HaCaT sejtek
Alapvető tények a Hacat sejtekről
| Leírás | A HaCaT-sejtek a bőrgyógyászati kutatások kulcsfontosságú modelljei, amelyek betekintést nyújtanak a bőr biológiájának és patológiájának összetett mechanizmusaiba. A spontán immortalizált HaCaT sejtvonal felnőtt emberi epidermális sejtekből származik, és megőrzi a proliferációs és differenciálódási képességét, hasonlóan az in vivo bazális keratinocitákhoz. A HaCaT sejtek robusztus platformként szolgálnak az epidermális differenciálódási folyamat vizsgálatához és a bőr integritásának fenntartásához elengedhetetlen epidermális differenciálódási markerek tanulmányozásához. A HaCaT sejtek apoptózisra való fogékonyságát és az apoptózist kiváltó szerekkel szembeni érzékenységét széles körben tanulmányozzák, különösen az olyan citotoxikus szerekkel összefüggésben, mint a RIPL. A kutatók HaCaT sejtek segítségével értékelik e szerek citotoxicitását és a citotoxicitás mértékét, olyan technikákat alkalmazva, mint a fluoreszcens mikroszkópia a sejtek változásainak vizualizálására. A kutatók a HaCaT sejteket különböző ágensek, köztük antimikrobiális szubsztrátumok hatásának és a sejtek életképességére gyakorolt hatásuknak a vizsgálatára használták fel. Ezek a sejtek kiváló szubsztrátot jelentenek antimikrobiális bioanyagok és antimikrobiális atelokollagén szubsztrátumok tesztelésére, amelyek létfontosságúak a bőr helyreállítása és az orvosi alkalmazások szempontjából. A HaCaT epidermális vonal döntő szerepet játszik az öregedéssel és a krónikus betegségekkel kapcsolatos sejtes öregedés, citokinek és génexpressziós profilok vizsgálatában is. A HaCaT sejtek transzkripciós profiljai, beleértve a κB és a mikroRNS-ek szerepét, betekintést nyújtanak a molekuláris szintű szabályozási mechanizmusokba. A HaCaT keratinocita vonal, epidermális keratinociták jellemzőivel, jól kezelhető rendszert kínál az epidermális sejtek és az immunrendszer közötti bonyolult kölcsönhatás feltárására, különös tekintettel a keratinociták betegségekben betöltött szerepére. Lehetővé teszik az epigenetikai módosítások és a keratinociták differenciálódására gyakorolt hatásuk feltárását, beleértve a bőr barrierfunkciójában kulcsfontosságú szerepet játszó szaruképző burka kialakulását. Összefoglalva, a HaCaT sejtek nélkülözhetetlen modellnek számítanak a bőrgyógyászati kutatásokban, mivel a bazális keratinocitákhoz való hasonlóságuk és sejtnövekedési és differenciálódási képességük révén elősegítik a bőr biológiájának és patológiájának mélyebb megértését. Alkalmazásuk kiterjed az epidermális differenciálódás és az antimikrobiális hatások tanulmányozásától az olyan sejtválaszok feltárásáig, mint az apoptózis, így a sejtbiológia és az orvosbiológiai kutatások sarokkövévé váltak. |
|---|---|
| Szervezet | Emberi |
| Szövet | Bőr |
Részletek
| Kor | 62 év |
|---|---|
| Gender | Férfi |
| Etnicitás | Kaukázusi |
| Sejttípus | 20-25 mikrométer átmérőjű keratinociták. |
| Növekedési tulajdonságok | Adherent |
Dokumentáció
| Idézet | HaCaT (Cytion katalógusszám: 300493) |
|---|---|
| Biológiai biztonsági szint | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0038 |
A HaCaT keratinocita sejtvonal genetikája
| Tumorogén | Nem |
|---|---|
| Karyotípus | Aneuploid (hipotetraploid) |
A Hacat sejtvonal kezelése
| Kultúrközeg | DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a) |
|---|---|
| Kiegészítők | A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel |
| Dissociációs reagens | Az EDTA (állomány: 0,05%) és a tripszin (állomány: 0,1%) 1:1 arányú keverékét minden alkalommal a sejtek leválasztása előtt kell elkészíteni a Ca2+ és Mg2+ nélküli PBS segítségével, hogy fiziológiás ozmolaritást biztosítsunk. A tripszin/EDTA kész keverékei nem ajánlottak, mivel ez a sejtek csomósodását eredményezheti. Alternatívaként a trypsin/EDTA helyett TrypLE Express (Life Technologies) használható. A gyártó protokollját kell követni. |
| Megduplázási idő | A HaCaT sejtek megduplázódási ideje 28 óra. |
| Szubkultúrázás |
|
| Megosztási arány | A ratio of 1:5 to 1:10 is recommended |
| Vetési sűrűség | 1 x 104 sejt/cm2 |
| Folyadék megújítása | hetente 2 alkalommal |
| Fagyasztási közeg | Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében. |
| A sejtek felolvasztása és tenyésztése |
|
| Inkubációs légkör | 37°C, 5%CO2, párásított légkör. |
| Lombik bevonat | A felolvasztás utáni optimális kötődés és életképesség érdekében kollagénnel bevont lombikok vagy lemezek használatát javasoljuk. |
| Fagyasztási eljárás | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Szállítási feltételek | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Tárolási feltételek | Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt. |
Minőségbiztosítás
| Sterilitás | A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá. |
|---|---|
| STR profil |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 09. Mrz
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
Penta E: 7,12
Penta D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| HLA allélok |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: '03:04:01, '15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: '01:03:01, '01:03:02
|
Elemzési tanúsítvány (CoA)
| Tételszám | Tanúsítvány típusa | Dátum | Katalógusszám |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | Elemzési bizonyítvány | 23. May. 2025 | 300493 |