RBL-2H3 ląstelės – RBL-2H3 reikšmė alerginiame atsakyje ir imunologiniuose tyrimuose
RBL-2H3 ląstelių linija yra iš žiurkių gauta bazofilinių leukemijos ląstelių linija, naudojama imunologiniuose tyrimuose. Ji tarnauja kaip modelinė sistema, skirta tirti putliųjų ląstelių fiziologiją, elgseną ir funkcijas. Šios ląstelės taip pat naudojamos alerginių reakcijų, imunologinių procesų tyrimams bei vaistų bandymams ir kūrimui.
- Auginimo terpė
- RBL-2H3 ląstelėms auginti naudojama EMEM terpė, kurioje yra 10 % FBS, 2 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO3 ir EBSS druskos. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
- Padvigubėjimo laikas
- RBL-2H3 putliųjų ląstelių dauginimosi laikas yra maždaug 50–60 valandų.
- Augimo tipas
- RBL-2H3 yra adhezyvinė ląstelių linija.
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-2
- Galima įsigyti iš
- „Cytion“ — Užsisakykite RBL-2H3
- RBL-2H3 ląstelės: kilmė ir bendrosios charakteristikos
- RBL-2H3 ląstelės: informacija apie kultivavimą
- RBL-2H3 bazofilų ląstelių linijos privalumai ir trūkumai
- RBL-2H3 ląstelių linija: imunologinių tyrimų pagrindas
- RBL-2H3 ląstelių linija: svarbiausi klausimai ir atsakymai tyrėjams
- Nuorodos
- RBL-2H3 ląstelių linija pažangiems imunologiniams tyrimams
- RBL-2H3 ląstelės: mokslinių tyrimų publikacijos
- Ištekliai, susiję su RBL-2H3 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Dažnai užduodami klausimai
RBL-2H3 ląstelės: kilmė ir bendrosios charakteristikos
Prieš naudodami bazofilų ląstelių liniją savo tyrimuose, turėtumėte žinoti jos kilmę ir bendruosius požymius. Šiame straipsnio skyriuje rasite informacijos apie RBL-2H3 ląstelių pagrindus. Pavyzdžiui, kas yra RBL-2H3 putliosios ląstelės? Kodėl verta naudoti RBL-2H3 ląsteles? Kas yra RBL-2H3 ląstelės žiurkių bazofilinėje leukemijoje? Kokia yra RBL-2H3 morfologija? Ar RBL-2H3 ląstelės yra nemirtingos?
- RBL-2H3 yra bazofilinės leukemijos ląstelės, 1978 m. išskirtos iš Wistar žiurkių bazofilų Nacionalinio dantų tyrimų instituto Imunologijos laboratorijoje.
- RBL-2H3 ląstelės turi c-kit receptoriaus tirozino kinazę ir putliųjų ląstelių proteazės II (RMCP-II) receptorius, todėl jos yra potencialus putliųjų ląstelių modelis. Dėl to jos dažnai vadinamos putliosiomis ląstelėmis, nepaisant to, kad yra kilusios iš žiurkių bazofilų [1].
- Aktyvuotos jos išskiria histaminą ir kitus mediatorius bei ekspresuoja didelio afiniteto IgE receptorius.
- RBL-2H3 ląstelės pasižymi fibroblastams būdinga morfologija.
RBL-2H3 ląstelės: informacija apie auginimą
Šiame skyriuje sužinosite keletą svarbiausių dalykų apie RBL-2H3 ląstelių linijos kultivavimą. Sužinosite: koks yra RBL-2H3 ląstelių dvigubėjimo laikas? Koks yra RBL-2H3 ląstelių sėjimo tankis? Koks yra RBL-2H3 ląstelių kultivavimo protokolas? Kokia yra RBL-2H3 ląstelių linijos užšaldymo terpė?
