BT-474 sejtek

A Cytion's Freeze Medium CM-1 a legkorszerűbb kriokonzerváló közeg, amelyet úgy terveztek, hogy a sejtek életképessége és funkcionalitása a felolvasztás után a legmagasabb szinten legyen biztosítva. Ez a sokoldalú médium a sejttípusok széles spektrumához alkalmas, beleértve az emberi és állati sejteket is, így nélkülözhetetlen eszköz a különféle kutatási alkalmazásokhoz. A krioprotektánsok és alapvető tápanyagok aprólékosan kiegyensúlyozott kombinációjával összeállított Freeze Medium CM-1 minimalizálja a jégkristályok képződését és a sejtek stresszét a fagyasztási folyamat során, így megőrizve a sejtek integritását.
A Freeze Medium CM-1 fő jellemzői a következők:

Széles körű kompatibilitás: Hatékony a sejttípusok széles skálájához, beleértve a primer sejteket, őssejteket és a létrehozott sejtvonalakat.
Magas életképesség: Optimalizált a felolvasztás utáni sejtregeneráció és életképesség maximalizálására, biztosítva a megbízható kísérleti eredményeket.
Felhasználásra kész: Kényelmesen előkészítve és sterilizálva az azonnali alkalmazáshoz, csökkentve az előkészítési időt és a szennyeződés kockázatát.
Fokozott stabilitás: Fenntartja a konzisztens teljesítményt standard kriokonzerválási körülmények között, biztosítva a reprodukálható eredményeket.
Hosszú eltarthatósági idő: A CM-1 egy szérumtartalmú, azonnal felhasználható kriokonzerváló közeg, amely hűtőszekrényben akár egy évig is tárolható.


A CM-1 használata sejtek fagyasztásához

A CM-1 adherens és szuszpenziós sejtek fagyasztására való használatához kövesse az alábbi lépéseket

Adhéziós sejtek esetében mossa meg és válassza le őket a tenyésztési szubsztrátról. Szuszpenziós sejtek esetében közvetlenül a következő lépéssel folytassa.
Számolja meg a sejteket, hogy biztosítsa a megfelelő koncentrációt.
Centrifugáljuk a sejteket a pelletáláshoz, majd szuszpendáljuk újra CM-1 fagyasztási tápfolyadékban.
A reszuszpendált sejteket helyezze át a kriovialis üvegekbe.
Használjon lassú fagyasztási módszert, mielőtt a sejteket hosszú távú tárolásra szállítja





Módszer
Leírás
Lépések





❄️
Kézi fagyasztás

Lépésről lépésre történő módszer, amely a sejtek életképességének biztosítása érdekében a hőmérséklet fokozatos csökkentésével jár

1️⃣ A sejteket fagyasztóközegben 40 percre 4 °C-os fagyasztóba helyezzük.
2️⃣ Tegyük át -80°C-os fagyasztóba 24 órára.
3️⃣ A sejteket folyékony nitrogénben tároljuk a hosszú távú megőrzés érdekében



❄️
Mr. Frosty használata

Kényelmes eszköz, amely lehetővé teszi a szabályozott fagyasztási sebességet elektromos áram nélkül

1️⃣ Készítse elő a sejteket fagyasztóközeggel ellátott kriovialokban.
2️⃣ Helyezze a krioüvegeket a Mr. Frosty tartályba.
3️⃣ Tárolja -80°C-on 24 órán keresztül, mielőtt átrakja folyékony nitrogénbe



❄️
Szabályozott sebességű fagyasztó

A Thermo Fisher vagy más gyártók nagy pontosságú fagyasztója, amelyet szabályozott hőmérsékletcsökkentésre terveztek

1️⃣ Programozza a készüléket a hőmérséklet fokozatos csökkentésére.
2️⃣ Helyezze az előkészített sejteket a fagyasztóba.
3️⃣ A fagyasztási ciklus után helyezze át a sejteket folyékony nitrogénbe









Tárolja a kriovialisokat -130°C alatti hőmérsékleten vagy folyékony nitrogénben a hosszú távú megőrzés érdekében.


