DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 yra plačiai pripažinta ir dažnai naudojama bazinė terpė ląstelių kultūroms biologiniams tyrimams. Ji yra pagrindinis maistinių medžiagų šaltinis įvairių žinduolių ląstelių linijų augimui, ypač kai papildoma veršelių serumu (FBS).
Ši unikali formulė sujungia Dulbecco modifikuotą Eagle terpę (DMEM) ir Ham's F-12 (Ham's maistinių medžiagų mišinį F-12) tiksliu 1:1 santykiu. L-glutamino pridėjimas dar labiau pagerina jos sudėtį.
DMEM, kilusi iš Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), pasižymi didesne amino rūgščių ir vitaminų koncentracija, palyginti su savo pirmtake. Tuo tarpu Ham's F-12 yra pagrįsta Ham's F-10 terpe, suteikiančia papildomą būtinų komponentų rinkinį.
Siekiant palaikyti optimalų ląstelių augimą, įprasta DMEM:Ham's F12 papildyti FBS, kurio koncentracija paprastai yra 5–10 %. Šis priedas yra būtinas, nes terpėje trūksta augimo hormonų, lipidų ir baltymų, kurie yra svarbūs ląstelių vystymuisi.
DMEM:Ham's F12 sudėtyje yra pH buferinė sistema, o dažnai ji papildoma fenolio raudonuoju, kuris yra pH indikatorius. Ląstelės, auginamos DMEM:Ham's F12 arba bet kurioje terpėje, kurioje naudojama bikarbonato buferinė sistema, reikalauja kontroliuojamos 5–10 % CO2 aplinkos, kad būtų išlaikytas tinkamas pH lygis.
Kokybės kontrolė
- Steriliškai filtruota
Laikymas ir galiojimo laikas
- Laikyti +2 °C – +8 °C temperatūroje, apsaugotą nuo šviesos.
- Atidarius, laikyti 4 °C temperatūroje ir sunaudoti per 6–8 savaites.
Pristatymo sąlygos
- Aplinkos temperatūra
Laikymas
- Laikyti šaldytuve +2 °C iki +8 °C temperatūroje, tamsioje vietoje. Venkite užšaldymo ir dažno šildymo iki +37 °C, nes tai sumažina produkto kokybę.
- Nešildykite terpės aukštesnėje nei 37 °C temperatūroje ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių, pvz., mikrobangų krosnelių.
- Jei ketinate naudoti tik dalį terpės, prieš naudojimą paimkite reikiamą kiekį ir pašildykite jį iki kambario temperatūros.
Sudėtis
| Kategorija | Komponentai | Koncentracija (mg/l) |
| Amino rūgštys | Glicinas | 18,75 |
| L-alaninas | 4,45 | |
| L-argininas HCl | 147,50 | |
| L-asparaginas H₂O | 7,50 | |
| L-asparto rūgštis | 6,65 | |
| L-cisteinas HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistinas 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutamo rūgštis | 7,35 | |
| L-glutaminas | 365,00 | |
| L-histidino HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleucinas | 54,47 | |
| L-leucinas | 59,05 | |
| L-lizinas HCl | 91,25 | |
| L-metioninas | 17,24 | |
| L-fenilalaninas | 35,48 | |
| L-prolinas | 17,25 | |
| L-serinas | 26,25 | |
| L-treoninas | 53,45 | |
| L-triptofanas | 9,02 | |
| L-tirozinas 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valinas | 52,85 | |
| Vitaminai | D-biotinas | 0,0035 |
| Cholino chloridas | 8,98 | |
| D-kalcio pantotenatas | 2,24 | |
| Folio rūgštis | 2,66 | |
| mio-inozitolis | 12,60 | |
| Nikotinamidas | 2,02 | |
| Piridoksino HCl | 0,031 | |
| Piridoksalo HCl | 2,00 | |
| Riboflavinas | 0,219 | |
| Tiamino HCl | 2,17 | |
| Vitaminas B12 | 0,68 | |
| Neorganinės druskos | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Kiti komponentai | D-gliukozė | 3151,00 |
| Hipoksantinas | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolo rūgštis | 0,042 | |
| Lipoinė rūgštis | 0,105 | |
| Fenolio raudonojo natrio druska | 8,63 | |
| Putrescinas 2 HCl | 0,081 | |
| Natrio piruvatas | 55,00 | |
| Timidinas | 0,365 |