קו תאים Neuro-2a
Neuro-2a הוא קו תאים עצביים המופעל על ידי עכברים, הנמצא בשימוש נרחב במחקר בתחום מדעי המוח. תאים אלה משמשים בעיקר לחקר התפתחות עצבית, הבחנה, נוירוטוקסיות, מסלולי איתות תאיים וצמיחת אקסונים. בנוסף, הם משמשים לפיתוח תרופות ולמטרות סינון.
מאמר זה מתמקד בהיבטים חשובים של תאי נוירובלסטומה Neuro-2a שיכולים לעזור לכם לפני שתתחילו לעבוד איתם. הוא יכסה בעיקר:
- מאפיינים כלליים ומקור תאי Neuro-2a
- מידע על גידול קו תאים Neuro-2a
- יתרונות וחסרונות של קו תאי Neuro-2a
- יישומים מחקריים של קו תאי Neuro-2a
- פרסומים מחקריים העוסקים בתאי Neuro-2a
- משאבים לתאי Neuro-2a: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
1. מאפיינים כלליים ומקור תאי Neuro-2a
חלק זה של המאמר יסקור את הרקע ואת המאפיינים הבסיסיים של קו התאים Neuro-2a, שחשוב להכיר לפני שמתחילים לעבוד איתו. כאן תלמדו: מהו קו התאים Neuro-2a? מהו מקורו של קו התאים Neuro-2a? מהי הבחנה של תאי Neuro-2a? מהו גודלו של תא Neuro-2a? מהי המורפולוגיה של תאי Neuro-2a?
- תאי Neuro-2a מקורם בגידול ספונטני (נוירובלסטומה) של עכבר לבקן (זן A). קו התאים הוקם על ידי R.J. Klebe ו-F.H. Ruddle.
- תאי הנוירובלסטומה Neuro-2a מציגים מורפולוגיה של תאי גזע עצביים ואמבוציים.
- גודל תאי Neuro-2a הוא 12 מיקרומטר בגובה [1].
- מספר הכרומוזומים בתאי Neuro-2a עשוי לנוע בין 59 ל-193, עם מספר מודאלי של 95. הקריוטיפ של תאי נוירובלסטומה אלה אינו יציב, ונע בין 94 ל-98 כרומוזומים.
2. מידע על גידול תאי Neuro-2a
תאי Neuro-2a נמצאים בשימוש נרחב במעבדות מחקר בתחום מדעי המוח. לפני שתתחילו לעבוד עם תאים אלה, עליכם ללמוד את המידע החיוני על תרבית תאים המפורט להלן. מידע זה עשוי לעזור לכם להקל על העבודה. תוכלו ללמוד: מהו Neuro-2a תרבית תאים? כיצד מגדלים תאי Neuro-2a? מהו זמן הכפלה של תאי Neuro-2a? מהו צפיפות הזריעה של Neuro-2a ? מהו פרוטוקול תרבית תאי Neuro-2a? מהו מצע תאי Neuro-2a?
נקודות מרכזיות לגידול תאי Neuro-2a
|
זמן הכפלה: |
זמן הכפלת תאי Neuro-2a הוא כ-70 שעות. |
|
דבקים או בתמיסה: |
Neuro-2a הוא קו תאים דבקים. |
|
צפיפות זריעה: |
צפיפות הזריעה האופטימלית עבור קו התאים Neuro-2a היא 1 x104תאים/סמ"ר. לצורך הזריעה, התאים נשטפים במלח פוספט ללא מגנזיום וסידן (1x). לאחר מכן, מתווסף תמיסת מעבר (Accutase) והתאים מושרים במשך 8 עד 10 דקות בטמפרטורת הסביבה. לאחר פירוק התאים, מתווסף מדיום טרי והתאים נצנטריפוגים. משקע התאים שנקצר מושהה בזהירות, והתאים מוזגים לכלי תרבית לצורך גידול. |
|
מדיום גידול: |
EMEM משמש לגידול תאי Neuro-2a. הוא מכיל 10% FBS, 2 mM L-Glutamine, 1.5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM Sodium pyruvate ו-NEAA לגידול תאים אידיאלי. יש להחליף את התקשורת 1-2 פעמים בשבוע. |
|
תנאי גידול: |
תרבויות Neuro-2a נשמרות באינקובטור לחות בטמפרטורה של 37°C המחובר לאספקת CO2 של 5%. |
|
אחסון: |
יש לאחסן את התאים בטמפרטורה נמוכה מ-150°C במקפיא חשמלי בטמפרטורה נמוכה במיוחד או בשלב האדים של חנקן נוזלי לטווח ארוך. |
