DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 yra plačiai pripažinta ir dažnai naudojama bazinė terpė ląstelių kultūrose biologiniams tyrimams. Ji tarnauja kaip pagrindinis maistinių medžiagų šaltinis įvairių žinduolių ląstelių linijų augimui, ypač kai papildoma veršelių serumu (FBS).
Ši unikali formulė sujungia Dulbecco modifikuotą „Eagle“ terpę (DMEM) ir Ham's F-12 (Ham's maistinių medžiagų mišinys F-12) tiksliu 1:1 santykiu. L-glutamino pridėjimas dar labiau pagerina jos sudėtį.
DMEM, kilusi iš „Eagle's Minimal Essential Medium“ (EMEM), pasižymi didesne amino rūgščių ir vitaminų koncentracija, palyginti su savo pirmtake. Tuo tarpu „Ham's F-12“ pagrįsta „Ham's F-10“ terpe, kuri suteikia papildomą būtinų komponentų rinkinį.
Siekiant užtikrinti optimalų ląstelių augimą, įprasta „DMEM:Ham's F12“ terpę papildyti FBS, kurio koncentracija paprastai yra 5–10 %. Šis priedas yra būtinas, nes terpėje trūksta augimo hormonų, lipidų ir baltymų, kurie yra būtini ląstelių vystymuisi.
DMEM:Ham's F12 sudėtyje yra pH buferinė sistema, o dažnai į ją įdedama fenolio raudonoji, kuri veikia kaip pH indikatorius. Ląstelėms, auginamoms DMEM:Ham's F12 terpėje arba bet kurioje kitoje terpėje, kurioje naudojama bikarbonato buferinė sistema, būtina kontroliuojama 5–10 % CO₂ koncentracija, kad būtų išlaikytas tinkamas pH lygis.
Kokybės kontrolė
- Steriliai filtruota
Laikymas ir galiojimo laikas
- Laikyti +2–+8 °C temperatūroje, apsaugotą nuo šviesos.
- Atidarius, laikyti 4 °C temperatūroje ir sunaudoti per 6–8 savaites.
Pristatymo sąlygos
- Aplinkos temperatūra
Laikymo sąlygos
- Laikyti šaldytuve nuo +2 °C iki +8 °C tamsioje vietoje. Venkite užšalimo ir dažno šildymo iki +37 °C, nes tai pablogina produkto kokybę.
- Nešildykite terpės aukštesnėje nei 37 °C temperatūroje ir nenaudokite nekontroliuojamų šilumos šaltinių, pvz., mikrobangų krosnelių.
- Jei ketinate naudoti tik dalį terpės, prieš naudojimą išimkite reikiamą kiekį ir pašildykite jį iki kambario temperatūros.
Sudėtis
| Kategorija | Komponentai | Koncentracija (mg/l) |
| Amino rūgštys | Glicinas | 18,75 |
| L-alaninas | 4,45 | |
| L-argininas HCl | 147,50 | |
| L-asparaginas H₂O | 7,50 | |
| L-asparto rūgštis | 6,65 | |
| L-cisteinas HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistinas 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutamo rūgštis | 7,35 | |
| L-glutaminas | 365,00 | |
| L-histidino HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleucinas | 54,47 | |
| L-leucinas | 59,05 | |
| L-lizinas HCl | 91,25 | |
| L-metioninas | 17,24 | |
| L-fenilalaninas | 35,48 | |
| L-prolinas | 17,25 | |
| L-serinas | 26,25 | |
| L-treoninas | 53,45 | |
| L-triptofanas | 9,02 | |
| L-tirozinas 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valinas | 52,85 | |
| Vitaminai | D-biotinas | 0,0035 |
| Cholino chloridas | 8,98 | |
| D-kalcio pantotenatas | 2,24 | |
| Folio rūgštis | 2,66 | |
| mio-inozitolis | 12,60 | |
| Nikotinamidas | 2,02 | |
| Piridoksino HCl | 0,031 | |
| Piridoksalo HCl | 2,00 | |
| Riboflavinas | 0,219 | |
| Tiamino HCl | 2,17 | |
| Vitaminas B12 | 0,68 | |
| Neorganinės druskos | CaCl₂·2H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5 H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9 H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Kiti komponentai | D-gliukozė | 3151,00 |
| Hipoksantinas | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolo rūgštis | 0,042 | |
| Lipoinė rūgštis | 0,105 | |
| Fenolio raudonojo natrio druska | 8,63 | |
| Putrescinas 2 HCl | 0,081 | |
| Natrio piruvatas | 55,00 | |
| Timidinas | 0,365 |