Hep-56.1D sejtek
800,00 EUR*
A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 6 sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 106 sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).
Általános információk
| Leírás | A Hep-56.1D hepatóma sejtvonal egér májtumorból származik, kifejezetten a C57BL/6J egértörzsből. Ezt a sejtvonalat a p53 gén egy jelentős mutációja jellemzi, amelyet az in vitro szaporítás során különböző passzázsokban azonosítottak. Konkrétan a Hep-56.1D az 5. exon 132-es kodonjánál C:G-ről G:C-re történő transzverziót mutat, ami ciszteinről triptofánra történő aminosavváltozást eredményez. Ezt a mutációt a 17. passzázsszámnál észlelték, ami a mutáció által biztosított szelektív növekedési előnyre utal, ami a sejtpopulációban való túlsúlyához vezet. A Hep-56.1D sejtvonal túlnyomórészt epiteliális morfológiát mutat, ami hepatocita eredetét tükrözi. Ez összhangban van az intermedier filamentum fehérjeprofiljával, amely tartalmazza az egyszerű keratinokat K8 és K18, valamint a vimentint és a keratin K19-et különböző mértékben. E fehérjék jelenléte megerősíti a sejtvonal hepatocita jellegét és hepatóma vonalnak való besorolását. A Hep-56.1D további, DNS-ujjlenyomat-elemzéssel végzett elemzése nem mutatott ki jelentős szerkezeti rendellenességeket, bár az egyes sávok relatív intenzitásában a passzázsszám növekedésével bizonyos változásokat figyeltünk meg. Ez genomikai stabilitásra utal, bizonyos fokú változékonysággal a hosszabb tenyésztési időszakok alatt. A p53 mutációelemzés és az intermedier filament fehérje expressziós mintázatok együttesen a Hep-56.1D-t értékes modellként határozzák meg a hepatocelluláris karcinóma és a p53 mutációk májtumorigenezisben betöltött szerepének tanulmányozására. |
|---|---|
| Szervezet | Egér |
| Szövet | Máj |
| Betegség | Hepatocelluláris karcinóma |
| Szinonimák | HEP-56.1D, 56.1D, 56.1d, 56.1d |
Jellemzők
| Fajták/alfajok | C57BL/6J |
|---|---|
| Kor | Felnőtt |
| Gender | Női |
| Morfológia | Epithelszerű |
| Növekedési tulajdonságok | Adherent |
Szabályozási adatok
| Idézet | Hep-56.1D (Cytion katalógusszám 400204) |
|---|---|
| Biológiai biztonsági szint | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5769 |
Biomolekuláris adatok
| Fehérje expresszió | Keratin 8, Keratin 18, Vimentin. |
|---|---|
| Tumorogén | Igen, C57BL/6J egerekben. A harmadik héten kb. 5-6 mm átmérőjű tumorok alakulnak ki. |
| Ploidia státusz | Aneuploid |
| Mutációs profil | P53mut, C:G -+ G:C transzverzió az egér p53 5. exonjának 132-es kodonjánál, ami egy aminosavcserének felel meg, ciszteinről triptofánra. |
A kezelése
| Kultúrközeg | DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a) |
|---|---|
| Kiegészítők | A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel |
| Dissociációs reagens | Accutase |
| Megduplázási idő | 25-30 óra |
| Szubkultúrázás | Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak. |
| Vetési sűrűség | 1–2 x 104 sejt/cm2 rutin tenyésztés során |
| Folyadék megújítása | 3-4 naponta |
| Az olvadás utáni helyreállítás | a sejtek >90%-a 24-48 órán belül visszanyerte a fagyasztásból származó sejteket |
| Fagyasztási közeg | Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében. |
| A sejtek felolvasztása és tenyésztése |
|
| Inkubációs légkör | 37°C, 5%CO2, párásított légkör. |
| Lombik bevonat | Nincs |
| Fagyasztási eljárás | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Szállítási feltételek | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Tárolási feltételek | Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt. |
Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA
| Sterilitás | A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá. |
|---|
Elemzési tanúsítvány (CoA)
| Tételszám | Tanúsítvány típusa | Dátum | Katalógusszám |
|---|---|---|---|
| 400204-821 | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 400204 |
Anyagátadási megállapodás
Ha a Cytion sejtvonalakat kizárólag egyetlen kutatási helyszínen végzett belső kutatáshoz kívánja felhasználni, kérjük, töltse ki és írja alá anyagátadási megállapodásunkat (MTA), majd küldje el azt megrendelésével együtt.
Bármilyen kereskedelmi célú felhasználás esetén – ideértve, de nem kizárólagosan a díjszabásos munkát, a minőség-ellenőrzési tesztelést, a termékforgalomba hozatalt, a diagnosztikai felhasználást vagy a szabályozási tanulmányokat – kérjük, töltse ki a tervezett felhasználási űrlapot, hogy elkészíthessük a projektjéhez igazodó megfelelő megállapodást.
Megjegyzés: Az MTA csak bizonyos sejtvonalakra vonatkozik. Ha ez a megjegyzés és az MTA dokumentum megjelenik egy termékoldalon, akkor a megállapodás alkalmazandó. Az MTA hatálya alá nem tartozó sejtvonalak esetében a megállapodásra való hivatkozás nem jelenik meg. Az MTA nem érvényes az amerikai, kínai vagy tajvani ügyfelek számára. Kérjük, vegye fel a kapcsolatot amerikai képviseletünkkel, hogy megkapja a megfelelő megállapodást.