Összetevők

FBS-t, DMSO-t, glükózt, sókat tartalmaz
Pufferkapacitás: pH = 7,2 és 7,6 között


A Cytion's Freeze Medium CM-1 megbízható megoldást kínál a kriokonzerváláshoz, biztosítva a sejtek magas életképességét és funkcionalitását a kiolvasztás után a kutatási alkalmazások széles skálájához.

A DMEM:Ham’s F12 egy széles körben elismert és széles körben használt alapközeg a biológiai kutatásokhoz szükséges sejtkultúrákban. Különösen magzati borjú szérummal (FBS) kiegészítve alapvető tápanyagforrást jelent különböző emlős sejtvonalak szaporodásához.

Ez az egyedülálló készítmény a Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) és a Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) tápközeget pontos 1:1 arányban ötvözi. Az L-glutamin hozzáadása tovább javítja összetételét.

Az Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM) alapú DMEM elődjéhez képest megnövelt koncentrációban tartalmaz aminosavakat és vitaminokat. Ezzel szemben a Ham's F-12 a Ham's F-10 táptalajon alapul, és kiegészítő esszenciális komponenseket biztosít.

Az optimális sejtnövekedés támogatása érdekében általános gyakorlat a DMEM:Ham's F12 kiegészítése FBS-sel, jellemzően 5–10%-os koncentrációban. Ez a kiegészítés szükséges, mivel a táptalajból hiányoznak a sejtek fejlődéséhez elengedhetetlen növekedési hormonok, lipidek és fehérjék.

A DMEM:Ham's F12 pH-puffer rendszert tartalmaz, és gyakran kiegészítik fenolvörössel, egy pH-indikátorral. A DMEM:Ham's F12-ben, vagy bármelyik bikarbonát-puffer rendszert alkalmazó táptalajban tenyésztett sejteknek 5–10%-os szabályozott CO2-környezetre van szükségük a megfelelő pH-szint fenntartásához. 


Minőség-ellenőrzés

Steril szűrt


Tárolás és eltarthatóság

+2 °C és +8 °C között, fénytől védve tárolandó.
A csomag felbontása után 4 °C-on tárolandó, és 6–8 héten belül fel kell használni.


Szállítási feltételek

Környezeti hőmérséklet


Tárolás

Sötét helyen, +2 °C és +8 °C között hűtőszekrényben tárolandó. Kerülje a fagyást és a gyakori +37 °C-ra történő felmelegítést, mivel ez rontja a termék minőségét.
Ne melegítse a táptalajt 37 °C fölé, és ne használjon ellenőrizhetetlen hőforrásokat, például mikrohullámú sütőt.
Ha a táptalaj csak egy részét használja fel, vegye ki a szükséges mennyiséget, és használat előtt melegítse szobahőmérsékletre.


Összetétel



Kategória
Összetevők
Koncentráció (mg/l)


