B-LCL-HROC60 sejtek
800,00 EUR*
A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 6 sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 106 sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).
Általános információk
| Leírás | A B-LCL-HROC60 egy Epstein-Barr vírus (EBV) által immortálisított humán B-limfoblasztos sejtvonal, amelyet HROC60 nevű primer kolorektális karcinómából izolált tumor-infiltráló B-sejtekből (TiBc) hoztak létre. Az anyasejt tumor egy felnőtt férfi betegtől származik, aki jobb oldali kolorektális karcinómában szenvedett, CpG-sziget metilátor fenotípus-magas (CIMP-H) molekuláris altípussal. A friss tumor szövetet mechanikusan szétválasztották, hogy egysejtes szuszpenziót kapjanak, és a B sejteket szelektíven immortálisították in vitro EBV-t tartalmazó felülúszóval, amelyet a B95/8 marmoset sejtvonalból nyertek ki, ciklosporin A jelenlétében, hogy elnyomják a T- és NK-sejtek növekedését. A hosszú távú expanzió monoklonális B-sejt kultúrát eredményezett, amit standardizált klonalitási vizsgálatokkal végzett immunglobulin nehéz- és könnyű lánc génátrendeződés elemzéssel is megerősítettek. A B-LCL-HROC60 immunoglobulin M-et (IgM) szekretál domináns izotípusként, amelynek termelése a hosszabb tenyésztés során stabil marad. A kolorektális karcinómából generált, tumorba infiltráló B-sejtvonalak szélesebb sorozatában az immunoglobulin szekréciója klónonként egyetlen fő izotípusra korlátozódott, és exogén EBV hiányában nem történt spontán növekedés, kizárva a látens in vivo EBV-vezérelt transzformációt. A CIMP-H kolorektális karcinómából származó, monoklonális, antigénnel tapasztalt TiBc-származékos vonalként a B-LCL-HROC60 releváns in vitro modellt biztosít a kolorektális tumor mikrokörnyezetben zajló humorális immunválaszok vizsgálatához és a tumorba beszivárgó B-sejtekből származó antitestek funkcionális tulajdonságainak jellemzéséhez. |
|---|---|
| Szervezet | Emberi |
| Szövet | Perifériás vér |
| Betegség | Karcinóma |
| Szinonimák | Bc HROC60, TiBcHROC60 |
Jellemzők
| Kor | 71 év |
|---|---|
| Gender | Férfi |
| Etnicitás | Kaukázusi |
| Morfológia | Kerek cellák |
| Sejttípus | B lymphoblast |
| Növekedési tulajdonságok | Felfüggesztés |
Szabályozási adatok
| Idézet | B-LCL-HROC60 (Cytion katalógusszám: 302004) |
|---|---|
| Biológiai biztonsági szint | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A7UT |
Biomolekuláris adatok
| Felszíni antigének | CD19 |
|---|---|
| Vírusok | Transzformáns: EBV |
A kezelése
| Kultúrközeg | RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám) |
|---|---|
| Kiegészítők | A táptalajt 10% hővel inaktivált FBS-szel egészítsük ki |
| Szubkultúrázás | A lombikban lévő sejtszuszpenziót óvatosan homogenizálja fel-le pipettázással, majd vegyen egy reprezentatív mintát a sejtsűrűség ml-enkénti meghatározásához. A szuszpenziót hígítsa friss tenyésztőközeggel 1 x 105 sejt/ml sejtkoncentráció eléréséig, majd az így beállított szuszpenziót új lombikokba osztva továbbtenyésztse. |
| Fagyasztási közeg | Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében. |
| A sejtek felolvasztása és tenyésztése |
|
| Inkubációs légkör | 37°C, 5%CO2, párásított légkör. |
| Lombik bevonat | Nincs |
| Fagyasztási eljárás | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Szállítási feltételek | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Tárolási feltételek | Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt. |
Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA
| Sterilitás | A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá. |
|---|---|
| HLA allélok |
A*: '02:01:01, '11:01:01
B*: '44:02:01, '55:01:01
C*: '03:03:01, '05:01:01
DRB1*: '01:01:01, '13:01:01
DQA1*: '01:01:01, '01:03:01
DQB1*: '05:01:01, '06:03:01
DPB1*: '04:01:01
E: '01:01:01
|