CHO-EGFR ląstelės

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

1 900,00 €*

Produktai yra siunčiami užšaldyti sausojo ledo kriotubose. Kiekvienoje kriotuboje paprastai yra 3 × 10 ⁶ ląstelių adhezyvinių linijų atveju arba 5 × 10⁶ ląstelių suspensijos linijų atveju (išsami informacija pateikta partijos CoA).

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305977

Saugos duomenų lapas

Produkto lapas

Aprašymas	Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos taikomos tik akademiniams ir nekomerciniams klientams. Komercinėms įmonėms kaina yra apie 6 250 eurų. Jei atstovaujate komercinei įmonei arba nesate tikri, kuri kategorija jums taikoma, prašome susisiekti su mumis. CHO-EGFR ląstelės yra rekombinuotos kinų žiurkėno kiaušidžių (CHO) ląstelės, modifikuotos taip, kad stabiliai ekspresuotų žmogaus epiderminio augimo faktoriaus receptorių (EGFR/ERBB1/HER1) – receptoriaus tirozino kinazę, priklausančią ErbB šeimai. EGFR reguliuoja pagrindinius ląstelių procesus, įskaitant proliferaciją, išlikimą, migraciją ir diferenciaciją, aktyvuodamas pasroviui esančius signalizacijos kelius, tokius kaip MAPK/ERK, PI3K/AKT ir JAK/STAT. Nenormalus EGFR ekspresavimas, amplifikacija ar mutacija dažnai siejama su daugeliu kietųjų navikų, įskaitant nedidelio ląstelių plaučių vėžį, storosios žarnos vėžį, glioblastomą ir galvos bei kaklo plokščialąstelinį karcinomą. Stabilūs CHO-EGFR modeliai suteikia kontroliuojamą platformą receptorių biologijos ir terapinio taikymo tyrimams. CHO-EGFR ląstelės plačiai naudojamos onkologijos tyrimuose ir biologinių preparatų kūrime anti-EGFR monokloninių antikūnų, tirozino kinazės inhibitorių, bispecifinių antikūnų, antikūnų-vaistų konjugatų ir modifikuotų imuninių ląstelių terapijų charakterizavimui. Šios ląstelės leidžia kiekybiškai įvertinti ligando prisijungimą, receptorių aktyvaciją, internalizaciją, fosforilinimo būklę, pasroviui einančius signalinius kelius ir terapinį blokavimą. Jos taip pat dažnai naudojamos srauto citometrijos tyrimuose, receptorių užimtumo tyrimuose, didelio našumo atrankoje ir stiprumo bandymų procesuose. Kadangi CHO ląstelės pasižymi tvirtomis augimo savybėmis ir palyginti maža endogenine žmogaus receptorių sistemų ekspresija, jos suteikia atkartojamą foną rekombinantinei EGFR ekspresijai ir standartizuotų tyrimų kūrimui.
Organizmas	Kinų žiurkėnas
Audiniai	Kiaušidės

Amžius	Suaugusiųjų
Lytis	Moteris
Ląstelės tipas	Kiaušidės epitelio ląstelė
Augimo savybės	Prigludęs / suspenduotas

Citavimas	CHO-EGFR (Cytion katalogo numeris 305977)
Biologinės saugos lygis	1
NCBI_TaxID	10029

Kultūros terpė	Adherentiškoms kultūroms: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a) Suspensinėms kultūroms: CHO augimo terpė A (iš "InSCREENeX"; "InSCREENeX" katalogo numeris INS-ME-1039)
Maisto papildai	Adherentiškoms kultūroms: Į terpę pridėkite 5% FBS. Pridėkite geneticino (G418-Sulfat), kad galutinė koncentracija būtų 0,5 mg/ml.
Disociacijos reagentas	Adherentiškoms kultūroms: Trypsinas-EDTA
Subkultūrinimas	Įprastinėms adherentinėms ląstelių kultūroms: Kad pašalintumėte visą likusią terpę, iš adherentinių ląstelių išsiurbkite seną terpę ir nuplaukite jas PBS. Išsiurbę PBS, įpilkite reikiamą kiekį tripsino ir EDTA tirpalo, atsižvelgiant į kultūros indo dydį (pvz., 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), ir inkubuokite kambario arba 37 °C temperatūroje 5-10 minučių arba tol, kol ląstelės atsiskirs. Stebėkite atsiskyrimą per mikroskopą ir, jei reikia, švelniai palieskite indą, kad ląstelės išsilaisvintų. Kai ląstelės atsiskiria, įpilkite pilną terpę, kad būtų inaktyvuotas tripsinas/EDTA, atsargiai reuspenduokite ląsteles ir perkelkite alikvotą ląstelių suspensijos į naują auginimo indą su šviežia terpe. Įstatykite indą į inkubatorių, kuriame nustatyta 37 °C temperatūra ir 5 %_CO2, o terpę keiskite kas 2-3 dienas.
Skysčių atnaujinimas	2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo	Po atšildymo suskirstykite ląsteles santykiu 1:2-1:3 į T25 kolbas ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso bei sukibti (jei tai adherencinės kultūros) mažiausiai 24 valandas.
Užšaldyti terpę	Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Ląstelių atšildymas ir kultivavimas	Patikrinkite, ar pristatant buteliuką jis išlieka gerai užšaldytas, nes ląstelės gabenamos ant sauso ledo, kad gabenimo metu būtų palaikoma optimali temperatūra. Gavę iš karto laikykite kriovialą žemesnėje nei -150 °C temperatūroje, kad užtikrintumėte ląstelių vientisumo išsaugojimą, arba pereikite prie 3 veiksmo, jei reikia nedelsiant kultivuoti. Jei norite nedelsiant pradėti kultivuoti, greitai atšildykite buteliuką panardindami jį į 37 °C temperatūros vandens vonelę su švariu vandeniu ir antimikrobine priemone, švelniai maišydami 40-60 sekundžių, kol liks nedidelis ledo gabalėlis. Visus tolesnius veiksmus atlikite steriliomis sąlygomis srauto gaubte, prieš atidarydami kriovialą dezinfekuokite jį 70 % etanoliu. Atsargiai atidarykite dezinfekuotą buteliuką ir perpilkite ląstelių suspensiją į 15 ml centrifugos mėgintuvėlį, kuriame yra 8 ml kambario temperatūros mitybinės terpės, atsargiai išmaišykite. Mišinį centrifuguokite 300 x g greičiu 3 minutes, kad atsiskirtų ląstelės, ir atsargiai išmeskite supernatantą su šaldymo terpės likučiais. Švelniai resuspenduokite ląstelių granules 10 ml šviežios mitybinės terpės. Jei ląstelės yra prigludusios, suspensiją padalykite į dvi T25 kolbas; jei tai suspensinės kultūros, visą terpę perkelkite į vieną T25 kolbą, kad paskatintumėte veiksmingą ląstelių sąveiką ir augimą. Laikykitės nustatytų subkultūrų protokolų, kad ląstelių linija nuolat augtų ir būtų palaikoma, taip užtikrinant patikimus eksperimentų rezultatus.
Inkubacijos atmosfera	37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.
Pristatymo sąlygos	Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
Laikymo sąlygos	Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Sterilumas	Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus. Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

CHO-EGFR ląstelės

Bendra informacija

Charakteristikos

Reguliavimo duomenys

Biomolekuliniai duomenys

Tvarkymas

Kokybės kontrolė / Genetinis profilis / HLA