Cellule NCH421K
800,00 €*
I prodotti vengono spediti congelati in ghiaccio secco in criotubi. Ogni criotubo contiene in genere 3 × 10 6 cellule per le linee aderenti o 5 × 106 cellule per le linee in sospensione (per ulteriori dettagli, consultare il certificato di analisi del lotto).
Informazioni generali
| Descrizione | NCH421K è una linea cellulare umana simile alle cellule staminali del glioblastoma, derivata da un tumore primario di glioblastoma prelevato da un paziente adulto. Questa linea cellulare appartiene a una classe di cellule tumorali iniciatrici che conservano caratteristiche chiave delle cellule staminali neurali, tra cui la capacità di auto-rinnovamento, la multipotenza e la capacità di riprodurre l'eterogeneità tumorale. Le cellule NCH421K vengono tipicamente coltivate in condizioni prive di siero e crescono come neurosfere non aderenti, una caratteristica distintiva delle colture di glioma simili alle cellule staminali. Esse esprimono marcatori canonici delle cellule staminali come CD133 e nestina, a sostegno della loro classificazione come modello simile alle cellule staminali del glioblastoma. NCH421K mostra una crescita e una sopravvivenza fortemente dipendenti dal fattore di crescita fibroblastico basico (bFGF), che promuove la proliferazione e il mantenimento delle caratteristiche simili a quelle delle cellule staminali, mentre il fattore di crescita epidermico (EGF) ha un effetto minimo sulla sua espansione. Le cellule mantengono un'elevata espressione dei marcatori delle cellule staminali sotto stimolazione con bFGF e dimostrano la capacità di formare tumori in vivo, evidenziando il loro potenziale tumorigenico. Grazie a queste proprietà, NCH421K è ampiamente utilizzata negli studi sulla biologia delle cellule staminali del glioblastoma, sulla resistenza terapeutica, sulle strategie di differenziazione e sulla valutazione di trattamenti mirati volti a eradicare le popolazioni di cellule tumorali iniziali. Questa linea cellulare è stata creata da Christel Herold-Mende a partire da tessuto di glioblastoma. |
|---|---|
| Organismo | Umano |
| Tessuto | Cervello |
| Malattia | Glioblastoma |
| Sinonimi | NCH421k |
Caratteristiche
| Età | 66 anni |
|---|---|
| Genere | Uomo |
| Etnia | Caucasico |
| Proprietà di crescita | Coltura di sferoidi |
Dati normativi
| Citazione | NCH421K (numero di catalogo Cytion 300118) |
|---|---|
| Livello di biosicurezza | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosauroAccesso | CVCL_x910 |
| Depositante | C. Herold-Mende |
Dati biomolecolari
| Tumorigenico | Sì |
|---|
Manipolazione
| Terreno di coltura | DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a) |
|---|---|
| Integratori | Integrare il terreno di coltura con 10% FBS, 5 mg/L di eparina, 20 ng/mL di bFGF, 20 microgrammi/L di EGF, 5 mg/L di insulina, 100 mg/L di transferrina, 5,2 microgrammi/L di Na-selenit, 6,3 microgrammi/L di progesterone, 161,1 microgrammi/L di putrescina, 50 mg/L di idrocortisone |
| Tempo di raddoppio | da 35 a 40 ore |
| Sottocoltura | Per la subcoltura delle colture di sferoidi, iniziare a dissociare meccanicamente gli sferoidi pipettando su e giù da 5 a 10 volte utilizzando una pipetta Eppendorf con punte filtranti da 1000 μl. Successivamente, centrifugare la miscela a 300g per 5 minuti a temperatura ambiente per pellettizzare le cellule. Scartare il surnatante e risospendere il pellet di cellule in terreno di coltura fresco. Infine, trasferire le cellule risospese in nuovi recipienti di coltura per promuovere l'ulteriore formazione di sferoidi. Questo approccio assicura un'efficiente disgregazione degli sferoidi e li prepara per una crescita continua in un nuovo ambiente |
| Densità di semina | Da 1 a 2 x 105 cellule/ml |
| Rinnovo del fluido | da 2 a 3 volte alla settimana |
| Recupero dopo il disgelo | Lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento per almeno 24-48 ore. |
| Prodotto da congelare | Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto. |
| Scongelamento e coltura delle cellule |
|
| Atmosfera di incubazione | 37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata. |
| Rivestimento del pallone | Nessuno |
| Procedura di congelamento | Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato. |
| Condizioni di spedizione | Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato. |
| Condizioni di conservazione | Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido. |
Controllo di qualità / Profilo genetico / HLA
| Sterilità | La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza. Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane. |
|---|---|
| Profilo STR |
Amelogenina: x,x
CSF1PO: 10,11
D13S317: 8,11
D16S539: 10,11
D5S818: 11,13
D7S820: 10,12
TH01: 6
TPOX: 8,11
vWA: 17,18
D3S1358: 14,16
D21S11: 30
D18S51: 13
Penta E: 7,12
Penta D: 9,13
D8S1179: 12,15
FGA: 21,25
|
| Alleli HLA |
A*: '24:02:01, '24:03:01
B*: '07:02:01, '18:01:01
C*: '05:01:01, '07:02:01
DRB1*: '03:01:01, '15:02:01G
DQA1*: '01:03:01, '05:01:01
DQB1*: '02:01:01, '06:01:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:01:01
|
Certificato di analisi (CoA)
| Numero di lotto | Tipo di certificato | Data | Numero di catalogo |
|---|---|---|---|
| 300118-516SF | Certificato di analisi | 23. Apr. 2026 | 300118 |