Pagrindiniai RBL-2H3 ląstelių auginimo aspektai
Populiacijos padvigubėjimo laikas:
RBL-2H3 putliųjų ląstelių dauginimosi laikas yra maždaug 50–60 valandų.
Adhezyvinė ar suspensinė:
RBL-2H3 yra adhezyvinė ląstelių linija.
Subkultivavimo santykis:
RBL-2H3 ląstelėms subkultivavimo santykis išlaikomas nuo 1:2 iki 1:4. Prisijungusios ląstelės nuplaunamos magnio ir kalcio neturinčiu 1 x PBS tirpalu. Pridėjus perauginimo tirpalą „Accutase“, ląstelės 10 minučių laikomos kambario temperatūroje, kad atsiskirtų nuo kultūros indo dugno. Įpilama šviežios terpės, o ląstelės centrifuguojamos. Surinktos ląstelės atsargiai resuspenduojamos šviežioje terpėje ir supilamos į naujus kolbelius, kuriuose yra auginimo terpė.
Augimo terpė:
RBL-2H3 ląstelėms kultivuoti naudojama EMEM terpė, kurioje yra 10 % FBS, 2 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO₃ ir EBSS druskos. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
RBL-2H3 ląstelės auginamos drėgname inkubatoriuje, nustatytame 37 °C temperatūrai ir prijungtame prie 5 % CO₂ šaltinio.
Laikymas:
Ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba elektrinėje šaldymo kameroje, esant temperatūrai žemiau -150 °C, siekiant užtikrinti ilgalaikį ląstelių gyvybingumą.
Užšaldymo procesas ir terpė:
RBL-2H3 ląstelės užšaldomos naudojant CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpę ir taikant lėto užšaldymo procesą. Trumpai tariant, šis metodas leidžia temperatūrą mažinti 1 °C per minutę ir apsaugo ląsteles nuo šoko.
Atšildymo procesas:
RBL-2H3 ląstelės atšildomos iš anksto nustatytame vandens vonioje (37 °C) maždaug 60 sekundžių. Po to ląstelės įdedamos į šviežią auginimo terpę ir centrifuguojamos. Šis etapas yra būtinas, siekiant pašalinti užšaldymo terpės komponentus. Toliau ląstelių nuosėdos resuspenduojamos auginimo terpėje, o ląstelės perpilamos į kolbą kultivavimui.
Biologinio saugumo lygis:
RBL-2H3 ląstelės turi būti laikomos 1 biologinio saugumo lygio laboratorijose.
Paskelbta: 2023 m. | Paskutinis peržiūrėjimas: 2026 m. gegužė
RBL-2H3 bazofilų ląstelių linijos privalumai ir trūkumai
RBL-2H3 ląstelės dažnai naudojamos imunologiniuose tyrimuose. Šiame skyriuje apžvelgiami pagrindiniai jų privalumai ir trūkumai.
Privalumai
- Lengva kultivuoti: RBL-2H3 ląsteles lengva kultivuoti ir išlaikyti laboratorinėse sąlygose. Tai sudaro sąlygas ekonomiškiems ir pakartojamiems eksperimentams, todėl jos yra populiarus pasirinkimas pradiniams imunologijos tyrimams.
Trūkumai
- Nežmogiškos kilmės: RBL-2H3 ląstelės, kilusios iš žiurkių bazofilų, gali netiksliai imituoti žmogaus biologinius procesus, o tai gali riboti jų pritaikomumą tyrimams, susijusiems būtent su žmogumi. Dėl to, ekstrapoliuojant rezultatus į žmogaus organizmą, duomenis reikia interpretuoti atsargiai.
- Supaprastintas putliųjų ląstelių modelis: Nors šios ląstelės suteikia pagrindinį modelį putliųjų ląstelių funkcijoms tirti, jos nevisiškai atspindi sudėtingą putliųjų ląstelių sąveiką žmogaus imuninėje sistemoje. Todėl jos gali nepakankamai atspindėti daugialypį putliųjų ląstelių vaidmenį imuniniuose atsakose ar ligų būklėse in vivo.
