PIEC sejtek
Általános információk
| Leírás | A PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) egy spontán immortális endoteliális sejtvonal, amely fiatal sertés csípőartériájának endotéliumából származik. A sejtvonal konfluenciáig növekedve tipikus macskaköves morfológiát mutat, és standard tenyésztési körülmények között adhéziós monoréteget képez. A PIEC-ek megőrzik a legfontosabb endoteliális jellemzőket, beleértve a kontaktusgátlást, az endoteliális markerek, például a von Willebrand-faktor (vWF) expresszióját, valamint a megfelelő in vitro vizsgálatokban a kapilláris-szerű struktúrák kialakításának képességét. Vascularis eredetük miatt a PIEC-eket széles körben használják a sertés endoteliális biológiájának és a gazda-kórokozó interakciók tanulmányozásának modelljeként. Funkcionálisan a PIEC-ek a makrovaszkuláris endoteliális sejtekkel megegyező tulajdonságokat mutatnak, beleértve a gyulladásos ingerekre való reagálóképességet és a leukocita-toborzásban részt vevő adhéziós molekulák expressziójának képességét. Széles körben használják őket a virológiai kutatásokban, különösen a klasszikus sertéspestis vírus (CSFV), az afrikai sertéspestis vírus (ASFV) és a sertés reproduktív és légúti szindróma vírus (PRRSV) szaporodásának és tanulmányozásának céljára. Bizonyos vírusfertőzésekkel szembeni magas toleranciájuk és stabil növekedési jellemzőik értékes in vitro rendszert jelentenek a vírusreplikáció, az antivirális szűrés és a vakcina kutatások számára. A fertőző betegségek alkalmazásain túl a PIEC-ek releváns nagyállat-endoteliális modellként szolgálnak a vaszkuláris barrier funkció, az endoteliális aktiváció, az angiogenezis és a gyulladásos jelátviteli útvonalak vizsgálatához. Sertésből származó endoteliális vonalként a PIEC-ek transzlációs relevanciát biztosítanak a komparatív kardiovaszkuláris kutatásokhoz és preklinikai vizsgálatokhoz, ahol általában sertésmodelleket alkalmaznak. |
|---|---|
| Szervezet | Disznó |
| Szövet | Érrendszeri endothelium |
Jellemzők
| Morfológia | Epithelialis |
|---|---|
| Növekedési tulajdonságok | Adherent |
Szabályozási adatok
| Idézet | PIEC (Cytion katalógusszám: 305213) |
|---|---|
| Biológiai biztonsági szint | 1 |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| CellosaurusAccession | CVCL_C0W5 |
Biomolekuláris adatok
A kezelése
| Kultúrközeg | RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám) |
|---|---|
| Kiegészítők | A táptalajt egészítsük ki hővel inaktivált 10% FBS-szel |
| Dissociációs reagens | Accutase |
| Szubkultúrázás | Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak. |
| Megosztási arány | 1:2–1:4 |
| Folyadék megújítása | hetente 2-3 alkalommal |
| Fagyasztási közeg | Krioprezerváló táptalajként használjon teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében. |
| A sejtek felolvasztása és tenyésztése |
|
| Inkubációs légkör | 37°C, 5%CO2, párásított légkör. |
| Lombik bevonat | A felolvasztás utáni optimális kötődés és életképesség érdekében kollagénnel bevont lombikok vagy lemezek használatát javasoljuk. |
| Fagyasztási eljárás | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Szállítási feltételek | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Tárolási feltételek | Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt. |
Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA
| Sterilitás | A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá. |
|---|
Elemzési tanúsítvány (CoA)
| Tételszám | Tanúsítvány típusa | Dátum | Katalógusszám |
|---|---|---|---|
| 305213-070524 | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 305213 |
Anyagátadási megállapodás
Ha a Cytion sejtvonalakat kizárólag egyetlen kutatási helyszínen végzett belső kutatáshoz kívánja felhasználni, kérjük, töltse ki és írja alá anyagátadási megállapodásunkat (MTA), majd küldje el azt megrendelésével együtt.
Bármilyen kereskedelmi célú felhasználás esetén – ideértve, de nem kizárólagosan a díjszabásos munkát, a minőség-ellenőrzési tesztelést, a termékforgalomba hozatalt, a diagnosztikai felhasználást vagy a szabályozási tanulmányokat – kérjük, töltse ki a tervezett felhasználási űrlapot, hogy elkészíthessük a projektjéhez igazodó megfelelő megállapodást.
Megjegyzés: Az MTA csak bizonyos sejtvonalakra vonatkozik. Ha ez a megjegyzés és az MTA dokumentum megjelenik egy termékoldalon, akkor a megállapodás alkalmazandó. Az MTA hatálya alá nem tartozó sejtvonalak esetében a megállapodásra való hivatkozás nem jelenik meg. Az MTA nem érvényes az amerikai, kínai vagy tajvani ügyfelek számára. Kérjük, vegye fel a kapcsolatot amerikai képviseletünkkel, hogy megkapja a megfelelő megállapodást.