Aminosavak
Glicin
18,75


L-alanin
4,45


L-arginin-HCl
147,50


L-aszparagin-H₂O
7,50


L-aszparaginsav
6,65


L-cisztein-HCl-H₂O
17,56


L-cisztin-2-HCl
31,29


L-glutaminsav
7,35


L-glutamin
365,00


L-hisztidin-HCl-H₂O
31,48


L-izoleucin
54,47


L-leucin
59,05


L-lizin-HCl
91,25


L-metionin
17,24


L-fenilalanin
35,48


L-prolin
17,25


L-szerin
26,25


L-treonin
53,45


L-triptofán
9,02


L-tirozin 2 Na 2 H2O
55,79


L-valin
52,85


Vitaminok
D-biotin
0,0035


Kolin-klorid
8,98


D-kalcium-pantotenát
2,24


Folsav
2,66


mio-inozitol
12,60


Nikotinamid
2,02


Piridoxin-HCl
0,031


Piridoxál-HCl
2,00


Riboflavin
0,219


Tiamin-HCl
2,17


B12-vitamin
0,68



Szervetlen sók
CaCl2 2 H2O
154,50


CuSO4 5 H2O
0,0013


Fe(NO3)3 9 H2O
0,05


FeSO4 7 H2O
0,417


KCl
311,80


MgCl2 6 H2O
61,20


MgSO4 7 H2O
100,00


NaCl
6996,00


NaHCO3
1200,00


Na2HPO4
71,02


NaH2PO4 2 H2O
70,87


ZnSO4 7 H2O
0,432



Egyéb összetevők
D-glükóz
3151,00


Hipoxantin
2,40


HEPES
3574,50


Linolsav
0,042


Liponsav
0,105


Fenolvörös nátriumsó
8,63


Putrescin-2-HCl
0,081


Nátrium-piruvát
55,00


Timidin
0,365

Accutase sejtleválasztó oldat EDTA-val és fenolvörössel – 100 ml

Az Accutase egy használatra kész, steril szűrt sejtleválasztó oldat, amelyet a tripszin/EDTA kíméletes alternatívájaként fejlesztettek ki a tapadó emlős sejtek standard szövetkultúra-műanyag edényekről és tapadásgátló bevonattal ellátott felületekről történő leválasztására. Proteolitikus és kollagenolitikus enzimaktivitást ötvöz egy kiegyensúlyozott sóoldatban, hogy hatékony, ugyanakkor kontrollált leválasztást biztosítson, megőrizve a sejtfelszíni fehérjéket, és támogatva a magas posztpasszázs-életképességet és a gyors újratapadást.

Az Accutase összetétele Dulbecco foszfátpufferolt sóoldatán (DPBS) alapul, EDTA-val és fenolvörössel, mint vizuális pH-indikátorral. Az enzimek nem emlős és nem bakteriális eredetűek, ezért az Accutase különösen alkalmas őssejtkutatásra, vakcina-előállítási folyamatokra és minden olyan alkalmazásra, ahol az állati vagy mikrobiális eredetű szennyeződéseket minimálisra kell csökkenteni. Az oldat 37 °C-on öninhibálódik, ezért a leválasztás után nincs szükség semlegesítő reagensre vagy szérumtartalmú táptalajra – a sejteket közvetlenül friss táptalajba lehet átvinni.

Főbb jellemzők

Használatra kész, 1x-es, steril szűrt folyadék – hígításra vagy rekonstitúcióra nincs szükség
Kombinált proteolitikus és kollagenolitikus enzimaktivitás a kíméletes disszociáció érdekében
Minden tétel standardizált, meghatározott diszociációs aktivitással a tételek közötti konzisztencia érdekében
Nem emlős és nem bakteriális enzim eredetű
37 °C-on öninhibálódik – nincs szükség semlegesítő oldatra
Dulbecco PBS-ben EDTA-val készítve
Fenolvörös vizuális pH-indikátorként
pH 6,8 – 7,8


Jellemző alkalmazások
Az Accutase kíméletesen disszociálja a legkülönbözőbb adhezív és érzékeny sejttípusokat, beleértve az emberi embrionális őssejteket (hESCs), az emberi indukált pluripotens őssejteket (iPSCs), az idegsejteket, az elsődleges idegsejteket, valamint a rutinszerűen tenyésztett adhezív sejtvonalakat, mint például a HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 és A549. Tipikus felhasználási területek:

Adhéziós emlős sejtek rutinszerű szubkultiválása és átültetése
hESC-k, iPSC-k és más érzékeny vonalak kíméletes egysejtes disszociációja
Minták előkészítése áramlási citometriához és FACS-elemzéshez
Olyan sejtfelszíni markerek elemzése, ahol az epitóp integritása fontos
Sejtvándorlás, proliferáció és apoptózis vizsgálatok
Nyugalmi állapot vizsgálata szérumhiány és onkogén transzfekciós vizsgálatok segítségével
Tumorsejtek és idegcsíra-sejtek migrációs vizsgálatai
Termelés felfuttatása bioreaktoros munkafolyamatokban

Rutin munkákhoz körülbelül 10 ml Accutase-t alkalmazzon 75 cm2 tenyésztési felületre, és inkubálja 5–10 percig szobahőmérsékleten. Az optimális inkubációs időt minden sejtvonal esetében meg kell határozni, és az nem haladhatja meg az egy órát. Az adagolás előtt öblítse le a sejtréteget Ca2+/Mg2+-mentes sóoldattal, például kalcium
- és magnéziummentes DPBS-sel, hogy eltávolítsa a maradék szérumot és a kétértékű kationokat.