|
תהליך הקפאה ומדיום: |
מדיום CM-1 או CM-ACF משמשים להקפאת תאי Neuro-2a. התאים מוקפאים בתהליך הקפאה איטי המאפשר ירידה של 1°C בלבד בדקה. תהליך זה מגן על התאים מפני הלם ושומר על חיוניותם. |
|
תהליך ההפשרה: |
כדי להפשיר תרבויות קפואות, מבקבוקון מונח באמבט מים בטמפרטורה של 37 °C למשך 40 עד 60 שניות, עד שנותר רק גוש קרח קטן. לאחר מכן, מוסיפים את המדיום התרבותי, והתאים עוברים צנטריפוגה. שלב זה מסייע להסרת מרכיבי המדיום הקפוא. לאחר מכן, משעים את משקע התאים, ומעבירים את התאים לבקבוקון חדש המלא במדיום תרבותי. לאחר מכן, התאים מונחים באינקובטור בטמפרטורה של 37 °C למשך 24 שעות לפחות. |
|
רמת בטיחות ביולוגית: |
לצורך טיפול ושימור תרבויות Neuro-2a חובה להשתמש במעבדות ברמת בטיחות ביולוגית 1. |
3. יתרונות וחסרונות של קו תאים Neuro-2a
לתאי Neuro-2a ישנם מספר יתרונות וחסרונות המבדילים אותם משורות תאים עצביים אחרות. להלן רשימה של כמה מהיתרונות והחסרונות הבולטים של תאים אלה.
יתרונות
היתרונות של קו התאים הנוירובלסטומה העכברי Neuro-2a הם:
-
קלים לתחזוקה
קו התאים Neuro-2a אינו כרוך בהליכים מורכבים או מסובכים של תרבית תאים. הם קלים לגידול ולתחזוקה במעבדות מחקר.
-
מודל תאי עצב במבחנה
Neuro-2a הוא מודל תאי עצב נוח הנמצא בשימוש נרחב בקרב חוקרים העוסקים במחקרים על התפתחות והבחנה של תאי עצב.
חסרונות
החסרונות של תאי Neuro-2a הם:
-
מקור עכברי
Neuro-2a הוא ממוצא עכברי, וחוקרים צריכים לנהוג בזהירות כאשר הם משליכים תוצאות ממחקרים המבוססים על עכברים לבריאות ומחלות בבני אדם, מכיוון שהביולוגיה של עכברים ובני אדם יכולה להיות שונה באופן משמעותי.
4. יישומים מחקריים של קו תאי Neuro-2a
לתאי Neuro-2a יש יישומים רבים בתחום המחקר הנוירולוגי. להלן כמה שימושים מבטיחים של קו תאים זה:
- התפתחות עצבית: Neuro-2a הוא מודל תאים עצביים במבחנה הנמצא בשימוש נרחב לחקר התפתחות עצבית ותהליכים נלווים כגון התמיינות, צמיחת אקסונים והיווצרות סינפסות. מחקר שנערך בשנת 2020 השתמש בתאי Neuro-2a כדי לחקור את תפקידו של microRNA-124 בהתמיינות תאים עצביים המושרה על ידי חומצה רטינואית [2]. מחקר אחר בחן את ביטוי קולטן חומצה רטינואית גמא (RARG) ו-miRNA-124 בתאי נוירובלסטומה (N2A). מחקר זה הציע כי RARG הוא יעד של miR-124 ומדכא צמיחת נויריטים [3].
- נוירוטוקסיות: Neuro-2a משמש גם להערכת ההשפעות הרעילות של תרופות, כימיקלים או גורמים סביבתיים על תאי עצב. לדוגמה, מחקר שנערך על ידי Zhihong Yin ועמיתיו חקר את הנוירוטוקסיות של ביספנול A (BPA), כימיקל סביבתי, באמצעות תאי Neuro-2a. הם הבחינו כי BPA מדכא את התמיינות התאים העצביים ואת התרבותם על ידי שיבוש שלמותם התאית והסינפטית [4].
- סינון תרופות: תאיNeuro-2a משמשים גם להערכת הפעילות הטיפולית של מספר תרופות, תרכובות ומוצרים טבעיים. לדוגמה, במחקר אחד נעשה שימוש בתאי Neuro-2a ונחקר הפוטנציאל האנטי-חמצוני של תמצית צמח Gingko biloba. יתר על כן, המחקר הציע כי תמצית זו גורמת לירידה באגרגציה של Aβ ויכולה להוות טיפול פוטנציאלי למחלת אלצהיימר [5].
