NCH612 sejtek
1 080,00 EUR*
A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 6 sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 106 sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).
Általános információk
| Leírás | Az NCH612 egy betegektől származó oligodendrocita sejtvonal, amely emberi agyszövetből származik, és az anaplasztikus oligodendroglioma (WHO III. fokozat) releváns kutatási modelljeként szolgál. Ez a sejtvonal az IDH1 R132H mutációt hordozza, amely az oligodendrogliómákhoz gyakran társuló jellegzetes genetikai elváltozás. A mutáció epigenetikai módosításokhoz vezet, beleértve a glióma CpG-sziget-metilátor fenotípust (G-CIMP), amely hozzájárul a tumor kialakulásához és progressziójához. Figyelemre méltó, hogy az NCH612 az 1p és 19q kromoszóma karok részleges delécióját mutatja, amely genetikai jellemző gyakran megtalálható az oligodendrogliomákban, és jobb prognózissal és bizonyos terápiákra való reagálással jár együtt. Vizsgálatok kimutatták, hogy az NCH612 különösen érzékeny a DNS-metiltranszferáz-gátló decitabinra (DAC). A DAC-kezelés a sejtek proliferációjának és kolóniaképződésének csökkenését eredményezi, elsősorban a TERT (telomeráz reverz transzkriptáz) downregulációja és a p21, a DNS-károsodási válaszban részt vevő ciklinfüggő kináz inhibitor felszabályozása révén. Érdekes módon úgy tűnik, hogy ez az érzékenység mind az IDH1 mutáció, mind az 1p/19q kódeléció jelenlétéhez kapcsolódik, mivel más IDH1-mutáns glióma sejtvonalak, amelyek nem rendelkeznek ezzel a delécióval, mint például az NCH1681, rezisztenciát mutatnak a DAC-kal szemben. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az epigenetikai terápiák, mint például a DAC, különösen hatékonyak lehetnek az IDH1-mutáns anaplasztikus oligodendrogliómákban, amelyekben 1p/19q kódeléció van. További molekuláris vizsgálatok azt mutatják, hogy a DAC-kezelés az NCH612 sejtekben a DNS-replikációval, a sejtciklus szabályozásával és a lizoszómális működéssel kapcsolatos útvonalak feldúsulásához vezet, ami fényt derít a gyógyszer hatásmechanizmusára. A TERT DAC általi elnyomását a p21 közvetíti, hangsúlyozva ennek az útvonalnak az epigenetikai terápiára adott válaszban betöltött kritikus szerepét. Jól meghatározott genetikai és epigenetikai profilja miatt az NCH612 értékes in vitro modellt jelent az anaplasztikus oligodendrogliómák biológiájának tanulmányozásához és az 1p/19q kódelécióval rendelkező IDH1-mutáns tumorokra irányuló célzott terápiák kifejlesztéséhez. |
|---|---|
| Szervezet | Emberi |
| Szövet | Agy |
| Betegség | Anaplasztikus oligodendroglioma, WHO III. fokozat, IDH1 mutáns (R132H) |
Jellemzők
| Kor | 39 év |
|---|---|
| Gender | Férfi |
| Etnicitás | Kaukázusi |
| Növekedési tulajdonságok | Szferoid kultúra |
Szabályozási adatok
| Idézet | NCH612 (Cytion katalógusszám: 300121) |
|---|---|
| Biológiai biztonsági szint | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_x913 |
Biomolekuláris adatok
A kezelése
| Kultúrközeg | DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám) |
|---|---|
| Kiegészítők | A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 5 mg/L heparinnal, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogramm/L EGF, 5 mg/L inzulin, 100 mg/L transzferrin, 5,2 mikrogramm/L Na-selenit, 6,3 mikrogramm/L progeszteron, 161,1 mikrogramm/L putreszcin, 50 mg/L hidrokortizon |
| Szubkultúrázás | A szferoidkultúrák szubkultiválásához kezdje a szferoidok mechanikus disszociációjával, 5-10 alkalommal történő fel-le pipettázással, 1000 μl-es szűrőhegyekkel ellátott Eppendorf pipettával. Ezt követően a sejtek pelletálásához centrifugálja az elegyet 300 g-nél 5 percig szobahőmérsékleten. Dobja el a felülúszót, és szuszpendálja újra a sejtpelletet friss táptalajban. Végül a reszuszpendált sejteket helyezze át új tenyésztőedényekbe a további szferoidképződés elősegítése érdekében. Ez a megközelítés biztosítja a szferoidok hatékony lebomlását, és felkészíti őket az új környezetben történő további növekedésre |
| Vetési sűrűség | 1 x 105 sejt/ml |
| Folyadék megújítása | 2-3 naponta friss tápfolyadékot kell hozzáadni (2-5 ml-t a sejttenyésztő lombik méretétől függően). |
| Az olvadás utáni helyreállítás | Lassú. A felolvasztás után hagyja, hogy a sejtek legalább 48 órán keresztül regenerálódjanak a fagyasztásból. |
| Fagyasztási közeg | A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében. |
| A sejtek felolvasztása és tenyésztése |
|
| Inkubációs légkör | 37°C, 5%CO2, párásított légkör. |
| Lombik bevonat | Nincs |
| Fagyasztási eljárás | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Szállítási feltételek | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Tárolási feltételek | Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt. |
Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA
| Sterilitás | A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá. |
|---|---|
| HLA allélok |
A*: '02:01:01
B*: '57:01:01, '57:01:01G
C*: '04:01:01
DRB1*: '11:01:01
DQA1*: '05:05:01
DQB1*: '03:01:01
DPB1*: '04:02:01
E: '01:03:02
|