Kezelés és tárolás
A bontatlan palackot -15 °C-on vagy annál alacsonyabb hőmérsékleten fagyassza le. Szobahőmérsékleten vagy egy éjszakán át +2 °C és +8 °C között olvassza fel. Ne olvassza fel az Accutase-t 37 °C-os vízfürdőben, mivel a magas hőmérséklet csökkenti az enzimaktivitást. Felolvasztás után az oldat +2 °C és +8 °C között legfeljebb 2 hónapig tárolható; ne tárolja szobahőmérsékleten. Az alkalmazás előtt ne melegítse elő a reagenset 37 °C-ra – adja hozzá közvetlenül a mosott sejtekhez szobahőmérsékleten. A hosszú távú tárolhatóság érdekében az ismételt felolvasztási ciklusok elkerülése érdekében egyszer használatos adagolás ajánlott. Mindig aszeptikus körülmények között dolgozzon.

Minőség
Szigorú minőségi előírások szerint gyártva. Az Accutase minden tételét szteril szűrőn szűrik, és szterilitás, pH, megjelenés és disszociációs aktivitás szempontjából tesztelik, hogy tételenkénti konzisztens, reprodukálható teljesítményt biztosítsanak.

Termékjellemzők



Specifikáció
Részlet



TerméktípusSejtleválasztó / disszociációs reagens
FormátumSteril szűrt folyadék, használatra kész
Térfogat100 ml
Munkakoncentráció1x (használatra kész)
EnzimaktivitásKombinált proteolitikus és kollagenolitikus
Enzim eredeteNem emlős és nem bakteriális
Puffer rendszerDulbecco PBS EDTA-val
pH-indikátorFenolvörös
pH-tartomány6,8 – 7,8
KinézetTiszta, halványvörös vagy narancssárga oldat
Tárolási hőmérséklet-15 °C vagy annál alacsonyabb
Stabilitás felolvasztás utánLegfeljebb 2 hónap +2 °C és +8 °C között
Ajánlott felhasználási mennyiség~10 ml 75 cm2 tenyésztési felületre
Jellemző inkubációs idő5–10 perc szobahőmérsékleten
Szállítási feltételekSzárazjégen fagyasztva
RendeltetésKizárólag kutatási célra és további gyártásra



Összetétel (literenkénti összetétel)



Összetevő
Koncentráció (mg/l)




Szervetlen sók

Nátrium-klorid (NaCl)8000,00
Dinátrium-hidrogén-foszfát (Na2HPO4)1150,00
Kálium-klorid (KCl)200,00
Kálium-dihidrogén-foszfát (KH2PO4)200,00

Egyéb összetevők

EDTA · 4Na (tetranátrium-EDTA)220,00
Fenolvörös3,00
Saját fejlesztésű enzimkeverék (proteolitikus és kollagenolitikus hatással)1x



Az Accutase az Innovative Cell Technologies, Inc. bejegyzett védjegye.

Termék áttekintés
Térfogat: 100 ml Tárolás: ≤-15°C Sterilitás: Steril szűrt
Az Antibiotikum/Antimikotikum oldat (100x) egy steril, felhasználásra kész koncentrátum, amelyet úgy terveztek, hogy csökkentse a mikrobiális szennyeződés kockázatát a sejtkultúrában és a kapcsolódó laboratóriumi alkalmazásokban. Ez a 100x oldat a penicillin, a streptomicin és az amfotericin B jól bevált kombinációját tartalmazza, amely széles spektrumú antimikrobiális aktivitást biztosít Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok, élesztők és fonalas gombák ellen. A készítmény alkalmas eukarióta sejttenyészetekben, bakteriális táptalajokon és más, szennyeződésre érzékeny rendszerekben történő felhasználásra, támogatva a tiszta és következetes laboratóriumi műveleteket.
Alkalmazás és előnyök A rutin kutatási protokollokhoz optimalizált oldatot széles körben használják a sejtkultúra munkafolyamatok aszeptikus körülményeinek fenntartására. Megbízható teljesítményt nyújt a szennyeződésre érzékeny környezetekben, segítve a kutatókat a mikrobák elszaporodásának kockázatának csökkentésében anélkül, hogy veszélyeztetné a sejtek egészségét vagy a kísérleti reprodukálhatóságot. A sterilszűrt formuláció kiküszöböli a további szolubilizációs lépések szükségességét, támogatva a racionalizált médiumkészítést és csökkentve a napi laboratóriumi eljárások variabilitását.
Használat és kompatibilitás A standard munkakoncentrációk eléréséhez hígítsa az oldatot 1:100 arányban a teljes táptalajhoz. A termék kompatibilis az emlős sejtvonalak és alapközegek széles skálájával. A folyamatos készletelérhetőségnek köszönhetően a kutatók számára előnyös a megbízható ellátás folyamatossága és az egyszerűsített logisztikai tervezés. Az oldatot ≤ -15 °C-on kell tárolni, és a stabilitás megőrzése érdekében védeni kell az ismételt fagyasztási-olvasztási ciklusoktól. Kizárólag kutatási célú felhasználásra. Nem használható diagnosztikai vagy terápiás eljárásokban. Nem használható embereken vagy állatokon.