5. פרסומי מחקר העוסקים בתאי Neuro-2a
להלן כמה מאמרים מחקריים מעניינים העוסקים בקו התאים Neuro-2a.
אלקמידים דמויי פיפרין מ-Piper nigrum מעוררים את מקדם BDNF ומקדמים צמיחת נויריטים בתאי Neuro-2a
מחקר זה, שפורסם ב-Journal of Natural Medicines, 2018, בחן את ההשפעות הטיפוליות של אלקמידים המבודדים מפלפל לבן (P. nigrum) על תאי עצב Neuro-2a.
Nkx2. 1 downregulation מעורב בחריגות מוחיות הנגרמות מעודף חומצה רטינואית
מחקר זה, שפורסם ב-Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020, הציע כי הגן Nkx2.1 ממלא תפקיד חשוב בהתפתחות המוח של עכברים על ידי ויסות שרשרת האיתותים Shh.
חשיפה לביספנול A גורמת לנוירוטוקסיות הקשורה לתפקוד לקוי של הסינפסות והציטוסקלטון בתאי נוירו-2a
מאמר זה פורסם ב-Toxicology and Industrial Health (2023) והציע כי ביספנול A, חומר כימי סביבתי, גורם לנוירוטוקסיות בתאי Neuro-2a ומשבש את תפקודם הסינפטי והציטוסקלטלי.
הקסרלין מווסת את מסלולי MAPK ו-PI3K/Akt בתאי Neuro-2A ומעכב רעילות אפופטוטית הנגרמת על ידי מי חמצן
מאמר זה, שפורסם ב-Pharmaceuticals (2021), הציע כי התרופה הקסארלין מווסתת את מסלולי PI3K/AKT ו-MAPK בתאי נוירובלסטומה (Neuro-2a) ומעכבת אפופטוזיס בתאי נוירו-2a הנגרם על ידי מי חמצן.
מאמר מחקרי זה, שפורסם בכתב העת Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021), הציע שתמצית הפרי Emblica officinalis מדכאת דלקת עצבית בתאי Neuro-2a, ולכן עשויה להועיל לטיפול במחלות דלקתיות עצביות.
6. משאבים לתאי Neuro-2a: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
להלן משאבים מקוונים הזמינים בנושא תאי Neuro-2a. הם כוללים פרוטוקול לגידול תאי Neuro-2a ולטרנספקציה.
- פרוטוקול טרנספקציה של Neuro-2a: Neuro-2a הוא מארח מתאים לטרנספקציה. קישור זה ינחה אתכם לגבי פרוטוקול הטרנספקציה של קו התאים. יעילות הטרנספקציה של Neuro 2a משתנה בין ריאגנט לריאגנט.
הקישור הבא מכיל את פרוטוקול תרבית תאי Neuro-2a.
- פרוטוקול תרבות תאי Neuro-2a: קישור זה יסייע לכם ללמוד את פרוטוקול תת-תרבות תאי Neuro 2a.
- תאי Neuro-2a: האתר מכיל ידע מקיף על מצעי תאי Neuro-2a, צפיפות זריעה ופרוטוקולים לתרבית משנה ולטיפול בתרבויות משומרות בקריו ובתרבויות מתרבות.
מקורות
- Lulevich, V., et al., מכניקת תאים בודדים מספקת אמצעי רגיש וכמותי לבחינת אינטראקציות בין פפטיד בטא-עמילואיד ותאי עצב. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): עמ' 13872-7.
- You, Q., et al., תפקידו של miR-124 בוויסות התמיינות תאי Neuro-2A המושרה על ידי חומצה רטינואית. Neural Regen Res, 2020. 15(6): עמ' 1133-1139.
- Su, X., et al., קולטן חומצה רטינואית גמא הוא יעד של microRNA-124 ומעכב צמיחת נויריטים. Neuropharmacology, 2020. 163: עמ' 107657.
- Yin, Z., et al., חשיפה לביספנול-A גרמה לנוירוטוקסיות והייתה קשורה לסינפסות ולשלד התא בתאי Neuro-2a. Toxicology in Vitro, 2020. 67: עמ' 104911.
- Chen, L., et al., תמצית גינקו בילובה (EGb) מעכבת לחץ חמצוני בתאי נוירו 2A המבטאים יתר על המידה APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.