su D-gliukoze (1,0 g/l) kaip pagrindiniu anglies šaltiniu
- Su fenolio raudonu kaip pH indikatoriumi
- Be HEPES ir be natrio piruvato
- Steriliai filtruota skysta terpė, paruošta naudoti
- pH 7,0–7,6
Tipiniai pritaikymai
EMEM tinka įvairių žinduolių ląstelių linijų, įskaitant HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 ir daugelio pirminių ląstelių, kultivavimui. Dažniausiai naudojama:
- Įprastinis adhezyvinių ląstelių linijų palaikymas ir dauginimas
- Virusų dauginimo ir vakcinų gamybos procesai
- Citotoksiškumo ir biologinių tyrimų taikymus
- Transfekcijos ir baltymų ekspresijos tyrimai
- Pagrindinius ląstelių biologijos ir molekulinės biologijos tyrimus
Siekiant užtikrinti optimalų ląstelių augimą, EMEM paprastai papildoma 5–10 % veršelių serumu (FBS) ir, priklausomai nuo ląstelių linijos, neesminėmis amino rūgštimis (NEAA) bei antibiotikais, pvz., penicilinu ir streptomicinu.
Naudojimas ir laikymas
Neatidarytą butelį laikykite +2 °C – +8 °C temperatūroje, apsaugotą nuo šviesos. Atidarius, naudokite aseptinėmis sąlygomis. Tirpale esantis L-glutaminas palaipsniui skaidosi – norint pasiekti geriausius rezultatus, rekomenduojame terpę sunaudoti per 4 savaites nuo atidarymo arba, jei ji buvo laikoma ilgiau, prieš naudojimą papildyti šviežiu L-glutaminu. Prieš įpilant į ląsteles, leiskite terpei sušilti iki 37 °C.
Kokybė
Pagaminta laikantis griežtų kokybės standartų. Kiekviena partija yra tikrinama dėl sterilumo, pH, osmolalumo ir endotoksinų lygio, siekiant užtikrinti pastovų veikimą ląstelių kultūrų taikymuose.
Produkto specifikacijos
| Specifikacija | Išsami |
|---|---|
| Produkto tipas | MEM |
| Produkto kategorija | Ląstelių kultūros terpės |
| Formatas | Skystis |
| Sterilus | Taip |
| Talpa | 500 ml |
| L-glutaminas | Su L-glutaminu (2 mM) |
| Gliukozė | Su gliukoze (1,0 g/l) |
| Natrio bikarbonatas | Su NaHCO3 (2,2 g/l) |
| HEPES | Be HEPES |
| Natrio piruvatas | Be natrio piruvato |
| Fenolio raudonasis | Su fenolio raudonuoju |
| Druskos tirpalas | Earle'io subalansuotas druskos tirpalas (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Endotoksinų kiekis | Nenurodyta |
| Laikymas | +2 °C iki +8 °C |
Sudėtis (sudėtis viename litre)
| Komponentas | Koncentracija (mg/l) |
|---|---|
| Neorganinės druskos | |
| Kalcio chloridas · 2H2O | 265,00 |
| Magnio sulfatas | 97,72 |
| Kalio chloridas | 400,00 |
| Natrio chloridas | 6 800,00 |
| Natrio dihidrogeno fosfatas, bevandenis | 122,00 |
| Natrio bikarbonatas (NaHCO3) | 2 200,00 |
| Amino rūgštys | |
| L-argininas · HCl | 126,00 |
| L-cistinas · 2HCl | 31,30 |
| L-glutaminas | 292,00 |
| L-histidinas · HCl · H2O | 42,00 |
| L-izoleucinas | 52,00 |
| L-leucinas | 52,00 |
| L-lizinas · HCl | 72,50 |
| L-metioninas | 15,00 |
| L-fenilalaninas | 32,00 |
| L-treoninas | 48,00 |
| L-triptofanas | 10,00 |
| L-tirozinas · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valinas | 46,00 |
| Vitaminai | |
| D-kalcio pantotenatas | 1,00 |
| Cholino chloridas | 1,00 |
| Folio rūgštis | 1,00 |
| mio-inozitolis | 2,00 |
| Nikotinamidas | 1,00 |
| Piridoksalas · HCl | 1,00 |
| Riboflavinas | 0,10 |
| Tiaminas · HCl | 1,00 |
| Kiti komponentai | |
| D(+)-gliukozė | 1 000,00 |
| Fenolio raudonasis | 10,00 |