HROG06 T0 M2 sejtek

800,00 EUR*

A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 ⁶ sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 10⁶ sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).

Árak adók és szállítási költségek nélkül

cryovial

Termékszám: 300883

Biztonsági adatlap

Terméklap

Harmadik fél megállapodás

Leírás	A HROG06 T0 M2 egy elsődleges humán glioblastoma multiforme (GBM) sejtvonal, amelyet egy WHO IV. fokozatú glioblastomával diagnosztizált felnőtt beteg frissen eltávolított tumoros szövetéből hoztak létre. A „T0” jelölés azt jelzi, hogy a tumor mintát az első műtéti beavatkozás során vették, míg az „M2” jelölés ugyanazon elsődleges tumorból származó, függetlenül létrehozott második in vitro modellre utal. A sejtvonalat a HROG (Hansestadt Rostock Glioma) platformon belül fejlesztették ki, amelynek célja olyan, rendkívül alacsony passzálási számú glióma kultúrák létrehozása, amelyek megőrzik az eredeti beteg tumorának biológiai és molekuláris jellemzőit. A HROG06 T0 M2 standardizált tenyésztési körülmények között adhezív módon növekszik, és az elsődleges GBM-tenyészetekre jellemző orsó alakú, fibroblaszt-szerű morfológiát mutat. A HROG-sorozat immunfenotípus-elemzései olyan neurális és glia-vonalbeli markerek expresszióját mutatják, mint a glia fibrilláris savas fehérje (GFAP), a nestin és a vimentin, ami alátámasztja az asztrocitás tumor eredetét. A HROG platformon belüli molekuláris jellemzés magában foglalja a klinikailag releváns biomarkerek, például az MGMT promóter metilációs státusza, az EGFR amplifikációja és a TP53, IDH1/2, KRAS és BRAF gének mutációs profiljának értékelését, megerősítve a tumorral kapcsolatos genomikus változások megőrződését a korai passzázsú tenyészetekben. A HROG06 T0 M2-t a standard glioblastoma-kezelésekre adott terápiás válaszok in vitro értékelésére használták, beleértve az alkilező kemoterápiás szereket és a célzott inhibitorokat. A HROG gyűjteményen belüli összehasonlító elemzések stabil morfológiát, reprodukálható növekedési kinetikát és konzisztens gyógyszerérzékenységi profilokat mutatnak a korai passzázsokban, alátámasztva alkalmasságát transzlációs kutatási modellként. Betegektől származó, alacsony passzázsú GBM sejtvonalaként a HROG06 T0 M2 klinikailag releváns platformot biztosít a glioblastoma biológiájának, a tumor heterogenitásának és a kezelésrezisztencia mechanizmusainak tanulmányozásához.
Szervezet	Emberi
Szövet	Agy
Betegség	Glioblastoma

Etnicitás	Kaukázusi
Növekedési tulajdonságok	Adherent

Idézet	HROG06 T0 M2 (Cytion katalógusszám: 300883)
Biológiai biztonsági szint	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_B7FP

Kultúrközeg	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Kiegészítők	A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Dissociációs reagens	Accutase
Szubkultúrázás	Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Fagyasztási közeg	A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
A sejtek felolvasztása és tenyésztése	Ellenőrizze, hogy az injekciós üveg a szállításkor mélyhűtött marad-e, mivel a sejteket szárazjégen szállítják, hogy a szállítás során az optimális hőmérsékletet fenntartsák. Átvételt követően vagy azonnal tárolja a krioampullát -150 °C alatti hőmérsékleten a sejtek integritásának megőrzése érdekében, vagy folytassa a 3. lépéssel, ha azonnali tenyésztésre van szükség. Azonnali tenyésztés esetén gyorsan fel kell olvasztani az injekciós üveget úgy, hogy tiszta vízzel és antimikrobiális szerrel ellátott 37 °C-os vízfürdőbe merítjük, és 40-60 másodpercig óvatosan kevergetjük, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Az összes további lépést steril körülmények között, áramlásos elszívóban végezzük el, és nyitás előtt fertőtlenítsük a kriofülkét 70%-os etanollal. Óvatosan nyissa fel a fertőtlenített fiolát, és a sejtszuszpenziót óvatosan összekeverve helyezze át egy 15 ml-es centrifugacsőbe, amely 8 ml szobahőmérsékletű táptalajt tartalmaz. Centrifugáljuk az elegyet 300 x g-n 3 percig a sejtek szétválasztásához, és óvatosan dobjuk el a maradék fagyasztóközeget tartalmazó felülúszót. Óvatosan szuszpendáljuk újra a sejtpelletet 10 ml friss táptalajban. Adhezív sejtek esetében ossza a szuszpenziót két T25-ös tenyésztőlombik között; szuszpenziós kultúrák esetében az összes tápfolyadékot tegye át egy T25-ös lombikba a hatékony sejtkölcsönhatás és növekedés elősegítése érdekében. A sejtvonal folyamatos növekedése és fenntartása érdekében tartsa be a megállapított szubkultúra protokollokat, biztosítva a megbízható kísérleti eredményeket.
Inkubációs légkör	37°C, 5%_CO2, párásított légkör.
Lombik bevonat	Nincs
Fagyasztási eljárás	A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
Szállítási feltételek	A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
Tárolási feltételek	Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Sterilitás	A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Felhívjuk figyelmét, hogy ez a sejtvonal nem érhető el a Cytion MTA szabványos keretein belül, mivel harmadik féllel kötött megállapodás szükséges hozzá és/vagy az eredeti licencadóval való tárgyalások tárgyát képezi.

HROG06 T0 M2 sejtek

Általános információk

Jellemzők

Szabályozási adatok

Biomolekuláris adatok

A kezelése

Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA

Harmadik fél megállapodás