RBL-2H3 ląstelių linija: imunologinių tyrimų kertinis akmuo
Bazofilų ir putliųjų ląstelių tyrimai naudojant RBL-2H3 ląstelių liniją
Iš Rattus norvegicus gauta RBL-2H3 ląstelių linija yra pagrindinis modelis bazofilų ir putliųjų ląstelių biologijai tirti. Šios žiurkių putliosios ląstelės suteikia esminių įžvalgų apie putliųjų ląstelių mediatorių išsiskyrimą, kuris yra kritiškai svarbus siekiant suprasti alergines būkles, pavyzdžiui, alerginį rinitą. Naudodamiesi šiomis ląstelėmis, mokslininkai tiria ląstelių receptorių dinamiką ir imunologinių sinapsų susidarymą, kurie yra esminiai imuninės sistemos reakcijai į alergenus. 2019 m. paskelbtame įdomiame tyrime, kuriame buvo naudojama RBL-2H3 ląstelių linija, buvo tirti mechanizmai, lemiantys pseudoalergines reakcijas, kurias sukelia Qingkailing injekcija. Tyrimas parodė, kad PI3K-RAC1 signalų perdavimo kaskada iš dalies sukelia šią alerginę reakciją ląstelėse [2].
Imunologinių sinapsų dinamika alergijos tyrimuose
RBL-2H3 ląstelės, plačiai naudojamos imunologijos tyrimuose, yra ypač veiksmingos tiriant imunologinių sinapsių dinamiką. Tai padeda išsiaiškinti imuninės sistemos komunikacijos procesus, o šie tyrimai taikomi tiek periferinio kraujo, tiek peritoninių putliųjų ląstelių tyrimams. Tokie tyrimai yra gyvybiškai svarbūs siekiant visapusiškai suprasti imuninį atsaką tiek sisteminiame, tiek lokalizuotame kontekste.
Vaistų atranka ir toksiškumo tyrimai
Atliekant vaistų atranką ir tyrimus, pasinaudojama RBL ląstelių jautrumu įvairiems dirgikliams, įskaitant tyrimus, kaip H₂O₂ slopina IgE tarpininkaujamas reakcijas. Šios ląstelės atlieka esminį vaidmenį kuriant gydymo būdus tokioms ligoms kaip streptokokinės infekcijos, kai „mitis“ grupės streptokokai slopina putliųjų ląstelių aktyvaciją. Be to, mokslininkai, naudodami šį RBL 2H3 mc modelį, vertina įvairių medžiagų, įskaitant chemines medžiagas, vaistus ir nanodaleles, toksinį poveikį. Pavyzdžiui, neseniai atliktame tyrime (2022 m.) buvo vertinamas polistireno mikroplastikų citotoksiškumas RBL-2H3 ląstelėms. Mokslininkai nustatė, kad mikroplastikai pažeidžia RBL-2H3 ląstelių organelles ir skatina ląstelių mirtį [3]. Kitas 2021 m. tyrimas, naudojant RBL-2H3 mc modelį, įvertino natūralaus produkto – neferino – antialerginį ir priešuždegiminį potencialą. Tyrimas atskleidė, kad šis junginys pasižymi geromis antialerginėmis ir priešuždegiminėmis savybėmis [4].
Pažangios imunologinių matavimų metodikos
Nuoseklus ir išmatuojamas mediatorių išsiskyrimas iš RBL-2H3 ląstelių jas daro idealias patogiam fluorimetriniam tyrimui, palengvinančiam tikslius ir tikslus matavimus, kurie yra ypač svarbūs ligų tyrimams ir terapinių preparatų vertinimui.
