Sel KC
Informasi umum
| Deskripsi | KC (Kc167) adalah garis sel embrio Drosophila melanogaster yang berasal dari embrio betina pada tahap penutupan dorsal, terdaftar di Cellosaurus dengan kode CVCL_Z833. Baris sel ini awalnya dikembangkan dan telah digunakan secara luas dalam biologi sel Drosophila, skrining genetik, dan genomika fungsional. Sel Kc167 telah diimortalkan dengan SV40 dan tumbuh secara semi-adheren, membentuk populasi campuran sel yang menempel dan sel yang mengapung longgar. Sel-sel ini termasuk di antara garis sel Drosophila yang paling terkarakterisasi dengan baik dan sepenuhnya dapat dimanfaatkan untuk penekanan gen yang dimediasi RNAi, menjadikannya model landasan untuk skrining RNAi skala genom dalam biologi invertebrata. Sel KC dapat diterapkan dalam biologi sel Drosophila, skrining RNAi dan CRISPR skala genom, studi jalur transduksi sinyal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), penelitian imunitas bawaan, serta studi komparatif mengenai jalur yang terkonservasi secara evolusioner. Genom Drosophila yang telah sepenuhnya diurutkan dan dianotasi, dikombinasikan dengan basis data publik yang luas mengenai reagen RNAi (misalnya, DRSC/TRiP), menjadikan sel KC sangat efektif untuk penemuan genomik fungsional yang tidak bias. Klasifikasi BSL-2 berlaku karena adanya imortalisasi SV40. Sel KC dikultur dalam medium Schneider’s Drosophila yang ditambahkan 2 mM Glutamin dan 10% FBS. Yang penting, garis sel Drosophila dikultur pada suhu 25°C di udara ambien tanpa CO₂ (bukan 37°C / 5% CO₂ seperti pada sel mamalia). Sel-sel dipindahkan dengan cara resuspensi dan pengenceran yang lembut (pertumbuhan semi-adhesi). Media diganti atau sel-sel diencerkan setiap 2–3 hari. |
|---|---|
| Organisme | Drosophila melanogaster (Lalat buah) |
| Jaringan | Embrio |
| Penyakit | Normal |
| Situs metastasis | Embrio (tahap penutupan punggung) |
| Aplikasi | Biologi sel Drosophila; penyaringan RNAi skala genom; penyaringan CRISPR; transduksi sinyal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); imunitas bawaan; genomika fungsional invertebrata |
| Sinonim | KC, K C |
Karakteristik
| Usia | Tahap penutupan punggung |
|---|---|
| Jenis Kelamin | Perempuan |
| Morfologi | Mirip epitel semi-adhesi |
| Jenis sel | Sel embrio |
| Sifat pertumbuhan | setengah melekat |
Data Peraturan
| Kutipan | KC (Nomor katalog Cytion 300604) |
|---|---|
| Tingkat keamanan hayati | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| Aksesi Cellosaurus | CVCL_Z833 |
| Status transgenik | GMO-S2: Garis sel Drosophila ini mengandung kaset imortalisasi SV40 yang terintegrasi secara stabil. Diperlukan pengendalian tingkat BSL-2. Klasifikasi ini hanya berlaku di Jerman dan mungkin berbeda di negara lain. |
Data Biomolekuler
| Kerentanan terhadap virus | SV40 yang tidak dapat dimatikan |
|---|
Penanganan
| Media Kultur | Media Drosophila Schneider + 2 mM glutamin + 10% serum janin sapi (FBS). |
|---|---|
| Suplemen | Tambahkan 2 mM glutamin dan 10% FBS ke dalam medium |
| Reagen Disosiasi | Tidak diperlukan (semi-adherent; aduk perlahan) |
| Menggandakan waktu | sekitar 24 hingga 48 jam |
| Subkultur | Dengan hati-hati, pipet kultur tersebut untuk melarutkan kembali sel-sel semi-adhesi. Pindahkan volume yang sesuai ke labu baru dan tambahkan medium Schneider yang baru dan telah dihangatkan. Encerkan hingga kepadatan 5 × 10⁵ hingga 1 × 10⁶ sel/ml. Inkubasi pada suhu 25°C di udara ambien tanpa CO₂. |
| Rasio pemisahan | 1 sampai 3 |
| Kepadatan penyemaian | 5 × 10⁵ hingga 1 × 10⁶ sel/ml |
| Pembaruan cairan | Setiap 2 hingga 3 hari |
| Media pembekuan | Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi. |
| Pencairan dan Kultur Sel |
|
| Suasana Inkubasi | 25°C, udara sekitar (tidak memerlukan CO₂). |
| Ketentuan Pengiriman | Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai. |
| Kondisi Penyimpanan | Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair. |
Pengendalian Mutu & Analisis Molekuler
Perjanjian Pengalihan Material
Jika Anda berencana menggunakan garis sel Cytion secara eksklusif untuk penelitian internal di satu lokasi penelitian, silakan lengkapi dan tandatangani Perjanjian Transfer Material (MTA) kami, lalu kirimkan bersama pesanan Anda.
Untuk aplikasi komersial - termasuk namun tidak terbatas pada pekerjaan berbayar, pengujian kontrol kualitas, pelepasan produk, penggunaan diagnostik, atau studi regulasi - silakan lengkapi Formulir Tujuan Penggunaan agar kami dapat menyiapkan perjanjian yang sesuai dengan proyek Anda.
Harap diperhatikan: MTA hanya berlaku untuk garis sel tertentu. Jika pemberitahuan ini dan dokumen MTA muncul di halaman produk, perjanjian tersebut berlaku. Untuk garis sel yang tidak tercakup oleh MTA, tidak akan ada referensi terhadap perjanjian tersebut. MTA tidak berlaku untuk pelanggan di Amerika, China, atau Taiwan. Silakan hubungi entitas kami di AS untuk menerima perjanjian yang sesuai.