Foszfát-pufferelt sóoldat (PBS) oldat
A foszfátpufferelt sóoldat (PBS) a biológiai és kémiai kutatásokban széles körben használt pufferoldat. Fontos szerepet játszik a pH-egyensúly és az ozmolaritás fenntartásában a különböző kísérleti eljárások során, beleértve a szövetfeldolgozást és a sejttenyésztést. PBS-oldatunkat nagy gondossággal, nagy tisztaságú összetevőkkel állítjuk össze, hogy minden kísérletben biztosítsuk a stabilitást és a megbízhatóságot. PBS-ünk ozmolaritása és ionkoncentrációja szorosan utánozza az emberi szervezetben uralkodó értékeket, így izotóniás és a legtöbb sejtre nem mérgező.

PBS-oldatunk összetétele
A PBS oldatunk ultratisztaságú foszfátpufferek és sóoldatok pH-értékre beállított keveréke. Az 1X munkakoncentrációban a következőket tartalmazza:

8000 mg/l nátrium-klorid (NaCl)
200 mg/l kálium-klorid (KCl)
1150 mg/L nátrium-foszfát kétbázisú vízmentes (Na2HPO4)
200 mg/L Kálium-foszfát monobázikus vízmentes (KH2PO4)

Ez az összetétel optimális pH
- és ionegyensúlyt biztosít, amely a biológiai alkalmazások széles köréhez alkalmas.

A PBS-oldatunk alkalmazásai
PBS-oldatunk ideális a biológiai kutatások különböző alkalmazásaihoz. Izotóniás és nem toxikus tulajdonságai alkalmassá teszik az anyagok hígítására és a sejttartályok öblítésére. Az EDTA-t tartalmazó PBS-oldatok hatékonyan oldják a megtapadt és csomósodott sejteket. Kétértékű fémeket, például cinket azonban nem szabad a PBS-hez adni, mivel ez csapadékképződést okozhat. Ilyen esetekben a Good pufferek használata ajánlott. Ezenkívül a PBS-oldatunk elfogadható alternatívája a vírusszállító közegnek az RNS-vírusok, köztük a SARS-CoV-2 szállítására és tárolására.

Minőségellenőrzés

Steril szűrt


Tárolás és eltarthatósági idő

Tárolja +2°C és +25°C között, fénytől védve.
Felbontás után 2°C és 25°C között tárolja, és 24 hónapon belül használja fel.


Szállítási feltételek

Környezeti hőmérséklet


Karbantartás

Hűtve, +2°C és +8°C között, sötétben tárolja. Kerülje a fagyasztást és a gyakori melegítést +37°C-ra, mivel ez csökkenti a termék minőségét.
Ne melegítse a közeget 37°C fölé, és ne használjon ellenőrizetlen hőforrásokat, például mikrohullámú készülékeket.
Ha a táptalajnak csak egy részét kívánja felhasználni, vegye ki a szükséges mennyiséget, és felhasználás előtt melegítse fel szobahőmérsékletűre.

Összetétel



Kategória
Összetevők
Koncentráció (mg/l)


Sók
Kálium-klorid
200



Kálium-foszfát monobázikus vízmentes
200



Nátrium-klorid
8000



Nátrium-foszfát kétbázisú, vízmentes
1150