RBL-2H3 ląstelių linija, kilusi iš Rattus norvegicus, yra neįkainojamas turtas tiek fundamentiniuose, tiek taikomuosiuose imunologijos srities tyrimuose. Ji suteikia plačias galimybes gilinti mūsų žinias apie imunologines ligas ir jų gydymą.
RBL-2H3 ląstelių linija pažangiems imunologiniams tyrimams
RBL-2H3 ląstelės: Moksliniai straipsniai
Toliau pateikiami keli įdomūs moksliniai straipsniai, kuriuose aptariamos RBL-2H3 putliosios ląstelės:
Narirutino slopinamasis poveikis RBL-2H3 ląstelių degranuliacijai
Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Immunopharmacology and Immunotoxicology“ (2021 m.). Tyrime teigiama, kad natūralus junginys narirutinas slopina RBL-2H3 ląstelių degranuliaciją, reguliuodamas NF-κB, MAPK ir tirozino kinazės signalizacijos kelią.
Šiame „International Journal of Molecular Sciences“ (2020 m.) paskelbtame tyrime teigiama, kad apigeninas žymiai slopina RBL-2H3 ir RAW264.7 ląstelių alergines ir uždegimines reakcijas. Todėl jis gali būti potencialus agentas kovojant su imuninėmis ligomis.
Šiame „International Journal of Molecular Sciences“ (2021 m.) paskelbtame moksliniame straipsnyje buvo įvertintas natūralaus produkto – saponarino – antialerginis ir priešuždegiminis poveikis, naudojant įvairias ląstelių linijas, įskaitant RBL-2H3.
Šiame žurnale „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2014 m.) paskelbtame tyrime nustatyta, kad „Benchalokawichian“ ekstraktai ir kai kurios aktyvios sudedamosios dalys gali slopinti β-heksosaminidazės išsiskyrimą iš RBL-2H3 ląstelių.
Šis straipsnis buvo paskelbtas 2018 m. žurnale „International Journal of Biological Macromolecules“. Tyrime teigiama, kad natūralus produktas „Spirulina maxima“ slopina RBL 2H3 degranuliaciją, užkertant kelią MAPK ir AKT fosforilinimui.
Ištekliai, susiję su RBL-2H3 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
RBL-2H3 yra plačiai naudojama putliųjų ląstelių linija. Čia pateikiami ištekliai, apimantys RBL-2H3 kultivavimo ir transfekcijos protokolus:
- RBL-2H3 putliųjų ląstelių modelis: šiame moksliniame straipsnyje pateikiami RBL-2H3 kultūrų palaikymo ir RBL-2H3 transfekcijos protokolai.
Štai keletas išteklių, paaiškinančių RBL-2H3 ląstelių kultivavimo protokolą:
- RBL-2H3 ląstelės: ši svetainė pravers norint susipažinti su RBL-2H3 ląstelių linijos kultivavimo protokolais. Be to, joje pateikiama informacija apie RBL-2H3 ląstelių auginimo terpes ir kultivavimo sąlygas.
RBL-2H3 ląstelių linija: svarbiausi klausimai ir atsakymai mokslininkams
Literatūra
- Passante, E. ir N. Frankish, „RBL-2H3 ląstelių linija: jos kilmė ir tinkamumas kaip putliųjų ląstelių modelio“. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737–45.
- Li, Q. ir kt., Pseudoalerginė reakcija, kurią sukelia „Qingkailing“ injekcija, iš dalies per PI3K-Rac1 signalizacijos kelią RBL-2H3 ląstelėse. „Toxicology Research“, 2019. 8(3): p. 353–360.
- Liu, L. ir kt., Polistireno mikro- (nano-) plastikai pažeidžia RBL-2H3 ląstelių organelles ir skatina MOAP-1 indukuoti apoptozę. „Journal of Hazardous Materials“, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M. ir kt., Neferino antialerginis ir priešuždegiminis poveikis RBL-2H3 ląstelėms. „International Journal of Molecular Sciences“, 2021. 22(20): p. 10994.